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《军医进修学院》 2001年
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高胆固醇血症引起听力下降的分子机制研究

赵辉  
【摘要】:本研究建立高胆固醇血症大鼠模型,利用分子生物学技术,分析高胆固醇血症对听力及对听觉器官线粒体DNA缺失突变的影响,探讨高胆固醇血症造成听力下降的分子机理和线粒体DNA缺失突变在其中的意义。 一、大鼠高胆固醇血症与听觉器官线粒体DNA~(4834)缺失的关系 目的:探讨大鼠高胆固醇血症对听觉器官线粒体DNA~(4834)缺失 以及 听力下降的影响。方法:60只大鼠随机分为实验组(第一组 3 8只) 和对照组(第二组22只),第一组大鼠以高胆固醇饲料喂养,时间为 6个月,建立高胆固醇血症大鼠模型;第二组则在相同条件下以普通 饲料喂养。检测血清胆固醇和过氧化脂质水平,比较两组动物血脂变 化;进行ABR检查,了解实验前后听阈上升程度并进行比较;随机取 左侧耳蜗(第一组21份,第二组10份)和左侧蜗神经核(第一组27 份,第二组13份)提取DNA,通过套式聚合酶链反应(nest polymerase chain reaction,nest PCR)技术,利用不同引物扩增正常和发生缺失突 变的mtDNA片段,将PCR产物纯化后进行序列分析,检测听觉器官 mtDNA~(4834)缺失率并进行统计分析。结果:1.高胆固醇饲料喂养可造 成大鼠血清胆固醇和过氧化脂质水平明显升高(t检验,p<0.05);2.两 组大鼠随年龄增加听阈均上升,高胆固醇血症大鼠的听阈上升更加明 显,为38dB,和第二组(听阈上升28dB)的差异具有显著性(t检验, p<0.05);3.所有标本都扩增到正常mtDNA编码tRNA和NADH基因, 并且高胆固醇血症大鼠听觉器官mtDNA~(4834)缺失发生率较第二组明显 增高,其差异具有显著性(X~2检验,P<0.05)。结论:长期高胆固醇 .且_ 军医进修学院硕士论文 摘要 高胆固醇血症在听力下 降和线粒体DNA缺失 夹变中的意义 血症可以加剧大鼠的听力下降,听觉器官 mtDNA4’“缺失可能是其作 用机制之一。 二、大鼠高胆固醇血症与噪声暴露对听觉器官线粒体DNA‘”‘缺失的 。影响 目的:探讨高胆固醇血症和噪声两种因素对大鼠听力及听觉器官 线粒体 DNA“’‘缺失的分别及协同影响。方法:18只大鼠随机分为 高 胆固醇血症+噪声暴露组(第三组)10只,单纯噪声暴露组(第四组) 8只。第三组大鼠以高胆固醇饲料喂养,第四组则在以普通饲料喂养, 6个月后暴露在 112-11 6dB SPL白噪声环境中,每天 4小时,连续 40 天。比较两组动物血脂变化并进行ABR检查动物听阈变化并进行比 较;通过套式聚合酶链反应(nest pol”erase chain reaction,nest PCR) 技术,利用不同引物扩增正常和发生缺失突变的mtDNA片段,将PCR 产物纯化后进行序列分析,检测听觉器官mtDNA‘”‘缺失率并进行统 计分析。结果:1.高胆固醇饲料喂养可造成第三组大鼠血清胆固醇升 高,并使听阈上升更加明显,为38dB,和第H组(听阈上升28dB) 的差异具有显著性k检验,p功.05);Z.予以噪声暴露后,两组动物 听阈差距变小,其差异无统计学意义;3.高胆固醇血症+噪声暴露、高 胆固醇血症和单纯噪声暴露组的大鼠听觉器官mtDNA‘”‘缺失发生率 的差异没有显著性;但均较对照组明显增高,其差异具有显著性(X’ 检验,P<0刀5)。结论:噪声暴露和高胆固醇血症均可以引起大鼠的听 力下降及听觉器官 mtDNA“’‘缺失,噪声暴露的作用要强于高胆固醇 血症。 总之,本研究采用高胆固醇血症动物模型,利用套式PCR等分子 生物学技术,明确了高胆固醇血症以及噪声暴露对听力的分别及协同 .2. 军医进修学院硕士论文 摘要 高胆固醇血症在听力下降和线粒体DNA缺失突变中的意义 作用,发现噪声暴露对听力的损害作用要强于高胆固醇血症,并分析 了可能的机制。发现高胆固醇血症和噪声暴露的听力损伤作用中,均 和听觉器官mtDNA‘”‘缺失有密切关系,本研究首次发现高胆固醇血 症可使动物听觉器官mtDNA‘”‘缺失率明显增加。本研究结果提示: 线粒体DNA缺失突变不仅和老化有关,还与高胆固醇血症和噪声暴露 引起的听力下降有关。
【学位授予单位】:军医进修学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R764.5

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