大鼠神经干细胞的培养和鉴定

【摘要】： 目的 培养并鉴定神经干细胞。材料与方法 ①采用无血清培养方法，在bFGF和EGF作用下，培养P1期和成年期大鼠的海马和纹状体神经干细胞。②对原代培养第5天的神经球进行计数，以比较P1期与成年期大鼠的海马与纹状体神经干细胞在数量上的差别。③用免疫组织化学方法鉴定所培养的神经球和及其分化后的细胞。结果 ①原代与传代培养的细胞均可持续分裂增殖形成悬浮生长的神经球。②神经球呈巢蛋白阳性，提示由神经干细胞组成。③神经球贴壁后分化的细胞呈NSE阳性或GFAP阳性，提示所培养的神经球细胞分化后至少有神经元和星形胶质细胞。④免疫双标染色显示GFAP阳性细胞多于NSE阳性细胞，分别占73.8％和26.2％。⑤来源于P1期脑的神经干细胞显著多于来源于成年脑的神经干细胞(p＜O.01)；但来源于同龄脑的海马和纹状体的神经干细胞在数量上无显著差别(p＞O.05)。结论 大鼠海马和纹状体均存在神经干细胞，但其培养的数量受年龄影响。