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《中国人民解放军军医进修学院》 2002年
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EGF对大鼠肠道缺血—再灌注损伤的防治作用及其相关机制的初步研究

邢峰  
【摘要】:1.目的 研究表皮细胞生长因子(EGF)对缺血-再灌注所致肠道损伤的防治作用及其相关机制。 2.材料和方法采用肠系膜上动脉夹闭-松夹方式制成肠缺血-再灌注模型。Wistar大鼠80只,体重200-250克,随机分成对照组(C)、肠缺血组(I)、肠缺血-再灌注组(R)和EGF治疗组(E)。根据缺血后再灌注时间的不同又将R组和E组又分成2、6、12和24小时共4组(R_2、R_6、R_(12)、R_(24)以及E_2、E_6、E_(12)、E_(24),每组8只动物。R组和E组在松开动脉夹的同时经右颈静脉注入EGF100μg/kg或生理盐水0.5ml。各时相点取腹主动脉血、腹腔淋巴结及小肠组织,检测血浆和组织DAO活性、血浆D-乳酸水平、细菌移位及主要脏器功能;利用免疫组织化学方法检测PCNA、EGFR、c-fos、c-jun和磷酸化MAPK在缺血-再灌注后小肠组织的表达;用RT-PCR方法测定小肠组织中EGF mRNA和EGFR mRNA的表达水平。 3.主要结果 3.1肠道缺血后,小肠、结肠及盲肠和部分结肠变苍白、水肿,再灌注后肠段明显充血、水肿及坏死,以再灌注后12h最明显。血浆和组织中DAO活性、血浆D-乳酸水平升高,细菌培养阳性率增加,部分脏器功能受损并发生相应病理学改变。外源性EGF治疗可显著减轻以上改变。 3.2 I/R后小肠EGF mRNA和EGFR mRNA的表达逐渐升高,EGFmRNA在再灌注后6h达到峰值,而EGFR mRNA在再灌注后12h达到峰值,随后降低,24h仍高于正常。E组EGF mRNA和EGFRmRNA的表达较R组增加。 3.3缺血和再灌注初期EGFR的表达未发生明显改变,随着再灌注时间的延长逐渐增强。EGF治疗明显增强了EGFR的表达。 3.4缺血后隐窝内PCNA阳性细胞显著增加。随着再灌注时间的延长,阳性细胞的比例有所下降,但位于隐窝底部的细胞大部分仍为阳性染色。E组较R组相应时间点PCNA表达增加。 硕土论文 中文摘耍 3.5在各组大鼠C个 的表达较C一b巴强烈,其分布变化趋势基本一致。缺血 和再灌注使其表达显著增加,在12h达到高峰。E组大鼠的表达较R组减弱。 3石正常和伤后大鼠的绒毛上皮、小肠隐窝和固有层均可见到 p44/42 MK 染色阳性的细胞。互组和R组的表达增加,E组阳性细胞数量及核内表达的 比例均高于R组相应时间点。 磷酸化SAPK/tw在正常肠道中表达量极低,M损伤后略有增加,其 表达趋势在各组间相似,于再灌注12小时较高。E组表达减弱。 磷酸化p38 A4AI,K仅分布在隐窝底部,与干细胞的分布非常接近。再灌 注后2小时其表达有所下降,随后显著增加,在24小时明显下降接近正常。 Ee治疗组的表达较R组提前。 结 论: l 外源性FJOF治疗有助于减轻由于缺血-再灌注引起的肠道损伤, 有助十控制肠道损伤的进展并进而预防MODS的发生。 2 外源‘降EGF减轻肠道损伤的作用可能是遍过调控 EGF Iy1JLvA 和EGTh InRNA表达,进而激活各种途径促进肠道损伤的修复。 3 外源性EGF治疗促进了缺血-再灌注后肠道细胞(尤其干细胞) 的增殖,此过程可能与MAPK &路的激活有密切联系,其中磷酸 化P38 MAPK有可能成为肠道干细胞的标志物。 综上所述,外源性EGF能够通过基因水平调控促进缺血·再灌 注后肠道的修复,其作用与MAPK路的激活密切相关,这为从 分于水平利用生长因子干预或调控肠道损伤后的修复过程提供了 重要的理论依据。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R363

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【参考文献】
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