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初级感觉神经元在咬合创伤致牙髓组织损害和伤害感受中的作用

朱美玲  
【摘要】: 创伤性咬合既引起口面部多组织的损害,还导致口面部深部组织的慢性疼痛。而初级感觉神经元受刺激后,出现传入、传出功能以及敏感性的变化。这些变化参与组织损伤和慢性疼痛。在创伤性咬合导致的组织损害和慢性疼痛的研究中,未见实验观察初级感觉神经元的作用的研究。 创伤性咬合引起牙齿感觉过敏症及牙髓炎等牙髓疾病,这些疾病的主要病理改变是早期的牙髓充血和晚期的牙髓炎症、变性、坏死。研究人员根据病理研究结果,推测其发病机制是咬合创伤引起牙髓血液循环障碍。咬合创伤如何引起牙髓血液循环障碍?目前普遍认为是过大殆力对牙周血管的压迫作用。即创伤(牙合)时,施加到牙齿的过大的(牙合)力压迫牙周、根尖周血管,包括经过根尖孔和侧枝根管进入牙髓的血管,导致牙髓血液循环障碍。但是,新的微循环理论认为,初级感觉神经元受到刺激后,感觉神经末梢逆行性释放P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)等血管活性神经肽,引起牙髓血管扩张和浆液渗出,调节微循环,并参与外周的组织损伤、炎症、免疫、修复等反应。Kvinnsland的实验和我们前期实验的结果显示咬合创伤后牙髓SP-、CGRP-阳性纤维表达发生变化。综合这两个实验的结果和SP、CGRP的作用,提示咬合创伤可能是通过牙髓感觉神经的传出功能,影响牙髓血液循环、牙本质形成等牙髓组织的结构和功能,引起牙齿感觉过敏症及牙髓炎等牙髓疾病。但目前还没有实验观察咬合创伤一牙髓感觉神经传出功能的变化—牙髓组织的结构和功能三者间的直接关系。 创伤性咬合除引起口面部组织损害外,还导致口面部深部组织的慢性疼痛。口面部慢性疼痛本身作为一种常见的疾病,又难以治愈,研究 解放车军供进修学院博土后出站报告 摘要 口面部慢性疼痛的机制有重要的临床意义。但目前口面痛机制研究的主 要内容是口面部急性疼痛的中枢传导和痛觉调控机制。口面部慢性痛的 研究热点仍集中在分析额下颌关节(TMJ)及相关肌肉慢性疼痛的病因、 治疗、心理因素的作用方面。口面部慢性痛机制的研究相对薄弱,尤以 初级感觉神经元敏化改变的研究匾乏。而慢性疼痛的机制正是当前神经 科学领域研究的重点和热点。研究结果证明长期、反复的伤害性刺激引 起初级感觉神经元表型变化。正常情况下少表达或不表达的疼痛兴奋性 神经递质和受体系统的合成、表达和释放显著增加,使神经元致敏,是 慢性疼痛的重要发病机制。SP、谷氨酸(*IU ) 是极为重要的疼痛兴奋 性递质,它们在初级中枢中合成。表达和释放增加是神经元兴奋性增高、 致敏的标志,也是机体产生慢性疼痛的主要机制。因此,观察咬合创伤 后初级中枢SP、Gill及其受体的变化,能明确咬合创伤后是否发生了初 级中枢的敏化现象,有助于了解日面部慢性疼痛的机制。 PN3、NSN 两种钠通道只在伤害感受神经元中特异表达。外周组织 和神经损伤后,初级感觉神经元钠通道基因表达和电生理性质的变化是 疼痛的分子病理生理学基础,是伤害感受器致敏的关键机制。但口面部 组织和神经慢性损伤后,两种通道表达的研究极少,不清楚PN。、NaN 的变化趋势。 针对上述研究现状,我们设计本实验。 第一部分:咬合创伤后初级感觉神经元钠通道和中枢端末梢的变化 目的:了解咬合创伤后初级感觉神经元传入功能和敏感化的改变: 观察咬合创伤后,初级中枢兴奋性递质和受体的合成、中枢端末梢释放。 伤害感受特异性钠通道基因表达的状况。分析日面部慢性疼痛时,初级 感觉神经元痛信号发生、传导以及敏感化机制。 方法:制备大鼠持续性咬合创伤模型,采用分子杂交和免疫组织化 学染色方法,观察不同时间点、三叉神经节前速激肽原(PPTA)mRNA。 6-CGRP mRNA和三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)SP、NMDA受体亚 单位l型(NMDAR)表达的变化。采用RT-PCR方法观察下牙槽神经 干损伤和咬合创伤大鼠三叉神经节中 PN3 mRNA、NaN mRNA表达的变 化。 .2- 解放军军医进修学院博十后出站报告 摘要 结果: O)持续性咬合创伤后,实验侧三叉神经节 PPTA mRNA和 6-CGRP mRNA表达高于对照侧。咬合创伤 7天组,实验侧 PPTA mRNA和日 .CGRP mRNA表达增高程度高于 15天和 30天组。15天和 30天两组间 PPTA mRNA和 p-CGRP mRNA的表达增高幅度降低。 (2)咬合创伤7天,实验侧VC内SP、NMDARI表达显著高于对照 侧。咬合创伤 15天,实验侧 VC内 SP、NMDARI表达的灰度均数值高 于对照侧,但无统计学意义。咬合创伤30天,实验侧VC内SP兔疫阳 性结构灰度均数值仍高于对照侧,但两侧的差距小于 15天组。NMDARI 免疫阳性结构灰度均数值与对照侧的灰度均数值接近。 (3)PN。mRNA和 NaN mRNA在对照组、神经损伤组和咬合创伤组 均有表达。咬合创伤后 30天,PN3 mRNA和 NaN mRNA表达轻度上调。 单纯切断下牙槽神经干 30天,PN;mRNA和 NaNmRNA表达下调。 结论:咬合创伤后,初级


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