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《中国人民解放军军医进修学院》 2003年
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金属蛋白酶在大鼠视神经挤压伤的表达及意义

张水华  
【摘要】: 目的:试图理解视神经轴突对于轴突损伤的潜在反应,对于帮助神经再生和修复的治疗是非常有必要的。能够降解细胞外基质的金属蛋白酶参与了与细胞外基质降解、细胞移行、增殖等有关的所有病理及生理过程。在损伤愈合的过程中发挥重要作用。本研究的目的是探讨视神经损伤时,基质金属蛋白酶(MMPs)中MMP-2(明胶酶A)和MMP-9(明胶酶B)是否表达及其可能发挥的作用。 方法:我们首先在大鼠视神经球后2mm处用反向镊子夹持5秒钟,建立了大鼠视神经不完全损伤的挤压伤模型,通过视网膜神经节细胞计数,荧光金顺行标记和组织病理来观察神经损伤一般情况;然后利用明胶酶谱的方法测定损伤后视神经组织内的MMP-2和MMP-9的活性变化;Western biotting进一步确认所消化的条带的属性;用逆转录-聚合链反应法(RT-PCR)测定MMP-2和MMP-9的mRNA的表达;免疫组织化学和原位酶谱的方法观察MMPs在损伤轴突中的表达位置与可能功能。 结果:视神经挤压伤后2周的视网膜神经节细胞剩余57.2%,荧光金顺行标记示踪观察损伤远端轴突数目明显减少,组织病理显示损伤区附近内有胶质细胞增生,不利于再生的间质分子硫酸软骨素蛋白多糖的沉积和新生血管的形成。明胶酶谱结果显示正常视神经组织内仅表达MMP-2,不表达MMP-9。在视神经挤压伤后表达MMP-9,1天时表达水平最高。MMP-2在视神经损伤后表达水平略有增加,1周时最高。Western blotting进一步确认所消化的条带是MMP-2 军医进修学院 博士论文 中文摘要 和 M M P-9。RT-P C R结果表明正常的视神经仅表达 M M P-2的 mRNA,损伤的视神经有MMP.2和MMP-9 的mRNA表达。 原位酶谱和免疫组织化学结果显示MMPs在损伤区域的边缘 高表达,并和区域内的CSPG呈现负相关的趋势。 结论:视神经损伤后不能很好的再生可能与损伤区轴突 的新生血管物理障碍有关,还可能和损伤中心沉积的CSPG 的化学性阻碍有关。MMP-2 和 MMP-9 参与了视神经损伤后 的修复过程,可能在视神经损伤后降解CSPG,促进再生。其 来源可能是视神经内的胶质细胞。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R774.6

【参考文献】
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