收藏本站
《中国人民解放军军医进修学院》 2006年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

乙型肝炎病毒X蛋白反式调节作用的研究

李进  
【摘要】:乙型肝炎病毒(HBV)感染,不仅引起急、慢性病毒性肝炎,而且是肝纤维化和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的主要病因。病毒基因组编码的蛋白通过反式调节宿主肝细胞基因组的表达,调控肝细胞的生长,可能是HBV致病(癌)的重要分子机制之一。HBV基因组具有4个主要的开放读码框架(ORF),分别命名为S、C、P、X区,其中X区编码154个氨基酸残基组成的17.5 kDa的产物-HBx。HBx是一种具有反式调节作用的病毒蛋白质,关于其反式调节作用,来自不同研究小组的实验结果甚至相互矛盾,因此,HBx在病毒复制和发病机制中的确切作用还有待进一步阐明。利用寡核苷酸基因芯片技术对HBx蛋白反式调节靶基因进行新的开拓,全面了解HBx蛋白反式调节作用的靶基因,有助于阐明HBV感染的部分分子生物学机制。 本课题首先应用常规分子生物学技术构建HBx蛋白的真核表达载体pcDNA3.1(-)-X,并将构建好的重组质粒瞬时转染人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞,以空载体为平行对照。应用寡核苷酸基因芯片技术对HBx反式调节的靶基因进行筛选,同时结合生物信息学技术对差异表达的基因进行分析。在筛选的21,329条基因中,有426条差异表达的基因,其中168条基因表达上调,258条基因表达水平下调,这些基因包括许多与细胞生长调节、细胞凋亡、信号转导、免疫反应、物质代谢、细胞分裂周期、肿瘤发生和转移等相关的基因,还包括一些未知功能的新基因,其中之一命名为HBx蛋白反式激活基因11(XTP11)。 为进一步研究细胞中表达的HBx蛋白对抑癌基因p53的调节作用,我们利用生物信息学技术确定抑癌基因p53的启动子区域(p53p),构建真核报告基因表达载体pCAT3-p53p;以该质粒单独及与pcDNA3.1(-)-X共转染HepG2细胞,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果显示,克隆的p53启动子序列具有激活下游基因转录的活性,当pCAT3-p53p与pcDNA3.1(-)-X共转染时CAT的表达活性明显下降;进一步采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测表明,瞬时转染了pcDNA3.1(-)-X的HepG2细胞中p53基因mRNA表达减少。说明HBx蛋白在转录水平上反式抑
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R373.21

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 范红梅;杨林;;乙型肝炎病毒X蛋白的生物学功能研究进展[J];国际流行病学传染病学杂志;2006年02期
2 高婧;董长垣;胡俊;李艳;Joseph K K Li;戴莹;郭淑芳;;HBV X蛋白与宿主APOBEC3G蛋白之间的相互作用[J];武汉大学学报(理学版);2007年04期
3 宫嫚;成军;刘妍;纪冬;李筠;;应用抑制性消减杂交技术克隆和筛选HBV XTP12蛋白反式激活基因的上调基因[J];传染病信息;2008年05期
4 何南祥;张秀芝;蒋自钟;郭茂福;;人肠粘膜等匀浆对乙型肝炎抗原的抑制作用[J];浙江大学学报(医学版);1979年04期
5 刘宝璋;乙型肝炎病毒的最新研究和展望[J];日本医学介绍;1980年08期
6 刘志平,施溥涛,江寿平;乙型肝炎病毒的表面抗原蛋白分子的二级结构预测[J];科学通报;1985年08期
7 杨玉英;何启君;黄果勇;黄达春;;一例熊猴感染乙型肝炎病毒四年的血清学及肝组织光、电镜观察报告[J];实验动物与比较医学;1989年01期
8 陈贤钦;;肝炎病毒可能触发肝癌基因[J];生物学通报;1989年09期
9 ;裸鼠用于乙型肝炎病毒的体内研究[J];新乡医学院学报;1991年03期
10 鲁仁杰;王慧玲;李光晨;刘鑫;;132例急性乙型肝炎患者HBV基因型分析[J];内蒙古民族大学学报(自然科学版);2006年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 沃健儿;侯伟;刘克洲;李敏伟;陈离伟;胡中荣;刘荣华;胡敏君;;不同结合臂长10-23 DNAzymes对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑制作用[A];2005年浙江省感染病、肝病学术会议论文汇编[C];2005年
2 王春花;成军;王欣欣;吴煜;刘妍;郎振为;;乙型肝炎病毒前-前-S蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化研究[A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编[C];2006年
3 孔祥平;任向荣;;RNA干扰抑制乙型肝炎病毒的研究进展[A];2006年慢性乙型肝炎治疗进展研讨会资料汇编[C];2006年
4 趙豔玲;蔡光明;张新全;李壮;;中药活性部位JMS的抗病毒作用评价[A];海峡两岸三地药理学学术报告会论文汇编[C];2001年
5 趙豔玲;蔡光明;张新全;李壮;;中药活性部位JMS的抗病毒作用评价[A];海峡两岸三地药理学学术报告会论文汇编[C];2001年
6 黄力毅;罗光汉;吴继周;;慢性肝病患者乙型肝炎病毒BCP变异意义的研究[A];中华医学会第七次全国感染病学术会议论文汇编[C];2001年
7 雷宇;黎燕;王蜀强;陈压西;周智;任红;;乙型肝炎病毒S基因四环素调控体系的构建及其在真核细胞中的表达[A];中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2005年
8 孟忠吉;李磊;李新宇;张正茂;张振华;田拥军;王宝菊;张珺;雷延昌;杨东亮;;乙型肝炎病毒急性感染小鼠模型的建立[A];中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2005年
9 王春花;成军;郎振为;王欣欣;吴煜;刘妍;;乙型肝炎病毒前-X蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化[A];中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2005年
10 侯伟;刘克洲;沃健儿;倪勤;李敏伟;;10-23 DNAzyme对乙型肝炎病毒X基因表达的抑制作用[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 石家庄市第五医院妇产科副主任、副主任医师 朱宝申;浅谈乙型肝炎病毒的父婴传播[N];石家庄日报;2009年
2 周欣;乙型肝炎病毒检验[N];中国医药报;2003年
3 北京大学基础医学院微生物学教研室教授 庄辉;单项抗-HBc阳性说明……[N];健康报;2001年
4 张小梅;辰欣 “丁贺”成为国家重点新产品[N];中国医药报;2010年
5 湖南省肿瘤医院主任医师 刘保安;癌症能传染吗?[N];大众卫生报;2000年
6 ;乙型肝炎病毒母婴垂直传播与人类白细胞抗原-DR区域基因相关性的研究[N];中国医药报;2003年
7 ;乙型肝炎病毒x蛋白对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响[N];中国医药报;2003年
8 ;1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达[N];中国医药报;2003年
9 记者 张淑会;我省九成医学跟踪项目达标[N];河北日报;2009年
10 郁忠新;被全球“通缉”的5种病毒[N];中国中医药报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李进;乙型肝炎病毒X蛋白反式调节作用的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
2 张岩;应用RNAi技术抑制乙型肝炎病毒复制的实验研究[D];第四军医大学;2005年
3 张秋;TRAIL及其相关分子在HBV感染所致凋亡改变中的机制研究[D];山东大学;2005年
4 刘光泽;复制型HBV转基因小鼠的建立、生物学特性、应用及无免疫耐受研究[D];第一军医大学;2007年
5 彭仙娥;乙型肝炎病毒在非酒精脂肪肝发生中的作用及机制研究[D];福建医科大学;2009年
6 潘金水;乙型肝炎病毒包膜蛋白与跳跃断裂易位蛋白相互作用的验证[D];福建医科大学;2009年
7 刘晓颖;肿瘤坏死因子α诱导的cIAP_2蛋白抑制乙型肝炎病毒复制的研究[D];复旦大学;2005年
8 李发武;乙型肝炎病毒L60V、I97L变异核壳蛋白对HepG2细胞HLA-A表达和细胞凋亡的影响[D];中南大学;2007年
9 牟劲松;乙型肝炎病毒HBsAg基因稳定转染Chang-Liver肝细胞系差异表达蛋白的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
10 鲁晓擘;新疆维吾尔族乙型肝炎病毒基因型分布、准种特性及其生物学意义研究[D];新疆医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 肖鸿敏;乙型肝炎病毒X基因多态性及X蛋白结合蛋白的初步研究[D];福建医科大学;2009年
2 李金丽;乙型肝炎病毒X蛋白与hDaxx相互作用及对HepG2细胞凋亡的影响[D];南华大学;2007年
3 陈芸;HBV X蛋白与细胞色素C氧化酶3相互作用位点的研究[D];福建医科大学;2009年
4 薛璐;乙型肝炎病毒母婴传播高危因素的研究[D];天津医科大学;2005年
5 刘金霞;阿德福韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床研究[D];山东大学;2005年
6 樊和斌;α/β干扰素受体在外周血单核细胞、肝脏组织内表达及乙型肝炎病毒基因型临床意义的初步研究[D];第一军医大学;2005年
7 姚永远;新型乙型肝炎病毒细胞感染模型的建立[D];山东大学;2010年
8 单幼兰;HBV cccDNA荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[D];重庆医科大学;2005年
9 任永强;HBV YMDD变异检测方法的建立及临床应用的初步研究[D];第三军医大学;2004年
10 张慧;La蛋白对乙型肝炎病毒蛋白质表达和病毒复制的影响研究[D];第二军医大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026