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《中国人民解放军军医进修学院》 2006年
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表皮参与瘢痕形成的实验和临床研究

许明火  
【摘要】:创面异常愈合形成增生性瘢痕,其病因学不明。这类瘢痕可在任何外伤后出现,但目前研究得最多的是烧伤后瘢痕,因为它往往给病人带来诸多并发症。5岁以下儿童是烧伤后瘢痕的高发人群。瘢痕又红又硬又痒,往往影响美观,在关节部位还会导致功能障碍。增生性瘢痕多出现在延迟愈合的烧伤创面,过去认为表皮仅仅起到很次要的作用,因此通常被称为“真皮病”。创面愈合是一个牵涉到表皮、真皮、内皮细胞、炎性反应的复杂过程,与其说是真皮异常所引起的疾病,还不如把它看作是表皮与间充质相互作用异常的结果。 在第一部分研究中,取少量烧伤后增生性瘢痕和临近的正常皮肤组织,用免疫组化的方法比较两种组织中角质素14(与细胞增殖有关)、角质素10(与细胞分化有关)和角质素16(与细胞活化有关)的变化。结果发现瘢痕中角质素16明显表达增强,角质素14稍弱,但角质素10表达降低。同时,取两种组织的表皮层,分离、纯化总DNA,将等量的两种组织的mRNA进行逆转录,合成荧光分子(cy5或Cy3)掺入的cDNA作为探针,与用约14000个人类基因PCR产物制成的微矩阵表达谱芯片进行杂交,经严格洗片后,扫描仪扫描芯片荧光信号图象,计算机分析比较两种组织中存在差异表达的基因。在14000个基因中,4例患者的瘢痕和正常表皮中共同存在差异的基因有138个,包括与瘢痕的形成密切相关的生长因子TGF-β,IL-1和ICAM-1等基因。结果提示瘢痕表皮的持续活化可能是瘢痕增生的重要原因。 在第二部分,我们切取增生期瘢痕和临近部位正常皮肤,进行正常表皮细胞、正常成纤维细胞和瘢痕成纤维细胞的培养,收集经过12小时表皮细胞培养的无血清培养液,分别配成0%、5%、10%和20%浓度的条件培养液,分别加入到每孔接种有10~4个正常和瘢痕成纤维细胞的96孔细胞培养板中。根据。~3H-TdR和~3H-3脯氨酸的掺入值计算成纤维细胞的增殖情况和胶原合成速率。经统计,表皮细胞条件培养液能诱导正常皮肤成纤维细胞的增殖并降低胶原的合成。这表明用表皮或细胞膜片尽快覆盖创面是抑制创面成纤维细胞异常分泌胶原的手段。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R622

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