收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

脂多糖预处理催老大鼠急性肺损伤时心功能改变及机制

陈琪  
【摘要】: 1.背景 目前全球人口老龄化的趋势日益突出,随着年龄增加老年人的多种器官发生退行性改变,各器官的代偿能力明显下降,且有个别器官处于功能不全的临界态或失代偿态。临床上,老年人易于发生肺部感染,其常常是老年人多器官功能不全(multiple organ dysfunction syndrome in elderly,MODSE)的主要原因和诱发因素。老年人多器官功能不全患者中,心肌受损严重,心力衰竭的比例大,引起猝死的危险性也高。心肌的收缩和舒张功能降低的主要原因可能与自由基损伤、能量代谢障碍及心肌细胞内钙超负荷有关。但在老年MODS中,心肌细胞钙离子的跨膜转运异常情况及参与钙离子循环的离子通道蛋白的变化及其作用报道尚少。本课题应用脂多糖成功建立了老年大鼠急性肺损伤模型,观察其心功能的改变情况及其相关机制。 2.目的 建立老年大鼠模型,应用脂多糖(lipopolusaccharide LPS)进行预处理致急性肺损伤,观察其心功能改变,心肌及肺组织形态学改变及氧自由基损伤心肌细胞内钙离子浓度的变化等情况;观察LPS对培养心肌细胞的直接损伤作用;观察分析各组大鼠心肌细胞肌浆网钙离子释放通道(RyR2)、肌浆网钙离子泵(SERCA2a)及钠钙交换蛋白(NCX1)mRNA及蛋白表达的变化。初步探讨急性肺损伤大鼠心功能降低的发生机制。 3.材料和方法 3.1脂多糖致急性肺损伤大鼠模型心功能改变 选择成年雄性大鼠120只,体重250~450g,购于解放军总医院实验动物中心,取60只成年大鼠,20只给予生理盐水对照,40只给予LPS(6mg/kg)处理,其中20只再给予地塞米松干预。60只以D-半乳糖(125mg/kg)经皮注射制作人工催老大鼠模型,20只给予D-半乳糖,40只给予LPS处理,其中20只再给予地塞米松(2mg/kg)干预。共分6组,每组20只。成年大鼠组、成年大鼠LPS处理组、成年大鼠LPS+地塞米松干预组;D-半乳糖处理大鼠组、D-半乳糖+LPs处理组,D-半乳糖+LPS+地塞米松干预组。观察上述各组大鼠心、肺形态学改变及血气分析等改变,选择上述各组大鼠12只,进行心脏血流动力学观察,记录HR、LVSP、LVEDP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)等。并检测各组大鼠心肌组织中丙二醛及超氧化物歧化酶活性改变。心、肺组织形态学改变。另取上述各组大鼠8只,急性分离心肌细胞,应用激光共聚焦显微镜观察心肌细胞内钙离子浓度的改变。 3.2脂多糖对心肌细胞的直接损伤作用 急性分离乳鼠心肌细胞并进行细胞培养,应用D-半乳糖(10g/L)诱导细胞衰老,再用LPS或TNFa进行处理,激光共聚焦显微镜观察心肌细胞内游离钙离子浓度改变。 3.3急性肺损伤大鼠心肌细胞内钙离子跨膜转运异常相关蛋白表达异常 用RT-PCR和Western blot方法,观察各组大鼠心肌细胞肌浆网钙离子释放通道(RyR2)、肌浆网钙离子泵(SERCA2a)及钠钙交换蛋白(NCX1)mRNA及蛋白表达的变化。 4.结果 4.1急性肺损伤大鼠模型心功能及生化指标的改变 应用D-半乳糖静脉注射6~8周的方法成功建立了人工催老大鼠模型。应用LPS静脉注射6小时,成功建立急性肺损伤模型。成年LPS处理组大鼠和D-半乳糖+LPS处理组大鼠的肺组织病理切片出现肺充血、水肿、炎性细胞浸润等改变,对照组大鼠无上述改变。成年LPS处理组大鼠和D-半乳糖+LPS处理组大鼠均出现低氧血症,氧分压与对照组大鼠比较差异有显著性(P<0.05)。成年LPS处理组大鼠和D-半乳糖+LPS处理组大鼠的心功能较对照组大鼠心功能显著降低(P<0.05)。成年LPS处理组大鼠和D-半乳糖+LPS处理组大鼠心肌细胞内氧自由基损伤情况较对照组大鼠严重,差异具有显著性意义(P<0.05)。成年LPS处理组大鼠和D-半乳糖+LPS处理组大鼠心肌细胞内钙离子浓度较对照组大鼠升高,差异有显著性意义(P<0.05)。成年LPS处理组大鼠和D-半乳糖+LPS处理组大鼠较对照组心肌细胞电镜显示线粒体显著破坏、肌丝模糊断裂等损伤,对照组大鼠心肌细胞无上述改变。地塞米松可以改善上述各项指标,对脂多糖造成的急性肺损伤的肺组织及心肌组织具有一定程度的保护作用。 4.2脂多糖对心肌细胞的直接损伤作用 与对照组比较,D-半乳糖处理组细胞内钙离子浓度无显著增加;与D-半乳糖组比较,D-半乳糖+TNFa处理组心肌细胞内钙离子浓度增加,差异有显著性(P<0.05);与D-半乳糖组比较,D-半乳糖+LPS处理组心肌细胞内钙离子浓度增加,差异有显著性(P<0.05);D-半乳糖+TNFa处理组与D-半乳糖+LPS处理组比较,钙离子浓度增加,差异有显著性(P<0.05)。上述结果表明,脂多糖通过造成心肌细胞内钙超负荷,对心肌细胞产生直接损伤作用。 4.3急性肺损伤大鼠模型钙转运蛋白mRNA及蛋白表达的变化 老年组LPS介导的急性肺损伤大鼠模型肌浆网钙离子释放通道(RyR2)mRNA下调;肌浆网钙离子泵(SERCA2a)mRNA及蛋白表达均显著降低;钠钙交换蛋白(NCX1)mRNA及蛋白表达显著上调。 5.结论 5.1 D-半乳糖处理组大鼠在脂多糖处理致急性肺损伤时,心功能显著降低, 可能与自由基损伤、能量代谢障碍及心肌细胞内钙超负荷有关。 5.2 LPS联合D-半乳糖处理的培养心肌细胞内钙离子浓度显著增加,LPS对心肌细胞有直接损伤作用。 5.3 LPS处理组催老大鼠较成年大鼠的心功能显著降低,心肌细胞肌浆网钙离子释放通道(RyR2)mRNA下调,肌浆网钙离子泵(SERCA2a)及钠钙交换蛋白(NCX1)异常在LPS处理催老大鼠心肌细胞较显著,其所造成的心肌细胞内钙超负荷在催老大鼠急性肺损伤致心功能降低的过程中起重要作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 石应康;急性肺损伤的研究进展[J];中华创伤杂志;2000年11期
2 王和枚,丁日高,阮金秀;急性肺损伤的中性粒细胞作用机制研究进展[J];中国工业医学杂志;2002年06期
3 陈志强,黄宏,刘友生;巨噬细胞在急性肺损伤中的作用[J];中国急救医学;2002年02期
4 尹文,虎晓岷,袁静,黄杨,宋祖军,张金山;急性肺损伤核因子-κB的活性变化及糖皮质激素的干预研究[J];中国急救医学;2002年09期
5 钱桂生;急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征研究进展[J];重庆医学;2002年09期
6 朱光发;核因子-κB与急性肺损伤关系的研究进展[J];国外医学.呼吸系统分册;2002年02期
7 阎锡新,郭丽萍;中性粒细胞在急性肺损伤中的作用[J];国外医学.呼吸系统分册;2002年04期
8 罗富荣;中性粒细胞与急性肺损伤[J];国外医学.麻醉学与复苏分册;2002年02期
9 钱桂生;全身炎症反应综合征、急性肺损伤与急性呼吸窘迫综合征[J];辽宁医学杂志;2002年03期
10 杨毅;核因子κB的活化与急性肺损伤[J];现代医学;2002年02期
11 黄英;肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡在急性肺损伤中的作用[J];中国现代医学杂志;2002年03期
12 张溪林,林材元;恙虫病致急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征[J];中华传染病杂志;2003年06期
13 何静,陈方祥,王建民;输血相关急性肺损伤[J];创伤外科杂志;2003年05期
14 刘又宁,解立新;急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征近年来国内研究进展[J];中华结核和呼吸杂志;2004年01期
15 史雪梅;β_2-整合素与急性肺损伤[J];中国急救医学;2004年01期
16 陈华,周有生,祝琳,陈阳龙;性激素在急性肺损伤中作用的初步研究[J];中华急诊医学杂志;2004年01期
17 祝慈芳,朱威,揭志军,蔡映云;α_1-抗胰蛋白酶的制备及其防治急性肺损伤的疗效[J];中国生物制品学杂志;2004年01期
18 陈静,赵金垣;急性肺损伤与急性呼吸窘迫综合征[J];中国职业医学;2004年01期
19 虞文魁,李维勤;急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征的治疗进展[J];中国实用外科杂志;2004年03期
20 程晓明,张彦琦,钱桂生;细菌感染在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中的作用[J];第三军医大学学报;2004年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 潘鹏飞;于湘友;;侧卧位通气对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征患者肺复张容积的影响[A];第三届重症医学大会论文汇编[C];2009年
2 伍峻松;王沈华;周文;陈金明;张茂;徐少文;干建新;赵小纲;;严重创伤合并急性肺损伤恶化进展至急性呼吸窘迫综合征的临床危险因素分析[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年
3 胡宗风;孙海晨;邵旦兵;李百强;聂时南;;急性肺损伤血管内皮保护作用的临床研究[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
4 孙军;韩忠朝;孟磊;王伟强;秦永明;;脐带间充质干细胞治疗急性肺损伤[A];中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会大会论文集[C];2010年
5 陈文学;王洵;安晓静;杨冬;陈芬儿;白春学;;基于核磁共振波谱的急性肺损伤代谢组学研究[A];第十六届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];2010年
6 宋振举;白春学;童朝阳;;急性肺损伤的分子遗传学研究进展与展望[A];《中华急诊医学杂志》更名十周年、World Journal of Emergency Medicine创刊一周年庆典《中华急诊医学杂志》第十届组稿会、第三届急诊医学青年论坛论文汇编[C];2011年
7 刘斌剑;王建民;陈林;;急性肺损伤的基因治疗[A];湖北省暨武汉市生物化学与分子生物学学会第七届第十四次学术年会论文摘要集[C];2003年
8 张忠;洪文;钟晓玲;陈生;曲敬来;;痰热清对急性肺损伤患者保护作用的临床研究[A];2006年全国危重病急救医学学术会议论文集[C];2006年
9 张畔;刘剑虹;虎盘林;骆宁;;急性一氧化碳中毒大鼠急性肺损伤的实验研究[A];2006年全国危重病急救医学学术会议论文集[C];2006年
10 陈新;陈荣昌;岑燕遗;刘杰;钟南山;;自主呼吸状态下犬急性肺损伤早期干预呼吸生理机制研究[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 朱耀斌;部分液体通气技术治疗急性肺损伤的实验研究[D];中国协和医科大学;2010年
2 刘东;过氧化物酶体增殖物激活受体γ在内毒素致急性肺损伤中的保护作用及机制[D];华中科技大学;2006年
3 吴海青;间充质干细胞对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺保护作用及机制研究[D];南方医科大学;2012年
4 宋琳;携带缺氧诱导有丝分裂因子的骨髓间充质干细胞对急性肺损伤的作用研究[D];复旦大学;2008年
5 李晓锋;肺动脉—左心房无泵肺辅助治疗急性肺损伤的研究[D];中国协和医科大学;2009年
6 李建军;人脐带间充质干细胞治疗内毒素诱导大鼠急性肺损伤的实验研究[D];山东大学;2012年
7 李波;小鼠急性肺损伤时期促炎症消退介质脂氧素的变化及调节机制研究[D];华中科技大学;2013年
8 李强;急性肺损伤肺微血管内皮细胞间隙连接蛋白40与血管通透性的关系研究[D];第四军医大学;2009年
9 李伟栋;完全液体通气技术治疗乳猪急性肺损伤的实验研究[D];浙江大学;2011年
10 孙继萍;骨髓间充质干细胞对内毒素致大鼠急性肺损伤生物学作用的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张蕾;一氧化氮对急性肺损伤大鼠白介素-6,环氧合酶-2的影响[D];华中科技大学;2008年
2 李宏林;不同原因致大鼠急性肺损伤炎性反应及地塞米松干预效果的差异[D];河北医科大学;2006年
3 雷霆;丹参对急性肺损伤血管生成素表达影响的实验研究[D];重庆医科大学;2013年
4 任文霞;胆红素对抗急性肺损伤形成作用机制的研究[D];山西医科大学;2005年
5 刘辉;外源性肺泡表面活性物质对急性肺损伤治疗效果及量效关系的研究[D];南京医科大学;2005年
6 张文涵;不同剂量沐舒坦对内毒素所致大鼠急性肺损伤的阻遏作用的研究[D];河北医科大学;2005年
7 高冬娜;急性肺损伤大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶及单核细胞趋化蛋白-1的表达及意义[D];大连医科大学;2006年
8 秦开秀;乌司他丁对小鼠急性肺损伤的保护作用及其机制[D];重庆医科大学;2006年
9 李海宁;人脐带间充质干细胞对急性肺损伤氧化应激的影响[D];山西医科大学;2012年
10 李超然;内毒素诱导的急性肺损伤早期炎症反应状态变化及其与肺损伤关系研究[D];兰州大学;2012年
中国重要报纸全文数据库 前9条
1 熊学莉通讯员 曾理;急性肺损伤早诊早治降低病死率[N];健康报;2008年
2 郭姜宁 常亮 王晓静;高海拔地区急性肺损伤防治难题攻克[N];科技日报;2003年
3 郭姜宁 常亮 王晓静;急性肺损伤防治难题攻克[N];医药导报(中药报);2003年
4 ;Calfactant在儿科急性肺损伤中的疗效[N];医药经济报;2005年
5 张国民;首个治疗“非典”新药进入临床研究[N];中国医药报;2003年
6 记者 张晓松;治非典新药首次获批临床试验[N];新华每日电讯;2003年
7 邹争春 记者 陈磊;我国学者发现新生儿急性肺损伤新病因[N];科技日报;2013年
8 李山;德发现致命性输血并发症致病机理[N];保健时报;2010年
9 李山;德找到致命性输血并发症致病机理[N];科技日报;2009年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978