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《中国人民解放军军医进修学院》 2007年
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软骨细胞特异性Smad4条件基因敲除导致小鼠听力丧失和内耳发育畸形的相关研究

侯昭晖  
【摘要】: TGF-β超家族成员包括TGF-β,ACTIVIN和BMP。它们对胚胎发育、器官形成、调节细胞生长、分化、凋亡和间质的合成等方面起重要作用,其信号转导需要TGF-β受体和Smads分子的参与。Smad4是Smads共用型分子,是转导TGF-β信号的重要胞浆内信号级联分子,它与活化的受体激活型Smad分子形成复合物,移位到细胞核,与其他转录因子协同作用,调节TGF-β应答基因的转录。Smad4功能失活或是表达低下可能影响TGF-β的信号转导。为了研究Smad4基因在内耳发育中的作用,利用Cre-LoxP系统形成软骨细胞特异性Smad4条件基因敲除小鼠,绕过了应用完全基因敲除Smad4基因后导致小鼠在胚胎发育早期(e6.5)死亡的障碍。本研究通过听功能表型的观察和内耳形态学的多种方法对Smad4基因在内耳发育中的作用进行了初步研究。本研究包括以下三个部分。 第一部分动物模型的鉴定和Smad4基因在小鼠耳蜗内的表达 在应用该动物模型进行Smad4基因功能研究前,我们首先要确定该模型的可靠性和敲除基因的准确性。只有在确定动物模型成功建立后,才能够保证接下来的功能学和形态学研究最终结果的科学性。软骨细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠和ROSA26转基因小鼠交配,得到Cre和ROSA26双转基因小鼠。在双转基因小鼠中,Cre重组酶发挥作用会使来自ROSA26转基因小鼠的LacZ基因表达,通过LacZ染色观察LacZ基因表达的组织特异性来反映Cre重组酶表达的组织特异性。所有由软骨内成骨形成的骨骼,尤其是颞骨岩部LacZ染色阳性。这些证明了颞骨岩部表达Cre重组酶。应用Southern Blot技术来证明只有在软骨细胞内Smad4基因被特异性的剔除。免疫组织化学荧光显示在新生的Smad4+/+小鼠内耳软骨细胞内有强烈的萤光显色,而Smad4-/-小鼠内耳软骨细胞内没有检测到荧光信号。这证明了在小鼠内耳软骨细胞的确没有Smad4基因的表达,软骨细胞特异Smad4条件基因敲除小鼠动物模型成功建立。 应用免疫组化我们来观察了三种基因型小鼠耳蜗膜迷路内Smad4基因的表达情况,结果显示Smad4基因在三种小鼠耳蜗感觉上皮内均有广泛表达,尤其是耳蜗毛细胞和血管纹。这些结果说明在软骨细胞剔除Smad4基因没有影响内耳感觉上皮中该基因的表达。 第二部分软骨细胞特异性Smad4条件基因敲除小鼠的听功能检测 探究Smad4基因在内耳发育是否发挥作用,首先要了解动物模型的听力表型特征。在本研究中对软骨细胞特异性Smad4条件基因敲除小鼠我们进行了听觉脑干反应(auditory brainstem response ABR)、耳蜗微音电位(cochlear microphonic CM)、听神经复合动作电位(compound action potential CAP)三种听功能检查。ABR检查结果显示,野生型和杂合型小鼠均可以引出稳定的、可辨别的、可重复的ABR波形。而所有纯合子小鼠在测试条件下100 dBSPL以下均无法引出可辨别的、可重复的ABR波形。进行统计学处理,野生型小鼠和杂合型小鼠ABR阈值和纯合型小鼠ABR阈值相比差异有统计学意义(p<0.01)。CAP检查结果与ABR检查结果相似,纯合子小鼠的全频均未见听神经复合动作电位引出(click,0.5k,1k,4k,8k,16k,32k)。野生型和杂合型小鼠在测试条件下都可以引出稳定的、可辨别的神经复合动作电位波形。野生型、杂合型小鼠的CM波形可见波形幅值在给声强度增加时呈现饱和状态(非线性),而纯合子小鼠的波形随着给声强度的增加呈现非饱和状态(线性)。三种听功能检查从不同角度评价了动物模型的听功能特征,ABR显示小鼠的整个听觉通路的某个部位或是某几个部位出现了Smad4基因缺陷导致的病理变化。CM结果证明小鼠模型的耳蜗的外毛细胞功能异常,耳蜗非线性调节功能丧失。CAP的结果证明小鼠模型的听神经放电同步化不良。综合以上结果,说明由于在软骨细胞中的Smad4基因的剔除,引起这种小鼠出现重度感音神经性耳聋。这种小鼠是听功能表型稳定的Smad4基因缺陷耳聋动物模型。 第三部分软骨细胞特异性Smad4条件基因敲除小鼠耳蜗的形态学观察 在了解到这种耳聋动物模型听力表型特征之后,就要进行形态学的相关研究来获得引起这种表型变化的形态学和病理学相关信息。在这一部分中,我们应用了多种研究手段来详细评价动物模型耳蜗内的结构变化。将三种基因型小鼠的内耳取出后在显微镜下比较,可见Smad4-/-小鼠的内耳较Smad4+/+和Smad4+/-体积明显减小,而且在大体形态上呈现出耳蜗蜗尖的骨性凹陷。将三种基因型小鼠的中耳听小骨在显微镜下解剖出来后进行细微的比较,发现Smad4-/-小鼠和Smad4+/-小鼠的砧骨发育畸形。内耳标本环氧树脂包埋后半薄连续切片观察。观察到Smad4-/-小鼠耳蜗形态异常,骨螺旋板发育异常。无论是骨螺旋板的螺旋角度还是基底膜的螺旋角度均与Smad4+/+和Smad4+/-小鼠不同。测量相邻骨螺旋板的角度并经过统计学处理,显示纯合子组与其它两组相比差异有统计学意义(p<0.05)。我们对三种基因型小鼠连续切片观察了内外毛细胞、支持细胞、盖膜、螺旋韧带和血管纹的形态学特点。Smad4+/+和Smad4+/-小鼠内、外毛细胞形态正常,未见缺失;Smad4-/-小鼠的内、外毛细胞偶见点状缺失。盖膜、螺旋韧带未见明显的差异。但是值得注意的是,Smad4-/-小鼠的螺旋凸形态异常,与Smad4+/+和Smad4+/-小鼠相比较呈现明显的膨隆凸起。Smad4-/-小鼠耳蜗半薄切片螺旋神经节观察,螺旋神经节细胞胞核小,胞浆多,核与核之间间隙较大。而Smad4+/+小鼠螺旋神经节呈现正常的形态,核大,细胞间排列较紧密。对耳蜗连续切片的螺旋神经节细胞进行计数比较观察,三者螺旋神经节细胞数量差异无统计学意义(P>0.05)。 在扫描电镜观察中,Smad4+/+和Smad4+/-小鼠耳蜗各回的三排外毛细胞的纤毛发育正常,形态无异,排列有序。内毛细胞纤毛也呈现正常的形态特点。因为基因敲除后引起的耳蜗骨性发育畸形导致骨螺旋板和基底膜的形态异常,在对中回及底回的基底膜观察中我们无法从正常角度得到外毛细胞纤毛形态及排列特点的具体信息。但在此区域我们至少可以观察到内毛细胞静纤毛发育不良。在中回偏上区域,Smad4-/-小鼠内、外毛细胞的纤毛发育很差,并有静纤毛的融合、转位的出现,还可以观察到外毛细胞的点状缺失。 因为Smad4-/-小鼠耳蜗骨螺旋板和基底膜的畸形,无法得到理想的角度进行扫描电镜下毛细胞的观察,我们利用全耳蜗基底膜铺片进行免疫染色观察毛细胞形态学并且对三种基因型小鼠的毛细胞进行计数比较。首先我们先进行了基底膜的Hoechst染色,显示毛细胞的细胞核。Smad4+/+小鼠内、外毛细胞均未见缺失,内、外毛细胞核排列整齐有序。Smad4+/-小鼠内、外毛细胞偶见缺失,内、外毛细胞核排列尚整齐。Smad4-/-小鼠内、外毛细胞均可见散在的点状的缺失,毛细胞排列紊乱失序。在此基础上我们又对内、外毛细胞进行了计数,三者的内、外毛细胞数量未见统计学差异(P>0.05)。为了观察毛细胞的纤毛发育及排列情况,我们进行了Hoechst和Phalloidin双染。染色结果显示Smad4+/+和Smad4+/-小鼠内、外毛细胞纤毛形态正常,排列整齐;Smad4-/-小鼠内、外毛细胞发育不良,排列紊乱,而且由于基底膜畸形的缘故纤毛高低不一,相邻纤毛不在同一平面。 全耳蜗铺片的MyosinⅥ和Neurofilament双染色可以显示毛细胞的胞体、神经突触以及与之相连的神经丝。Smad4-/-小鼠的内毛细胞除了表现出形态各异,排列紊乱以外,还表现出与之相连的神经突触膨大,排列不规则,神经纤维减少消失的特点。与之相反,Smad4+/+和Smad4+/-小鼠无论是细胞形态、神经突触形态及排列还是神经丝的形态数量都相对正常。 对三种基因型小鼠耳蜗进行透射电镜观察,我们发现Smad4-/-小鼠外毛细胞突触末梢与另外两基因型相比,数量明显减少。在存在外毛细胞突触的情况下突触也明显较后两者小。Smad4-/-小鼠内毛细胞突触末梢与后两者相比,传入神经突触明显空泡化,与内毛细胞接触界限不清晰,神经纤维紊乱。 形态学的结果显示软骨细胞内Smad4基因的异常引起小鼠耳蜗的各种病理变化,这些都证明了Smad4基因是内耳发育所必需的基因之一。Smad4基因的功能缺陷可以导致感音神经性耳聋,Smad4基因是一种耳聋相关基因。特异性地在软骨细胞内对Smad4基因进行敲除却引起耳蜗感觉细胞发育的异常,在动物模型上提供了遗传学证据证明了在胚胎发育的早期耳周间充质细胞与感觉上皮之间的确存在着重要的信号相互作用,这种信号相互作用不仅仅是内耳骨性包囊形成所必需,更是耳蜗内感觉上皮发育为成熟的感觉细胞所必需的。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R764.43

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 于宁 ,刘军 ,谭祖林,孙建和 ,李兴启;外源性谷氨酸对豚鼠耳蜗复合动作电位及微音电位的影响[J];解放军医学杂志;2002年03期
2 杨仕明,刘清明,郭维,胡吟燕,卢云,杨伟炎,杨晓;Smad5基因敲除小鼠听生理和耳蜗形态实验观察[J];解放军医学杂志;2005年07期
3 张继帅,谭晓红,王友亮,程萱,高翔,杨晓;Cre重组酶在软骨组织特异性转基因小鼠中表达的时空分布[J];军事医学科学院院刊;2004年06期
4 卢云云,杨仕明,郭维维,胡吟燕,杨伟炎,杨晓;Smad4基因敲除对小鼠听力和前庭功能的影响[J];听力学及言语疾病杂志;2005年06期
5 宇雅苹;杨仕明;胡吟燕;郭维;孙建和;于宁;韩东一;杨伟炎;;小鼠耳蜗胚胎发育过程中Smad4基因的表达[J];中华耳科学杂志;2006年03期
6 宇雅苹;杨仕明;胡吟燕;郭维;孙建和;于宁;韩东一;杨伟炎;;Smad5基因在小鼠耳蜗胚胎发育中的作用[J];中华耳科学杂志;2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 杨仕明;刘清明;郭维;胡吟燕;杨伟炎;杨晓;;TGF-β/Smad5基因敲除致聋之机制研究[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 章戴荣;白林;;基因打靶与现代猪分子育种[J];安徽农业科学;2006年13期
2 邓安春;杨仕明;黄德亮;孙建和;杨晓;;Smad4条件基因敲出小鼠的前庭功能检测[J];第三军医大学学报;2012年07期
3 屈涓,刘顺利,邱建华,王锦玲,邱淑萍;外源性谷氨酸对内耳毛细胞及听阈的影响[J];第四军医大学学报;2004年06期
4 郭玮;徐剑文;;NeuroD对细胞分化的影响[J];福建医科大学学报;2008年02期
5 万贤凤;兰泽栋;闫福华;;骨形成蛋白-4的作用机制及功能研究现状[J];广东牙病防治;2007年04期
6 孟亚强;张柳;;成骨细胞分化过程中相关信号传导途径的研究进展[J];华北煤炭医学院学报;2007年04期
7 张剑;杨晓梅;高建刚;;小鼠基因敲除的研究进展[J];山东大学学报(理学版);2011年10期
8 屈涓,邱建华,刘顺利,刘津平;外源性谷氨酸引发的内耳毛细胞损伤与支持细胞GLAST表达的相关性研究[J];听力学及言语疾病杂志;2005年06期
9 宇雅苹;杨仕明;;小鼠内耳发育的分子生物学研究进展[J];听力学及言语疾病杂志;2006年05期
10 邓安春;杨仕明;黄德亮;;BMP/Smad信号通路对内耳发育影响的研究进展[J];听力学及言语疾病杂志;2008年03期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王慧娟;pEGFP-N2-BMP2转染P19细胞诱导向心肌分化[D];河北医科大学;2011年
2 周玉娟;合浦珠母贝TGFβ信号通路相关基因的克隆及功能研究[D];清华大学;2010年
3 刘建忠;转基因小鼠乳腺表达人瘦蛋白的研究[D];华中农业大学;2000年
4 王宇澄;大鼠耳蜗氨基糖甙类药物损伤后出现的新细胞[D];复旦大学;2004年
5 贾琳琳;刺五加注射液对豚鼠庆大霉素耳毒性拮抗作用的实验研究[D];中国医科大学;2006年
6 朱华萍;X射线辐射损伤过程中小鼠睾丸Smads的表达及其意义[D];第四军医大学;2006年
7 莫德林;猪PNAS-4基因的结构与功能研究及α1,3-GT基因敲除载体的构建[D];华中农业大学;2006年
8 邓安春;Smad4基因在小鼠内耳前庭发育中作用的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年
9 杨丽;OP模鼠MSCs生物学特性及药物对大鼠MSCs骨向分化的干预研究[D];暨南大学;2007年
10 朱纲华;FGF、BMP、WNT信号通道对乳鼠耳蜗神经发育及谷氨酸钠耳毒性作用的影响初步研究[D];中南大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 钱克莉;TGF-β1、TIMP-1及TIMP-2小干扰RNA对肝纤维化大鼠TH1型/TH2型细胞因子影响的研究[D];重庆医科大学;2011年
2 刘庄;Prestin基因相关人耳聋疾病动物模型的建立[D];山东大学;2011年
3 龙琪;高尔基体磷酸蛋白2应对炎症以及肝损伤的生理功能研究[D];中国科学技术大学;2011年
4 胡静;大鼠睾丸Smad1,Smad2,Smad4和Smad5蛋白的表达与发育变化研究[D];第四军医大学;2001年
5 孙勍;耳蜗谷氨酸兴奋性毒性及谷氨酸—谷氨酰胺循环机制的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
6 刘清明;TGF~β/Smad5基因敲除小鼠听生理和耳蜗形态实验观察[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
7 屈涓;谷氨酸对耳蜗毛细胞、GLAST及听阈的影响[D];第四军医大学;2004年
8 纪育斌;谷氨酸—天冬氨酸转运体在豚鼠Corti器的分布及生理意义的探讨[D];第四军医大学;2005年
9 朱二勇;BMPR-IB基因作为新疆几种绵羊多胎性能候选基因的研究[D];新疆农业大学;2006年
10 欧阳菁;柚皮苷对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和骨向分化的影响[D];暨南大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘少锋,周梁,李华伟,沈云珍;胚胎小鼠耳蜗感觉上皮的形态发生[J];中国耳鼻咽喉头颈外科;2005年07期
2 杨晓,孙彦洵,周江,黄培堂,黄翠芬,徐晓玲,李翠玲,J.Cotay,陈林,邓初夏;Smad5双等位基因剔除ES细胞的建立及其初步研究[J];中国科学(C辑:生命科学);2000年06期
3 杨仕明,刘清明,郭维,胡吟燕,卢云,杨伟炎,杨晓;Smad5基因敲除小鼠听生理和耳蜗形态实验观察[J];解放军医学杂志;2005年07期
4 郭维,杨仕明,胡吟燕,杨伟炎;Smad5基因在小鼠耳蜗中的表达及定位[J];解放军医学杂志;2005年07期
5 杨晓,黄培堂,黄翠芬;Smads基因功能的研究进展[J];中国生物化学与分子生物学报;2000年02期
6 于宁,孙伟,孙建和,李兴启;豚鼠外淋巴灌流实验技术的改进及耳蜗功能和形态学观察[J];听力学及言语疾病杂志;1999年01期
7 卢云云,杨仕明,郭维维,胡吟燕,杨伟炎,杨晓;Smad4基因敲除对小鼠听力和前庭功能的影响[J];听力学及言语疾病杂志;2005年06期
8 郝振明,杨晓,程萱,周江,黄翠芬;软骨组织特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的研制和鉴定[J];遗传学报;2002年05期
9 毛春明,杨晓,程萱,吕娅歆,周江,黄翠芬;角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立[J];遗传学报;2003年05期
10 李兴启,孙伟,于宁,孙建和,姜泗长;顺铂中毒后豚鼠耳蜗电位变化的特征及形态学实验观察[J];中华耳鼻咽喉科杂志;1998年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 葛成;BMP信号调控研究进展[J];国外医学.生理.病理科学与临床分册;2002年03期
2 霍艳英;TGF-β及Smads信号在癌症中的作用[J];国外医学.肿瘤学分册;2002年03期
3 宋仕玲;TGF-β及Smad与肝纤维化[J];国外医学.消化系疾病分册;2003年04期
4 周为军;SMAD与血管疾病[J];国外医学.神经病学神经外科学分册;2004年01期
5 孙燚;宋建星;汪滋民;陈江萍;陈颖;谭晓洁;白晋;;TGF-βRⅠ、Smad2、Smad3及Smad7在瘢痕疙瘩中的表达[J];中华整形外科杂志;2006年05期
6 张伟,王吉耀 ,王根生;SMADs基因与消化系统肿瘤[J];胃肠病学和肝病学杂志;2002年02期
7 李龙英;肖谦;高原;高爱滨;吴绮楠;;SMAD3,SMAD7在糖尿病大鼠心肌组织的表达[J];中国老年学杂志;2009年02期
8 陈跃磊;丁小燕;;BMP信号通路与结肠癌[J];细胞生物学杂志;2009年05期
9 杨红军;SMAD介导的TGF-β信号转导与大肠癌[J];国外医学.分子生物学分册;2001年04期
10 何文喜,牛忠英,赵守亮,臧晓霞,朱怡玲;建立稳定表达Smad蛋白的MDPC-23细胞模型[J];临床口腔医学杂志;2004年02期
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1 王俊;;Regulation of Mice Cerebral Angiogenesis by Smad4 and Pten[A];中国遗传学会模式生物与人类健康研讨会会议论文集[C];2010年
2 ;Maternal Smad3 Deficiency Compromises Decidualization in Mice[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
3 陈海勇;黄晓茹;柳飞;付平;Rainer L.Heuchel;A.J.Szalai;钟志刚;蓝辉耀;;Smad7在糖尿病肾病的保护和治疗作用[A];中国生理学会第十一届张锡钧基金全国青年优秀生理学学术论文交流及评奖会议综合摘要[C];2011年
4 熊杰;卫伟;马兵;夏照帆;李勤;余文林;程飚;;TGF-β1/Smad3信号转导通路对皮肤成纤维细胞调控作用的研究[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年
5 慕容;鲍华燕;花芳;胡卓伟;;TRB3与Smad3相互作用促进肿瘤细胞的迁移和侵袭[A];2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2011年
6 熊杰;卫伟;马兵;夏照帆;李勤;余文林;程飚;;TGF-β1/Smad3信号转导通路对创面愈合作用的活体内研究[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年
7 张纪岩;;Smad4对效应CD8+T细胞分化的影响[A];2012年中国青年遗传学家论坛会议文集[C];2012年
8 赵晰;;TGF-β/Smad信号传导通路在肝肾硬化后肾纤维化中的作用机理及中药干预作用[A];第十一届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2010年
9 杨晓;;TGF-β/Smad4信号通路维持组织稳态的生理功能和机制[A];中国药理学会第十一次全国学术会议专刊[C];2011年
10 郦佳慧;吕开阳;李恒宇;夏照帆;;LPS诱导的肝脏急性期反应在Smad3基因敲除小鼠中被抑制[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 通讯员 俞志新 记者 李水根;骨碎补总黄酮可以促进骨形成[N];健康报;2010年
2 记者 李天舒;先天性心脏病病因被发现[N];健康报;2009年
3 ;探秘烧伤的内源性损伤[N];健康报;2010年
4 记者 耿倩;中科协青年科学家论坛在并举行[N];科学导报;2008年
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1 艾熙;非Smad通路在小鼠结肠癌肝转移中的作用[D];华中科技大学;2012年
2 时强;通过改变Smad4的表达研究BMP7-Smad4-Id2信号通路在大肠癌发生发展中的作用及其机制[D];复旦大学;2012年
3 贺文芳;Smad2在氧糖剥夺再灌注损伤中的表达及其作用机制研究[D];中南大学;2012年
4 任敏;芩丹胶囊对血管外膜成纤维细胞TGF-β1/Smad信号转导通路影响的研究[D];山东大学;2011年
5 李军;晶状体上皮细胞TGF-β/Smad信号转导通路的研究[D];天津医科大学;2011年
6 王伟;BMP/Smad信号通路对猪卵泡颗粒细胞的影响[D];南京农业大学;2010年
7 王惕;慢病毒介导Smad7基因对角膜增殖与纤维化的抑制作用[D];复旦大学;2010年
8 张斌豪;Smad4缺失通过激活Akt通路增加结直肠癌恶性程度并诱导5-氟尿嘧啶耐药性[D];华中科技大学;2013年
9 齐心;Smad4在维持胚胎心脏增殖中的作用研究[D];南京大学;2010年
10 刘鸣昊;芪珠方对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号传导通路的影响[D];南京中医药大学;2013年
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1 吕辉珍;雷奈酸锶通过骨形态发生蛋白-2/Smad通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化[D];南方医科大学;2013年
2 张雪莹;Smad4的条件性缺失对T细胞活化的影响[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
3 朱琳;大鼠脑缺血再灌注和丁苯酞干预后海马组织中Smad4的表达变化及Smad4在高尔基体定位的研究[D];中南大学;2010年
4 曾雪华;囊素五肽对人肺成纤维细胞细胞外基质及转化生长因子-β1/Smad信号通路的影响[D];南京大学;2013年
5 门桐林;视黄酸调节Smad3表达阻抑放射诱导的肺损伤[D];中国医科大学;2010年
6 贺彧;沉默Smad4对猪卵巢颗粒细胞增殖及细胞周期的影响[D];南京农业大学;2009年
7 杨燕芳;Smad3和Smad7在实验性自身免疫性神经炎中的动态表达[D];中南大学;2011年
8 黄晓丹;雷奈酸锶通过TGF-β1/Smad通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化[D];南方医科大学;2013年
9 郭琼雅;外源性转化生长因子-β1对肝星状细胞中Smad3和Smad7早期表达的影响[D];华中科技大学;2013年
10 陈丽;天生饮对肾血管性高血压大鼠肾Smad3和Smad7表达的影响[D];湖南中医药大学;2008年
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