收藏本站
《中国人民解放军军医进修学院》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

西多福韦对人乳头瘤病毒感染的宫颈癌细胞生长抑制作用的研究

杨怡卓  
【摘要】: 目的研究我国宫颈癌(cervical carcinoma,CC)及癌前病变中人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的现状及其型别特征;探讨西多福韦(Cidofovir,CDV)对HPV感染的宫颈癌Hela细胞和Siha细胞增殖生长的抑制作用,以评价西多福韦抗HPV感染和抗肿瘤的应用价值。 方法1.临床研究:①回顾性分析690例患者的HPV检测、宫颈细胞学及阴道镜下宫颈组织病理学检查结果。其中,细胞学检查应用TCT法(Thinprepcytology test),高危型HPV检测应用第二代杂交捕获实验(Hybrid CaptureⅡ,HCⅡ)。②回顾性分析153例宫颈癌及癌前病变的石蜡包埋组织标本,提取组织中DNA,应用基因芯片技术检测HPV亚型。 2.体外研究:①应用MTT比色法和集落形成试验,测定西多福韦作用前后Hela细胞和Siha细胞的活性;②应用实时定量PCR法,观察西多福韦对Hela细胞中HPv18 E6、E7 mRNA和Siha细胞中HPV16 E6、E7 mRNA表达的影响;③应用Western-blot法,观察西多福韦用药前后Hela细胞和Siha细胞中p53、Rb等抑癌基因的表达;④应用流式细胞仪,检测西多福韦对Hela细胞和Siha细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响;⑤应用TRAP-ELISA法,检测西多福韦用药前后Hela细胞和Siha细胞端粒酶的活性。 3.体内研究:应用Hela细胞和Siha细胞分别建立裸鼠人宫颈癌模型(2×10~6个细胞/只)。肿瘤形成后,随机将裸鼠各分为3组,分别在瘤内注射PBS、2.5mg/ml西多福韦(0.25mg/次)和5.0mg/ml西多福韦(0.5mg/次),3次/周,共3周。①通过比较肿瘤体积和重量,观察西多福韦对裸鼠肿瘤生长的抑制作用:②应用Western-blot法,观察西多福韦用药前后肿瘤中p53蛋白的表达:③应用免疫组织化学法检测各组肿瘤切片中PCNA抗原的表达,同时应用TUNEL技术检测西多福韦对细胞凋亡的影响。 结果1.临床研究:①宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ/Ⅲ和浸润癌患者的高危型HPV阳性率均在90.00%以上,且细胞学、病理学级别越高,高危型HPV感染率越高;②HPV负荷量越高,宫颈病变程度越严重;③宫颈病变程度不同,其感染的HPV亚型亦有所不同,其中HPV16是主要的致病亚型;④HPV混合感染率随着宫颈病变病理学级别的增高而增加。 2.体外研究:①MTT比色法和集落形成试验结果显示,西多福韦能明显抑制Hela细胞和Siha细胞的增殖活性,与对照组比较有显著性差异(P0.05);②实时定量PCR结果证实,西多福韦能明显降低Hela细胞中HPV18 E6、E7和Siha细胞中HPV16 E6、E7 mRNA的表达:③西多福韦可使Hela细胞和Siha细胞中p53蛋白的表达增高,且具有剂量依赖关系,还可使细胞中非磷酸化Rb蛋白产物增加,磷酸化Rb蛋白产物降低;④西多福韦能使Hela细胞和Siha细胞阻滞于细胞周期的S期和G_1期;⑤与对照组比较,西多福韦能明显抑制Hela细胞和Siha细胞的端粒酶活性(P0.01)。 3.体内研究:①西多福韦能明显抑制接种了Hela细胞和Siha细胞的裸鼠肿瘤的体积和重量,与对照组比较有显著性差异(P0.01);②Western-blot结果显示,西多福韦能增加裸鼠肿瘤中p53蛋白的表达;③西多福韦还可使肿瘤中PCNA的表达降低,诱导肿瘤细胞凋亡。 结论高危型HPV感染是宫颈癌的根本致病因素,清除HPV感染是预防宫颈癌发生的关键。西多福韦对HPV感染的宫颈癌Hela细胞和Siha细胞及其荷瘤裸鼠肿瘤的增殖生长具有明显的抑制作用,并能诱导细胞凋亡。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R737.33

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 商宇红,白丽霞,魏丽惠;中药保妇康栓对宫颈癌细胞抑制作用的分子机制研究[J];中国妇产科临床;2003年05期
2 赵超,魏丽惠;干扰素α-2b对宫颈癌细胞HPV16 E6E7基因抑制作用的研究[J];中国妇产科临床杂志;2005年03期
3 赵方辉,李楠,马俊飞,张洵,吴令英,戎寿德,Lorincz A,Belinson J,乔友林;山西省襄垣县妇女人乳头状瘤病毒感染与宫颈癌关系的研究[J];中华流行病学杂志;2001年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 余小琴;宫颈癌筛查及其新进展综述[J];安徽预防医学杂志;2004年03期
2 沈丹;左艳;闫彩平;;保妇康栓治疗伴有人乳头瘤病毒感染的宫颈上皮内瘤Ⅰ型38例[J];安徽中医学院学报;2009年02期
3 李灿宇,刘继红,黄必军;p53基因多态性与宫颈癌关系的初步研究[J];癌症;2004年S1期
4 赵方辉,乔友林;宫颈癌病因学研究进展[J];癌症进展;2004年01期
5 李丽;玛依努尔·尼亚孜;陈凤;朱开春;刘新伟;热孜亚·买买提孜;孙振柱;赵丽霞;张询;潘秦镜;刘新伏;武燕萍;乔友林;;新疆维吾尔族女性HPV感染状况及其分布特征研究[J];癌症进展;2010年02期
6 楼姣英;于妍妍;金哲;;中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞P53泛素化降解途径的实验研究[J];北京中医药;2009年01期
7 陈厚霖;何艳;;HPV不同亚型感染与宫颈病变的关系[J];兵团医学;2011年04期
8 李雨聪;王冬;;重组人干扰素α2β栓治疗HPV感染临床观察[J];重庆医学;2011年26期
9 齐力;;保妇康栓配合α-干扰素栓治疗宫颈糜烂疗效观察[J];长春中医药大学学报;2010年06期
10 孔改霞;;保妇康栓联合激素治疗老年性阴道炎[J];当代医学;2010年19期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 乔友林;;子宫颈癌预防研究的里程碑[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2007年
2 尹格平;王丽;黄海士;何君梅;;hTERC基因在宫颈病变上皮中的扩增及与HPV感染和病理学相关性研究[A];妇科肿瘤疑难病例讨论会暨妇科微创技术研讨会会议资料汇编[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈汶;中国生殖器疣和子宫颈癌HPV感染型别流行病学研究[D];北京协和医学院;2010年
2 王金桃;雌孕激素与HPV在宫颈癌发生中的交互作用及相关因素研究[D];复旦大学;2004年
3 李淑敏;宫颈鳞癌组织中相关肿瘤标志物的蛋白组学研究[D];中国协和医科大学;2004年
4 陈庆云;一、二氟甲基鸟氨酸、木黄酮对宫颈永生化上皮细胞、宫颈癌细胞及裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其细胞周期调控机理 二、宫颈癌前病变液基细胞中人乳头瘤病毒16亚型物理状态的检测[D];中国协和医科大学;2004年
5 李华;Fas/Fas L基因单核苷酸多态与子宫颈癌遗传易感性[D];中国协和医科大学;2005年
6 李云波;中药清毒栓对HPV相关宫颈癌防治的实验研究[D];北京中医药大学;2007年
7 张新;辽宁沈阳城市妇女人乳头瘤病毒感染状况及中药干预的研究[D];辽宁中医药大学;2007年
8 肖静;中药疣毒净制剂治疗HR-HPV感染宫颈病变的临床研究[D];广州中医药大学;2008年
9 李泽松;缺失型α-地中海贫血基因诊断芯片及在分子流行病学研究中的应用[D];重庆大学;2008年
10 张小燕;子宫颈人乳头状瘤病毒检测和治疗的实验研究[D];中国协和医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 蒋宏颉;高危型HPV感染和宫颈脱落细胞中hTERC基因表达的研究[D];中国医科大学;2010年
2 陈海丽;儿黄散治疗CIN临床观察及其诱导宫颈癌Hela细胞凋亡机制实验研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
3 焦桢;人乳头瘤病毒负荷量与宫颈病变的相关性研究[D];新疆医科大学;2010年
4 张晓静;重庆永川地区妇科疾病患者人乳头瘤病毒的分子流行病学研究[D];重庆医科大学;2009年
5 陶林;TCT、DNA定量分析和HPV检测对新疆维族宫颈癌的普查研究[D];石河子大学;2009年
6 吴淑贞;薄层液基细胞学、HPV-DNA检测及肉眼观察法在粤北山区宫颈癌筛查中的应用价值[D];汕头大学;2011年
7 杨琼;血液病原联合检测基因芯片技术的研究[D];南方医科大学;2011年
8 李娟;医务人员与政府工作人员对人乳头瘤病毒(HPV)及其疫苗认知情况分析[D];大连医科大学;2011年
9 李涛;子宫颈高级别鳞状上皮内病变高危因素分析[D];南方医科大学;2011年
10 赵虎;人乳头瘤病毒检测及分型基因芯片制备的初步研究[D];郑州大学;2004年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 曹善津,钱和年,冯捷,付天云,叶雪,刘蓓,姚煜,刘广芝;HPV16E6E7转导的卵巢癌细胞系顺铂耐药性的变化[J];解剖学报;2000年02期
2 程剑华,刘伟胜,常纲;中药介入治疗原发性肝癌16例疗效观察[J];新中医;1998年03期
3 张慧娟;宫颈HPV感染与端粒改变及端粒酶激活的研究进展[J];现代妇产科进展;2001年04期
4 李洁;刘宝印;zur Hausen H;王宏;杨学志;李力;刘文;刘洪隐;陆克昭;刘旭;牛春燕;裴润芳;苏钟浦;王言贵;董继华;张桂宁;刘春杰;许吉林;林毓纯;;中国妇女宫颈癌组织中人乳头瘤病毒感染及其地理分布的调查[J];中华实验和临床病毒学杂志;1996年01期
5 程剑华,常纲,吴万垠,刘伟胜,杨志钢,孟凡喆,徐凯,李柳宁,朱迪盈,陈春泳,罗海英;莪术油和化疗药对照肝动脉灌注栓塞治疗原发性肝癌的临床研究[J];中国中西医结合杂志;2001年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 白丽霞,孙秀丽,商宇红,魏丽惠;雌激素对宫颈癌细胞生长及人乳头瘤病毒18 E7基因表达的调节[J];中国妇产科临床杂志;2004年01期
2 危敏;马文丽;张宝;孙朝晖;郑文岭;;siRNA抑制HPV18E6基因及其对HeLa细胞凋亡的影响[J];基础医学与临床;2006年10期
3 卫莹;朱靖;王青元;范少君;李敏;肖卫华;凌斌;周颖;;人乳头瘤病毒18型E6蛋白真核表达载体的构建及其在子宫颈癌细胞株Hela细胞中的表达[J];中国实验诊断学;2010年02期
4 曹娟;郑杰;;As_2O_3诱导肿瘤细胞凋亡依赖H_2O_2途径[J];中国病理生理杂志;2006年06期
5 段淑敏;杨新科;郭津津;候云德;钱止维;张景华;;人乳头瘤病毒16型和巨细胞病毒在母婴间的感染与传播[J];中华实验和临床病毒学杂志;1996年04期
6 黄邦杏;吴翠;王秀红;潘华雄;袁永辉;;非小细胞肺癌中高危型人乳头瘤病毒感染的检测[J];华中科技大学学报(医学版);2006年04期
7 顾燕;;HPV疫苗防治宫颈癌的研究进展[J];中外医疗;2008年12期
8 马晓宁;黄毅;郑锦利;;人乳头瘤病毒16、18型与宫颈上皮内瘤样病变的关系探讨[J];福建医药杂志;2008年03期
9 胡兴文;;荧光定量多重PCR检测13种高危型人乳头瘤病毒[J];实用医技杂志;2008年33期
10 杨莉;钱宁;莫宝庆;;264例子宫颈高危型人乳头瘤病毒检测结果及分析[J];江苏医药;2009年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 汤晓飞;欧阳喈;高木实;;成釉细胞瘤中人乳头瘤病毒HPV16和HPV18感染的检测[A];中华口腔医学会第七届全国口腔病理学术会议论文摘要汇编[C];2006年
2 胡越;凌志强;刘洋;朱雪琼;;人乳头瘤病毒感染状态原发性宫颈癌细胞染色体DNA拷贝数变化特征[A];第四届长三角妇产科学术论坛暨浙江省2009年妇产科学术年会论文汇编[C];2009年
3 张慧敏;章晓鹰;潘祥龙;徐平;;SYBR Green实时荧光PCR方法在检测广谱人乳头瘤病毒中的应用[A];2011全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2011年
4 张慧敏;章晓鹰;潘祥龙;徐平;;SYBR Green实时荧光PCR方法在检测广谱人乳头瘤病毒中的应用[A];2011全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2011年
5 杨建林;柳长柏;李丹莉;;人乳头瘤病毒16型E2融合钙网蛋白抗肿瘤的实验研究[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
6 王建捷;靳家玉;冯玲;郝薇;张玲;;人乳头瘤病毒负荷量与宫颈病变关系的研究[A];中华医学会第九次全国妇科肿瘤学术会议论文汇编[C];2006年
7 邹媛;郭兴中;方国伟;;1184例男性人乳头瘤病毒分型检测结果分析[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
8 朱明昭;;人乳头瘤病毒相关疾病的预防及治疗性疫苗研究进展[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
9 沈云岳;刘华;王蕾;高锋;;高危型人乳头瘤病毒检测方法的评估[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
10 刘方;王家璧;刘跃华;左亚刚;王惠珍;蔓小红;;间接免疫荧光技术检测尖锐湿疣中的人乳头瘤病毒[A];2003中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 北京地坛医院感染中心副主任医师 刘彦春;人乳头瘤病毒防治新篇[N];健康报;2010年
2 北京协和医院妇产科主任医师 谭先杰;人乳头瘤病毒的自述[N];健康时报;2010年
3 黄冰;人乳头瘤病毒毒在哪里?[N];大众卫生报;2004年
4 张中桥;肺鳞癌与人乳头瘤病毒有关[N];健康报;2006年
5 张中桥;肺鳞癌与人乳头瘤病毒感染有关[N];中国医药报;2006年
6 记者 郑莉丽;实时分子检测人乳头瘤病毒在欧洲推出[N];健康报;2009年
7 青云;抗巨细胞病毒药西多福韦[N];中国医药报;2004年
8 衣晓峰;宫颈癌年轻化人乳头瘤病毒是祸首[N];大众卫生报;2004年
9 李天舒;西藏 女性人乳头瘤病毒感染率低于全国水平[N];健康报;2008年
10 记者 王丹;高危型人乳头瘤病毒DNA检测可用于宫颈癌初筛[N];健康报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨怡卓;西多福韦对人乳头瘤病毒感染的宫颈癌细胞生长抑制作用的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
2 梁思;人乳头瘤病毒相关皮肤病发病机制研究[D];中国协和医科大学;2010年
3 修晓新;E6AP基因在宫颈癌发病机制中作用的研究[D];中国医科大学;2007年
4 米霞;尖锐湿疣患者宫颈高危型人乳头瘤病毒感染情况的调查及人乳头瘤病毒临床和亚临床感染治疗的研究[D];北京协和医学院;2012年
5 赵伟东;大肠杆菌血脑屏障侵袭基因ibeB的功能分析[D];中国医科大学;2004年
6 于晓光;纤粘连蛋白诱导Hela细胞转移机制及树舌多糖(GF)抗肿瘤转移作用的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2003年
7 李淑英;人乳头瘤病毒和EB病毒感染与上消化道肿瘤相关性研究[D];河北大学;2010年
8 赵蔚明;低危型人乳头瘤病毒优化密码E7基因的研究[D];山东大学;2004年
9 缪若羽;细支气管肺泡癌的分子生物学研究[D];中国协和医科大学;2008年
10 李远宏;人乳头瘤病毒在某些皮肤病中的检测[D];中国医科大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 邵为荣;重组人干扰素α2b阴道泡腾片对宫颈糜烂治疗的相关病毒学实验研究[D];吉林大学;2006年
2 卢五迅;人乳头瘤病毒假病毒中和模型的建立和应用[D];厦门大学;2006年
3 逯克娜;北京地区妇女对HPV病毒与宫颈病变认知程度的调查研究[D];北京中医药大学;2008年
4 李博;人乳头瘤病毒16 E6蛋白与人端粒酶逆转录酶在乳腺癌中的表达及意义[D];山西医科大学;2011年
5 高玉华;高危型HPV检测在提高宫颈癌前病变及宫颈癌筛查阳性率的研究[D];中国医科大学;2005年
6 李公祥;荧光定量PCR检测HPVDNA与宫颈癌的相关研究[D];青岛大学;2005年
7 毛静月;焦磷酸测序技术在高危型HPV分型中应用的研究[D];第二军医大学;2008年
8 王彤;人乳头瘤病毒检测在宫颈癌筛查中的应用研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2005年
9 李菁菁;人乳头瘤病毒16型E2基因的克隆、表达及鉴定[D];新疆大学;2008年
10 郑舟;人乳头瘤病毒假病毒制备方法的优化以及高通量中和实验检测系统的建立[D];厦门大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026