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《中国人民解放军军医进修学院》 2008年
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乙型肝炎病毒HBsAg基因稳定转染Chang-Liver肝细胞系差异表达蛋白的研究

牟劲松  
【摘要】: 乙型肝炎病毒(HBV)感染是严重影响我国人民健康的重要传染病。可引起急性、慢性肝炎、肝硬化,并与肝癌的发生有密切的关系。目前,对于具体的HBV致病(癌)机制尚不十分明确。其中,HBV DNA整合于肝细胞基因组被认为是肝细胞损伤、HCC发生的主要机制之一。 HBV是一种嗜肝部分双链DNA病毒,其基因组长约3.2kb,具有4个主要的开放读码框架(ORF),分别命名为S、C、P、X区,HBsAg是由S区编码的表面蛋白,其编码区长度为681个核苷酸(nt),有226个氨基酸(aa)。HBV表面抗原蛋白具有多种生物功能,并在部分整合型肝细胞内大量表达。 为了解HBsAg整合入肝细胞基因组后,肝细胞内蛋白质表达谱变化,以进一步了解其对肝细胞生长代谢的影响,本研究成功构建了HBsAg的真核表达载体并建立稳定表达目的蛋白的Chang Liver-HBsAg-EGFP细胞系及空质粒对照的Chang Liver-EGFP细胞系,经双向凝胶电泳。应用ImageMaster 2DPaltinum 5.1软件(Amersham)对胶图进行斑点检测和匹配。选取差异蛋白质点,用MALDI-TOF—MS质谱进行分析,获得肽质量指纹图谱(PMF)。然后通过Mascot搜索查询和生物信息学分析,鉴定出9个数据可靠的差异表达蛋白质分子,与对照组相比,其中6个为上调蛋白(Proteindisulfide-isomerase precursor、HSP70 class molecular chaperones、stratifin、peroxiredoxin 1、Peroxiredoxin 5、guanylate-binding protein),3个为下调蛋白(Transgelin-2、capping protein(actin filament)muscle Z-line、Porin 31HM)。包括:抗氧化蛋白、分子伴侣,参与物质代谢蛋白,细胞信号传导相关蛋白质,细胞结构蛋白等。由此提示我们:整合至细胞基因组的表面抗原基因及其表达蛋白对细胞的生长、代谢、正常生理功能造成影响甚至有诱发癌变的可能。本研究为进一步进行关于HBsAg蛋白表达对肝细胞的影响,探索HBV感染的发病机制提供了实验依据和理论基础。
【学位授予单位】:中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R512.62

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 李茜;pcDNA3.1-preS1-GFP重组质粒的构建及其在小鼠精子内的表达[D];青岛大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【同被引文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 黄洁;绿色荧光蛋白标记的乙肝病毒全基因组真核表达载体的构建与表达分析[D];第二军医大学;2006年
2 王冲;HBV DNA卵细胞载体的构建与乙肝患者卵巢组织中HBV DNA的检测[D];青岛大学;2006年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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中国重要报纸全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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8 杨桂涛;HLA-DRB1基因和慢性HBV感染相关性的初步研究[D];第四军医大学;2006年
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10 白菡;乙型肝炎病毒母婴传播机制的初步研究[D];中国医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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3 赵文昕;血液系统肿瘤患者乙型肝炎病毒(HBV)感染及其临床结局分析[D];山东大学;2018年
4 纪梦莹;BOP1、PEBP4与乙型肝炎病毒相关性肝癌关系研究[D];湖北工业大学;2018年
5 李耀妮;西藏阿里地区乙型肝炎病毒携带率和分子流行病学研究[D];泰山医学院;2017年
6 王石磊;乙型肝炎病毒复制对肝细胞Id家族表达的影响[D];重庆医科大学;2018年
7 赵敏;miRNA-146a对乙型肝炎病毒生活周期的影响及机制研究[D];重庆医科大学;2017年
8 胡丹青;乙型肝炎病毒持续复制合并非酒精性脂肪性肝病小鼠模型的建立及代谢学机制的探索[D];华中科技大学;2016年
9 陈静娜;乙型肝炎病毒核心蛋白区变异与隐匿性乙型肝炎病毒感染的相关性研究[D];南方医科大学;2017年
10 刘波;白细胞介素-34抑制乙型肝炎病毒的复制[D];重庆医科大学;2017年
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