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《第四军医大学》 2012年
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黄芪甲苷对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障及脑的保护作用机制研究

李敏  
【摘要】:脑卒中是目前全世界的头号顽疾,它是世界范围内致死致残和导致痴呆的最为重要的因素。世界范围内,脑卒中的平均发病率约为200/10万,在我国国内,脑卒中的发病率根据地区的不同而有异,约是136~486/10万。目前脑卒中已经成为中国人第二位的死亡原因,和第一位的致残原因。 当前,对于缺血性脑卒中的治疗原则是及时地恢复脑卒中区域及周围脑组织的灌流,保护仍然存活的但是处于抑制状态的脑组织,预防脑部继发性的损伤,这是当前最为积极有效的治疗方法。组织型凝血酶原激活物(tPA)是目前唯一的一个经过FDA许可的治疗缺血性卒中的药物。目前因为tPA只有狭窄的3个小时的治疗时间窗,因此目前该药的临床使用率只有约3%。如果溶栓治疗超过了3个小时的时间窗,那么使用tPA治疗就会出现症状性颅内出血和脑水肿等致命的并发症。当前对于溶栓后的脑保护治疗一线用药仍然是糖皮质激素类药物,但是其副作用大大限制了其临床的应用,如增加感染风险,增加消化道溃疡的发生。 黄芪具有利水消肿、补气升阳、益卫固表、托毒生肌的功效,且擅益气理虚,扶正固本。现代医学也表明,黄芪具有降低氧化应激,抗水肿,抑制凋亡的功效。 而现代先进的药学技术已从黄芪中分离出了众多单体,其中黄芪皂甙4(又名黄芪甲苷)目前作为衡量黄芪含量的一个重要的单体指标。已有专家证实黄芪甲苷能够降低缺血再灌注后脑内氧化应激反应,降低脑梗死体积等作用。黄芪甲苷还能够降低缺血再灌注损伤后大鼠颅内一氧化氮合酶、乳酸脱氢酶的活性,从而降低对脑组织有代谢损伤中产生的乳酸和一氧化氮含量;它能够下调一氧化氮合酶mRNA的表达,同时上调神经生长因子(NGF)和肌球蛋白受体激酶(TrkA) mRNA的表达。这两种因子能够调控神经元的生长,提高神经元在病理生理环境下的生存率。 在本实验中,我们观察到黄芪甲苷对于脑缺血再灌注损伤后对于血脑屏障具有保护作用,能够抑制再灌注后炎症级联反应。为溶栓后新的脑保护药物的开发提供了宝贵的研究基础。 第一部分黄芪甲苷对脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的保护作用 目的:观察黄芪甲苷对大鼠缺血再灌注后血脑屏障通透性的保护效应,并对血脑屏障紧密连接的关键蛋白进行测定,以确定其机制。 方法:选用48只8周的SD大鼠(250~300g)随机分配为4组。对模型组和黄芪甲苷治疗组的大鼠进行大脑中动脉栓塞及再灌注手术,假手术组大鼠只进行手术,不进行栓塞。在各组动物再灌注后24小时,对大鼠进行麻醉,心脏灌注,然后分别进行脑部伊文氏蓝浓度测定,对血脑屏障进行投射电镜观察,对血脑屏障紧密连接蛋白occludin和ZO-1进行免疫组化染色,并进行观察计数。 结果:两个黄芪甲苷治疗组(10,20mg/kg)能够显著抑制缺血再灌注后伊文氏蓝向血管外部的渗透量(P0.05);在超微结构中,黄芪甲苷治疗能够维持脑部微血管的整体结构,保护内皮细胞,维护血脑屏障的紧密连接结构和功能完整。此外,黄芪甲苷能够显著抑制缺血再灌注所引起的紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1表达的下调(P0.05)。 结论:黄芪甲苷能够对脑部缺血再灌注后血脑屏障发挥显著的保护作用,起保护机制与其能够维持血脑屏障上紧密连接蛋白的表达密切相关。 第二部分黄芪甲苷对脑缺血再灌注损伤后中性粒细胞粘附相关炎症因子的抑制作用 目的:观察黄芪甲苷对大鼠缺血再灌注后脑实质和运动功能的保护效应,并对炎症反应的相关蛋白进行测定,以确定其保护的机制。 方法:选用96只8周的SD大鼠(250~300g)随机分配为4组。对模型组和黄芪甲苷治疗组的大鼠进行大脑中动脉栓塞及再灌注手术,假手术组大鼠只进行手术,不进行栓塞。在各组动物再灌注后24小时,首先进行动物行为学评分。然后对大鼠进行脑部TTC染色,测定脑部梗死灶的体积。对大鼠进行心脏灌注,使用免疫组化法和免疫印迹法测定梗死侧脑部细胞间粘附分子-1(ICAM-1),核转录因子κb(NF-κb)蛋白的表达。抽取大鼠的静脉血,对血浆中中性粒细胞上CD11b/CD18进行流式细胞测定;提取大鼠血浆和梗死侧脑组织蛋白,使用酶联免疫吸附试验测定炎症因子TNF-α和IL-1β的浓度,对脑组织中髓过氧化物酶(MPO)浓度进行测定。 结果:从大体研究中,黄芪甲苷能够显著提高再灌注24小时动物运动行为评分,降低脑梗死灶体积;从分子机制上,黄芪甲苷能够显著降低脑组织中MPO,TNF-α和IL-1β的浓度;能够显著降低血浆中CD11b/CD18阳性白细胞的百分率,降低TNF-α和IL-1β因子在血浆中的浓度;此外,黄芪甲苷还能够抑制ICAM-1和NF-κb在缺血再灌注后脑组织中表达的上调。 结论:黄芪甲苷能够显著的发挥其脑保护效应,维持缺血再灌注后动物的运动功能,降低梗死灶的体积,这种保护的效应与其抑制中心粒细胞与内皮细胞的粘附及迁移浸润有关。而这种抑制作用又是通过对于中心粒细胞粘附相关的关键分子事件的影响来实现的。这包括它抑制了缺血再灌注后中心粒细胞上CD11b/CD18表达的上调以及内皮细胞上ICAM-1的上调。而这个过程中又涉及到黄芪甲苷对前炎症因子(TNF-α,IL-1β)和炎症调控分子NF-κb的抑制。黄芪甲苷能够发挥其脑保护作用与其广泛的抗炎作用和抗氧化作用密切相关。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R285.5;R651.1

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孔祥英,萧桃元,白家驷;高压氧对缺氧新生大鼠脑超微结构及细胞凋亡的影响[J];重庆医学;2004年04期
2 李国辉;中西医结合治疗脑血栓92例[J];福建中医药;2004年06期
3 童海光;醒脑静注射液治疗急性脑梗死的疗效观察[J];实用神经疾病杂志;2005年03期
4 李宗信 ,李斌,黄小波,敖平;中药单味药及其有效成分抗氧自由基的动物实验及临床研究[J];河北中医药学报;2002年04期
5 李丽;陶辉宇;陈杰斌;邓晖;吕建华;李双杰;;黄芪甲苷保护阿霉素心肌损伤的抗氧化机制研究[J];临床儿科杂志;2007年01期
6 陈彤,尹岭,李小鹰,王洁,王青,吴多斌;老年人群脑卒中现患率及危险因素调查[J];中华老年心脑血管病杂志;2003年03期
7 杨云华;龚伟伟;张钟爱;;缺血性脑卒中脑保护治疗的中西医研究概况[J];辽宁中医药大学学报;2008年05期
8 史中沂,孙保亮,赵同,屈焕新,胡冬梅;刺五加注射液对急性脑梗死的疗效及血液流变学的影响[J];山东医药;2003年25期
9 陈治奎;黄芪对心血管疾病作用的实验研究进展[J];心血管病学进展;2003年02期
10 田京伟,杨建雄,傅风华,蒋王林,王振华,王超云;白藜芦醇苷对羟自由基所致大鼠脑线粒体氧化损伤的保护作用[J];中国药理学通报;2003年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵晓峰;何海根;章建萍;史丽云;;黄芪对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响[J];浙江中医药大学学报;2012年06期
2 焦淑萍;倪海镜;薛丽娟;;山葡萄多酚对大鼠心肌线粒体氧化损伤的保护作用[J];吉林大学学报(医学版);2008年01期
3 孙雪莲;黄可儿;匡忠生;王淑英;;黄芪皂苷类不同有效组分对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用研究[J];中华中医药杂志;2011年05期
4 张雨平;赵聪敏;王丽雁;温恩懿;于若谷;;caspase-3特异性肽类抑制剂抗新生鼠缺氧缺血脑损伤量效研究[J];重庆医学;2006年19期
5 王强;;高压氧对中枢神经细胞损伤后的保护与重塑[J];重庆医学;2008年09期
6 谭湘明;侯爱琼;;黄芪对急性心肌梗塞溶栓后再灌注损伤中心肌顿抑功能恢复的促进作用的研究[J];湘南学院学报(医学版);2008年03期
7 刘莉莉;李庆章;;奶山羊乳房炎乳腺上皮细胞膜流动性的变化[J];东北农业大学学报;2009年05期
8 蒋春明;杜建民;刘占利;陈丽琼;冯梅;杨一华;王洁华;黄先玫;;r-HuEPO对癫癎持续状态大鼠血清NSE S-100β蛋白和MBP表达的影响[J];中国当代儿科杂志;2011年01期
9 张捷;邓涛;陈本发;兰军;;芪参益气滴丸治疗缺血性心肌病心力衰竭患者的临床观察[J];当代医学;2012年14期
10 周红梅;孔祥英;何念海;肖桃元;;高压氧对缺血缺氧性脑损伤幼鼠海马超微结构及主动回避反应的影响[J];第三军医大学学报;2006年19期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黄智芬;韦劲松;黎汉忠;曾爱屏;谭志强;;健脾扶正汤择时用药联合时辰化疗治疗晚期胃癌对生存质量的影响[A];2011年中华名中医论坛暨发挥中西医优势防治肿瘤高峰论坛论文集[C];2011年
2 陈强松;欧武;陈奕;黄伟章;裴润琼;李传叶;;健脾抑瘤汤对晚期原发性肝癌患者生活质量的影响[A];2011年中华名中医论坛暨发挥中西医优势防治肿瘤高峰论坛论文集[C];2011年
3 贾贞超;陈锦瑶;张立实;;黄芪甲苷的药理作用与毒理学评价研究进展[A];低碳生活与健康损害论坛——中国环境诱变剂学会风险评价专业委员会全国第十三届学术会议暨第四届第5次委员会会议论文集[C];2011年
4 陈美华;;充血性心力衰竭的抗细胞因子治疗及中医药作用机理研究进展[A];中华中医药学会第七届全国中医心病学术研讨会论文集[C];2004年
5 赵双;赵子彦;;分裂钟——端粒与人类衰老和癌症[A];2006全国时间生物医学学术会议论文集[C];2006年
6 张璐;吴彩凤;金基成;殷惠军;;益气活血方对急性心肌梗死大鼠心肌缺血损伤的影响[A];第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛论文汇编[C];2008年
7 李振坤;刘玫琦;杨洪军;;伞形科辛味中药主要化学成分对离体血管作用观察[A];第六次全国中西医结合中青年学术研讨会论文集[C];2008年
8 陈强松;欧武;黄伟章;裴润琼;陈升旭;孙传芳;李传叶;;健脾抑瘤汤对中晚期原发性肝癌患者生活质量及免疫功能的影响[A];2009年首届全国中西医肿瘤博士及中青年医师论坛论文集[C];2009年
9 臧文华;唐德才;;黄芪多糖抗肿瘤作用的基础研究进展[A];'2012第五届全国临床中药学学术研讨会论文集[C];2012年
10 黄小平;王蓓;邱咏园;曾嵘;唐映红;邓常清;;黄芪和三七的四种有效成分对小鼠脑缺血再灌注早期氧化应激和能量代谢影响的配伍研究[A];第九次全国中西医结合基础理论研究学术研讨会论文汇编[C];2013年
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1 方鑫;神经炎症在帕金森病发病机制中的作用[D];华中科技大学;2011年
2 王治平;探讨“黄芪—葛根”药对配伍规律对药效物质的影响[D];广州中医药大学;2011年
3 孙雪莲;黄芪苷对胃粘膜损伤的保护作用研究[D];广州中医药大学;2011年
4 胡立强;人参皂甙Rb_1对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究[D];中南大学;2010年
5 柳承希;镉中毒对血管衰老的影响及冠心康的延缓衰老作用[D];辽宁中医药大学;2011年
6 吕佳;中药苦芪缓释片研究[D];辽宁中医药大学;2011年
7 贺永贵;黄芪水提取液对横纹肌收缩力的影响及其机制研究[D];延边大学;2011年
8 叶侃;辐射对秀丽线虫的生长损伤及其防护研究[D];苏州大学;2011年
9 韩菲菲;猪乳铁蛋白肽的分子改良及改良肽的作用机制、生物学功能和重组表达研究[D];浙江大学;2011年
10 贾志丹;含硒桥联环糊精对卒中易感型自发性高血压大鼠(SHRSP)脑卒中的治疗及作用机制的研究[D];吉林大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨恒伟;黄芪对肉鸡生产性能、免疫性能和抗氧化性能影响的研究[D];山东农业大学;2010年
2 贾美玲;浆果类水果生物活性成分分析[D];辽宁师范大学;2010年
3 黄思仪;醒脑阴阳透刺法对急性脑梗死患者脑保护治疗的疗效探讨[D];贵阳中医学院;2010年
4 艾国军;消瘰止痛颗粒治疗肠系膜淋巴结炎的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
5 武亮亮;益气升陷汤治疗中气下陷型胃黏膜脱垂症的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
6 宁淑博;中西医结合治疗Hp相关性增生性胃息肉的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
7 李宁;健脾益肾泄浊法改善慢性肾功能衰竭(湿浊证型)患者消化道症状的临床观察[D];成都中医药大学;2010年
8 梁朝莹;急性脑梗死患者脑侧支循环建立情况及与近期预后的关系研究[D];广西医科大学;2011年
9 徐玲;梓葛冻干粉针对CoCl_2损伤PC12细胞的保护作用[D];西南大学;2011年
10 吴凤鸣;邓老赭决九味汤治疗高血压病的疗效观察[D];广州中医药大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜招峰,杨翰仪;氧自由基对CAT、SOD和GPX的氧化修饰研究[J];北京联合大学学报(自然科学版);2003年03期
2 姜文华,孟晓婷,郝利铭,崔丽,董智勇,王淑兰;红景天素抗老化和抗痴呆效应的实验研究[J];白求恩医科大学学报;2001年02期
3 雷春利,吕文伟,陈羽, 金辉;黄芪总皂甙对在体犬心功能的影响[J];白求恩医科大学学报;1994年04期
4 雷春利,王晓明,江岩, 孙成文;黄芪总皂甙对单个钙离子通道活动的影响[J];白求恩医科大学学报;1994年06期
5 柳海滨,赵洪序,张秀和,陈立波,姜亦忠,林柏松,张柏民;西洋参二醇组皂甙对心肌缺血与再灌注损伤保护效果的临床观察[J];白求恩医科大学学报;1999年01期
6 潘励山,李彦萍,程伯基;吗啡依赖大鼠脑细胞色素C氧化酶活性的改变[J];北京医科大学学报;1997年02期
7 王建,金文,沈映君;单味人参和定志小丸对小鼠血液中超氧化物歧化酶活力的影响[J];成都中医学院学报;1994年03期
8 丁继军,章同华,沈茜;黄芪皂甙对小鼠柯萨奇B_3病毒性心肌炎的治疗作用[J];第二军医大学学报;1999年09期
9 路志红,熊利泽,王强,郑玉,张西京;刺五加注射液对大鼠大脑中动脉栓塞所致脑缺血损伤的保护作用[J];第四军医大学学报;2002年08期
10 骆苏芳,张佩文,陈锐松;虎杖结晶4号对兔血管的舒张作用[J];第一军医大学学报;1992年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张金涛,吴卫平,王树新,刘洁晓,张风英;脑缺血再灌注后脑组织白介素-1β转化酶基因的表达[J];前卫医药杂志;2000年03期
2 韩雪梅,杨宏,王春辉;大鼠脑缺血再灌注后大脑皮质DNA裂解率变化及金纳多保护作用研究[J];现代康复;2000年10期
3 孔立红;毛庆菊;陈邦国;金镇国;;电针对脑缺血再灌注大鼠海马区胰岛素样生长因子-1表达的影响[J];中华物理医学与康复杂志;2006年10期
4 宋兵;王晓东;黄秀艳;曾耀英;;黄连素对脑缺血再灌注小鼠胸腺细胞的保护作用[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2011年06期
5 蒋崇慧,杨光田,汤彦;山莨菪碱在大鼠脑缺血再灌注时对神经元凋亡的影响[J];中国急救医学;2001年03期
6 施宁华,许浒,张志坚,王卉放,卢步峰,戴树宏;神经生长因子对大鼠脑缺血再灌注海马神经细胞损伤的影响[J];中国临床神经科学;2001年01期
7 孙国岚,唐咏春,金丽英,龚薇薇,郭云良;肌苷对大鼠脑缺血再灌注后勿动蛋白基因表达的影响[J];齐鲁医学杂志;2004年01期
8 薛任皓,曹德华,郑维发,孙靓,刘志礼;二十二碳六烯酸乙酯对脑缺血再灌注氧化损伤及脑水肿的影响[J];中国海洋药物;2004年05期
9 朱丽娜,卢晓梅,赵成海,王巍,赵红;灯盏花素对脑缺血再灌注小鼠脑组织抗氧化酶的影响[J];中国医科大学学报;2005年05期
10 邓云,徐秋萍,刘振权,马百平,熊呈琦,赵阳;知母皂苷化合物对脑缺血再灌注大鼠的保护作用[J];北京中医药大学学报;2005年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 沙莹;刘群;范佳;;粒细胞集落刺激因子对脑缺血再灌注损伤后凋亡与炎症的影响[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
2 陈荣华;刘楠;杜厚伟;郑安;黄华品;;白细胞介素10对大鼠脑缺血再灌注基质金属蛋白酶表达的影响[A];中国康复医学会第十一届全国脑血管病康复学术会议论文汇编[C];2008年
3 王树;张丹参;张力;张海红;薛贵平;;大黄素对脑缺血再灌注小鼠脑组织过氧化氢和过氧化氢酶的影响[A];第十五届中国神经精神药理学学术会议论文摘要[C];2012年
4 陈彩凤;虢周科;;复方丹参注射液雾化吸入对脑缺血再灌注大鼠影响的研究[A];中华中医药学会脑病分会成立大会暨2008年全国中医脑病学术研讨会论文汇编[C];2008年
5 陈威;王红;张思为;李佑生;蒋红玉;;天花粉对脑缺血再灌注大鼠高同型半胱氨酸血症的影响[A];中华中医药学会血栓病分会第四次学术研讨会暨广东省中医药学会血栓病专业委员会首届学术研讨会论文集[C];2010年
6 李建生;任小巧;刘轲;刘正国;孔令飞;;老龄大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡变化规律研究[A];第四次全国中西医结合养生学与康复医学学术研讨会论文集[C];2004年
7 王明航;李建生;刘轲;刘振国;刘敬霞;;老龄大鼠脑缺血再灌注微血管基底膜损伤变化规律及意义(摘要)[A];第八次全国中西医结合虚证与老年医学学术研讨会论文集[C];2005年
8 亚白柳;魏海峰;张丽;王文;李林;;5-羟甲基糠醛对脑缺血再灌注模型小鼠脑保护作用的研究[A];2009全国抗衰老与老年痴呆学术会议论文汇编[C];2009年
9 张红星;刘银妮;周利;黄国付;黄浩;;头针对脑缺血再灌注大鼠神经干细胞增殖能力影响的实验研究[A];第六次全国中西医结合养生学与康复医学学术研讨会论文集[C];2009年
10 叶丽莎;白雪;杨思进;;蛭龙活血通瘀胶囊对脑缺血再灌注大鼠炎性损伤的保护作用[A];国家中医药管理局脑病重点研究室建设研讨会暨中风病科研成果推广交流会论文汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 衣晓峰;哈医大揭示静麻对脑缺血再灌注损伤后的保护机理[N];中国医药报;2007年
2 ;抗呆I号对受损神经组织有保护和修复作用[N];中国中医药报;2005年
3 罗薇;中药治疗VD实验研究进展[N];中国医药报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 瞿涛;电针对脑缺血再灌注大鼠脑内血管新生影响的研究[D];湖北中医学院;2009年
2 沙莹;粒细胞集落刺激因子对脑缺血再灌注大鼠的治疗及其作用机制的研究[D];吉林大学;2010年
3 张莉;针刺对大鼠脑缺血再灌注后线粒体损伤相关因素影响的研究[D];北京中医药大学;2004年
4 宋锐锋;中药抗呆Ⅰ号对脑缺血再灌注星形胶质细胞因子的影响[D];北京中医药大学;2002年
5 赵红;高压氧对脑缺血再灌注小鼠血脑屏障通透性的影响[D];中国医科大学;2003年
6 郑一;大鼠脑缺血再灌注后迟发性神经元死亡的药物干预研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年
7 朱肖菊;电项针对脑缺血再灌注大鼠脑保护作用的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2008年
8 晁晓东;缺血再灌注脑损伤后蛇床子素的作用及机制研究[D];第四军医大学;2011年
9 杨宾侠;双苯氟嗪对大鼠脑缺血再灌注保护作用和机制研究[D];河北医科大学;2003年
10 孔立红;电针对脑缺血再灌注大鼠海马细胞因子介导凋亡信号转导机制的研究[D];湖北中医学院;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李丽珊;黄芪加红花对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响[D];暨南大学;2009年
2 王鹏;黄芪加红花对脑缺血再灌注大鼠神经细胞的保护机制[D];暨南大学;2010年
3 兰希发;大鼠脑缺血再灌注后脑水肿与水孔蛋白4表达关系的研究[D];中国医科大学;2004年
4 李大伟;白花丹参对大鼠脑缺血再灌注后神经再生的影响[D];泰山医学院;2012年
5 耿倩;康脑液对脑缺血再灌注大鼠内源性神经干细胞增殖、分化影响的研究[D];河北北方学院;2012年
6 刘旭;粘附分子在脑缺血再灌注不同时期的表达及与炎症反应关系的研究[D];天津医科大学;2008年
7 韩旭;复方当归注射液对脑缺血再灌注后炎症反应的保护作用及其机制的实验研究[D];四川大学;2005年
8 姜炎;易达拉奉对大鼠脑缺血再灌注后核因子κB及半胱天冬酶-3的影响[D];郑州大学;2006年
9 张富文;中药视明注射液对脑缺血再灌注大鼠脑神经细胞影响的实验研究[D];成都中医药大学;2002年
10 侯铁军;丁苯酞对脑缺血再灌注小鼠内源性神经干细胞增殖作用影响的研究[D];天津医科大学;2007年
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