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《第四军医大学》 2013年
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IL-8及其受体在人牙髓干细胞的表达及其调控的初步研究

张晓  
【摘要】:牙髓组织是高度分化的间充质组织,其特点为:成牙本质细胞的存在和周围有高度矿化的牙本质壁包围。牙髓组织中充满了由根尖孔进入的血管和神经。机械、化学、热刺激、微生物侵入等刺激能够引起牙髓的炎症反应,这些反应包括:血管、淋巴、和局部组织的反应,进而引起牙髓组织的变性、坏死。牙髓组织对于牙齿内环境的稳定有着决定性的作用,同时也是牙齿长期保留必不可少的因素。牙髓组织像其它结缔组织一样有着自我修复的能力,干细胞能够保证组织的修复和再生。牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)位于牙髓组织中,有很强的增殖、分化能力。在体外诱导时DPSCs能够分化为:成牙本质细胞、成骨细胞、神经细胞、脂肪细胞[1]。 很多文献报道在牙髓损伤区域有DPSCs的迁移[2,3],可见DPSCs对于牙髓的损伤修复是必不可少的。研究发现在相关趋化因子的作用下DPSCs可以迁移至损伤区域并分化为成牙本质细胞从而参与牙髓组织的损伤修复。由此可以推断,DPSCs的激活和迁移对于受损牙髓的修复是必不可少的。另外的一些相关研究发现受损的成牙本质细胞和血管组织能够募集DPSCs到受损区域[2,3]。 白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)是CXC趋化因子家族的成员,已经被证实是炎症反应中的一个重要的调节因子。它能够升高炎症部位中性粒白细胞[4],同时体外实验表明IL-8能够提高上皮细胞生成血管的能力[5]。因此IL-8被认为是一种血管源性的前炎症趋化因子,最近的研究发现IL-8有募集组织中干细胞向损伤部位转移的能力[6,7]。IL-8不仅存在于正常牙髓组织中,在炎症组织中也可以检测到高表达的IL-8,研究发现IL-8在健康牙髓组织及其渗出液中均可检出,但是表达量较低。而在炎症组织中IL-8有较高的表达。在慢性牙髓炎的牙髓组织中IL-8的含量约为正常的5倍,而在急性牙髓炎的牙髓组织中IL-8的含量约为正常组织的10倍[8]。 IL-8受体(Interleukin-8receptor,IL-8R)主要分布在中性粒细胞表面,目前的研究发现至少有两种类型的IL-8受体[9],Ⅰ型受体(CXCR-1)能够特异性的和IL-8结合,Ⅱ型受体(CXCR-2)除了能够跟IL-8结合外还能够和生长调节癌基因(growth-regulated oncogene,GRO)、巨噬细胞炎性蛋白-2(monocyte inflammatoryprotein-2,MIP-2)等结合。 目前的研究已经表明,DPSCs在促炎因子的作用下能够分泌IL-8,同时DPSCs细胞膜上能够检测到IL-8R,但并未明确牙髓细胞上的受体是CXCR-1还是CXCR-2。本实验将研究体外培养的人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)细胞膜表面是否有CXCR-1的表达,进一步通过不同浓度的IL-8刺激hDPSCs,观察其增殖和迁移能力的改变情况,进而研究IL-8/CXCR-1通路是否在牙髓组织损伤修复中募集hDPSCs到达损伤部位中发挥重要的作用。 实验结果:在正常hDPSCs细胞膜表面有CXCR-1的表达。200ng/mL、500ng/mLIL-8作用4h可以显著趋化hDPSCs的迁移(P<0.05)。10ng/mL、50ng/mL、100ng/mLIL-8作用48h可促进hDPSCs增殖(P<0.05)。 结论:hDPSCs细胞膜上有CXCR-1表达,IL-8能够促进hDPSCs的迁移和增殖;IL-8/CXCR-1通路可能在牙髓组织损伤修复中募集hDPSCs到达损伤部位中发挥重要的作用。
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R781.3

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