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《中国人民解放军军事医学科学院》 2004年
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治疗肺纤维化中药筛选及有效成分的研究与评价

杨珺  
【摘要】:肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)形成的病理因素十分复杂,近几年细胞生物学和分子生物学的发展为PF的形成机制提供了大量依据,证明PF是一个多因素、多器官、多细胞、多种因子之间以及细胞与间质成分之间形成的一个多层次,多步骤,多通路的疾病。随着其发病机理的进一步阐明,将有助于抗肺纤维化的药物研究,特别是药物筛选的研究。目前临床上用于治疗PF的药物如激素类及免疫抑制剂CoA等,毒副作用大,疗效差,随着中药抑制PF单体活性成分的提取分离技术与药理作用机制研究的进一步深入,针对PF发病多因素特点将不同单味中药中药理作用明确的活性单体进行科学配伍,从PF发病的不同时期特点进行治疗,研制出高效低毒的新型复方制剂应该是今后中药治疗PF的发展方向。 本课题研究的中心内容是扩大中药筛选范围,根据PF病理特点,确定了未在文献中报道过用于治疗肺纤维化研究的七种中药,利用肺成纤维细胞进行体外筛选;并进一步确定其抑制肺纤维化的中药有效部位,观察对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的干预效应,为开拓中医药治疗肺纤维化和新型抗纤维化药物打下实验基础。 1.本课题运用原代培养的大鼠肺成纤维细胞对赤芍、毛冬青、莲子心、瑞香狼毒、猫眼草、千金子、蒲公英粗提物进行筛选,通过MTT法的初步筛 ____________.「.I热川川川川川川~蔗 选,寻找到了莲子心、狼毒、千金子、这三种对大鼠肺成纤维细胞有 抑制作用的中草药,其中效果最佳、细胞毒作用最小的为莲子心提取 物。通过对中草药的初筛以及有效部位的筛选,寻找到了对肺成纤维 细胞抑制作用效果最佳的中草药有效部位一莲子心酚性总碱。 2.使用HPLC法对莲子心酚性总碱中的莲心碱进行质量控制, 对三种莲子心酚性总碱的提取方法进行了对比,通过三种溶剂法对莲 子心总碱进行提取的实验,结果表明,醇一酸水一有机溶剂提取法提取 效率最高,总碱提取率达11.25%,莲心碱提取率为1.20%,此方法操 作简便,溶媒易得。 3.建立博莱霉素致大鼠肺纤维化模型,体内研究莲子心酚性总 碱对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用。通过病理学观测及组织生 化指标的检测(SOD、MAD、GSH一PX、Hyp),说明莲子心酚性总碱对博 莱霉素致大鼠肺纤维化有一定治疗作用,可能的作用机制:降低肺纤维 时胶原含量;抑制肺成纤维细胞的增殖;抗自由基和抗脂质过氧化作用及提高了 机体内GSH一Px含量。 综上所述,我们认为莲子心酚性总碱可能对肺纤维化的病理过程有多 靶点作用:前期通过抗自由基作用,从而减轻肺泡炎损伤:后期直接 抑制肺成纤维细胞的增殖及蛋白沉积,减轻纤维化病变程度。可以作 为一种有希望的治疗肺纤维化的苗头药物。
【学位授予单位】:中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R285

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