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《中国人民解放军军事医学科学院》 2005年
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CD4~+CD25~+细胞与急性移植物抗宿主病关系及其扩增方法的研究

王志红  
【摘要】:目的:本文研究异基因干细胞移植后的病人外周血CD4~+CD25~+细胞与急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease aGVHD)的关系,并建立临床实用,操作简便的体外扩增CD4~+CD25~+细胞的方法,为临床输注供者来源的CD4~+CD25~+细胞抑制aGVHD提供临床及实验基础。 方法:临床检测异基因造血干细胞移植(allogeneic haematopoietic stem cell transplantation AHSCT)后+21、25、29、33、37、41、45天时患者外周血CD4~+CD25~+细胞的比例及细胞数量绝对值,统计发生与不发生aGVHD与CD4~+CD25~+细胞数量的关系。根据体外实验CD4~+CD25~+T细胞可以有效地抑制CD4~+T细胞和CD8~+T细胞的增殖性反应的结果,本实验体外用尼龙棉柱法分离的T细胞加入含Anti-CD_35ug/ml、IL-2 500IU/ml、10%FCS的RPMI-1640培养基培养扩增CD4~+CD25~+细胞,并在培养前、培养后7、14、21、28天检测CD3、4、8,CD4~+CD25~+,CD28~+、fasL的表达。 结果:1、发生aGVHD的病人CD4~+CD25~+比例比未发生组高,且有统计学差异。发生aGVHD组病人CD4~+CD25~+细胞数绝对值比未发生aGVHD组病人的细胞数高,有统计学差异。体外尼龙棉柱法分离的T细胞在上述培养体系中培养约16天时,CD4~+CD25~+细胞可以扩增约50倍(50.88±6.21倍),有统计学意义。T细胞活化指标fasL的表达在培养前后的变化无统计学差异,表明不会增加此细胞培养后对宿主细胞的杀伤。 结论:aGVHD的病人CD4~+CD25~+比例比未发生组高即14.16%-23.16%(16.66%±7.40%)比1.33-5.48%(3.65±2.27%),统计学分析P值0.001。发生aGVHD组病人CD4~+CD25~+细胞数绝对值54.83-170.68×10~6/L(105.54±44.63×10~6/L)比未发生aGVHD组病人的细胞数高13.84-53.51×10~6/L(28.86+14.81×10~6/L),统计学分析(P0.001)。在发生aGVHD组观察21至45天的CD4~+CD25~+细胞的比例逐渐下降。未发生aGVHD组CD4~+CD25~+细胞的变化趋势也是逐渐下降。
【学位授予单位】:中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R457.7

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