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《中国人民解放军军事医学科学院》 2005年
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抗呼吸道合胞病毒中药及有效部位的筛选

方学平  
【摘要】:呼吸道合胞病毒(RSV)是导致婴幼儿急性下呼吸道感染的最重要的病原体,同时也是致使某些免疫抑制人群和年老人群发病和死亡的重要的原因。目前,唯一允许用于化学疗法的药物是病毒唑,它被严格用于高危和病情严重的患儿。人类单克隆抗体palivizumab(Synagis)和静脉用免疫球蛋白(RSV-IGIV)已经注册使用,疗效较好,但是其治疗一个周期所需的费用很高,不能普遍应用于临床。迄今,还没有疫苗用于预防RSV感染。因此,迫切需要具有高效、廉价的防治RSV感染的药物。本研究的目的是筛选具有RSV抑制作用的中药,并从中选择抑制效果显著的中药分离有效部位,研究结果将为进一步分离提取有效成分,开发能高效、特异的防治RSV感染的药物奠定实验基础,并为临床处方的配伍提供线索。 在细胞病变抑制实验的基础上,对观察指标和结果评价的方法进行改进,建立一种快速、可靠的筛选抗呼吸道合胞病毒药物的方法。通过比较不同实验组接种病毒后出现的病变数目,探讨了最佳的细胞接种密度和结果判定时间。并比较改进实验和空斑减数实验测定病毒唑的EC_(50)的差异。结果表明改进实验和空斑减数实验测得的病毒唑的EC_(50)平均值没有显著性差(P0.05),说明改进实验准确、可靠。最佳的实验条件是:每孔接种Hep-2细胞(1.5~2.0)×10~4个为宜,24h~36h后接种病毒,4d~5d判读最后结果。 从中医典籍中筛选38味中药,采用新建立的改进的细胞病变抑制实验检测抗病毒活性,测定半数有效浓度(EC_(50)),并用MTT法检测药物对Hep-2细胞的毒性,测定半数中毒浓度(CC_(50)),计算选择指数(SI=CC_(50)/EC_(50))。初步筛选结果表明,23种中药对RSV有不同程度的抑制作用,半数有效浓度(EC_(50))范围从(12.2~719.1)μg/ml,选择指数范围从4~969,其中菊花水提取液的EC_(50)为12.24μg/ml,选择指数(SI)高达969,体外作用环节的研究结果也表明,菊花提取物对RSV的复制过程有明显的抑制作用,因此选择菊花进一步分离确立其有效部位。 用95%乙醇超声提取菊花粗粉,利用系统萃取法进一步分离,获得的不同部
【学位授予单位】:中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R285

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【引证文献】
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【参考文献】
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【共引文献】
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10 王世彪;何继红;杨军英;杨铖;;三仙脱力丹治疗慢性疲劳综合征的临床及实验研究[A];甘肃省中医药学会2008年学术年会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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7 陈丛瑾;香椿有效成分的提取纯化和生物活性研究[D];中南林业科技大学;2010年
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10 梁静涛;气虚血瘀证MCAO大鼠子代的同种证候及疾病趋势诱导形成实验研究[D];成都中医药大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 贺波;苎麻叶黄酮的提取、分离纯化、结构及抗氧化活性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 卢琪;杜仲绿原酸的分离纯化、结构鉴定及微胶囊化的研究[D];华中农业大学;2010年
3 张利芳;苦瓜多糖的纯化及其免疫和抗氧化活性作用[D];华中农业大学;2010年
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6 赵茜;蛇床子素配伍植物筛选[D];华中农业大学;2010年
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8 刘璇;云南萝芙木中育亨宾提取与分离的研究[D];中南林业科技大学;2009年
9 郭兴峰;荷花化学成分和抗氧化活性研究[D];山东农业大学;2010年
10 李慧;厚朴中有效成分活性检测及结构鉴定[D];辽宁师范大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【二级引证文献】
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【二级参考文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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9 才谦;中药独活有效部位抗风湿新药研究[D];辽宁中医学院;2001年
10 李志刚;不同磷效率基因型大豆的筛选及其对磷素水平的反应机理研究[D];沈阳农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 方学平;抗呼吸道合胞病毒中药及有效部位的筛选[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
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3 赵文华;连翘抗流感病毒有效物质基础研究黄连解毒汤有效部位的藏红花酸分析方法研究[D];北京中医药大学;2003年
4 付雪艳;鬼箭羽抗心肌缺血有效部位的化学成分研究[D];黑龙江中医药大学;2003年
5 刘美凤;复方胡黄连抗肝炎有效部位的化学研究[D];黑龙江中医药大学;2001年
6 唐玲;洋金花中治疗银屑病有效部位的化学成分研究[D];黑龙江中医药大学;2003年
7 刘恩荔;金银花有效部位提取分离工艺及其质量标准研究[D];山西医科大学;2004年
8 孙超;香鳞毛蕨治疗类风湿性关节炎有效部位的化学成分研究[D];黑龙江中医药大学;2007年
9 张晓丹;虎眼万年青抗炎镇痛作用的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2009年
10 马学敏;中药独活有效部位抗风湿新药研究[D];辽宁中医学院;2001年
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