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《中国人民解放军军事医学科学院》 2004年
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重组人干扰素-ω在体内外对肿瘤细胞影响的实验研究

吕天敬  
【摘要】:目的:研究重组人干扰素-ω对肿瘤细胞的影响,筛选对干扰素-ω敏感的肿瘤细胞株,估价干扰素-ω在体内、外对人肿瘤细胞生长及转移的抑制作用,并初步探讨其抗肿瘤作用的机制。比较干扰素-ω与干扰素-α抗肿瘤特性的异同点,确定是否可以作为干扰素-α的一种替代或优化产品。方法:体外培养各种人肿瘤细胞株(乳腺癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、黑色素瘤、白血病、胃癌、结肠癌),加入本室自行研制的基因工程人干扰素-ω或市售的干扰素-α,作用浓度从100-2000U/ml,选出可以发挥作用的最低浓度,MTT法检测干扰素对肿瘤细胞增殖的影响;明胶酶谱法检测细胞基质金属蛋白酶的分泌;利用Boyden小室检测肿瘤细胞的侵袭能力。选择体外研究中对干扰素-ω及α敏感的人肝癌细胞系HepG2细胞作为体内研究的对象,10~6皮下接种于BALB/C裸鼠,干扰素瘤旁1cm内10万单位隔天皮下注射作为实验组,PBS作为对照组,隔天测量瘤体的大小;4周后小鼠处死取生长的瘤块及近处淋巴结、肝、肺、脾等脏器甲醛固定,HE染色观察肿瘤细胞向附近淋巴结及其它脏器的转移情况,免疫组化法检测生长肿瘤组织细胞增殖核抗原PCNA的表达;TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡。结果:人干扰素-ω及α可以抑制某些肿瘤细胞株(如肝癌细胞系HepG2、前列腺癌细胞系PC3、肺癌细胞系LH7、BE1、白血病细胞系K562等)的增殖,抑制率从11.2%-29.9%;低剂量的干扰素-ω及α(500U/ml)即有抗肿瘤细胞增殖的作用。基质金属蛋白酶作为一种细胞外基质蛋白的分解酶而参与细胞的迁移和侵袭,与肿瘤细胞的转移十分相关。明胶酶谱法检测发现干扰素-ω及α对所检测的12种肿瘤细胞株细胞基质金属蛋白酶的分泌没有影响。Boyden小室检测干扰素-ω及α对人肝癌细胞系HepG2细胞侵袭能力有明显的抑制作用;干扰素-ω及α治疗组荷瘤小鼠肿瘤体积明显小于对照组;HE染色显示HepG2细胞可以向近侧腋窝淋巴结转移,两组未见差异,未发现有其它脏器的转移;干扰素-ω组裸鼠生长肿瘤PCNA表达明显低于对照组;肿瘤细胞的凋亡明显增加。结论:低剂量干扰素-ω及α可以直接抑制某些肿瘤细胞
【学位授予单位】:中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R73-36

【参考文献】
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