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《中国人民解放军军事医学科学院》 2003年
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骨髓间充质干细胞应用于骨组织缺损修复的研究

薄斌  
【摘要】:由于肿瘤、外伤和骨骼异常等原因引起的大段骨缺损往往需要骨的重建。组织工程化骨组织的研究为骨缺损修复开辟了新的途经。本研究应用组织工程方法对骨组织缺损修复再造进行了系列探讨。研究内容包括(骨髓间充质干细胞)MSCs的生物学特性与成骨诱导分化、MSCs复合β-TCP体外成骨潜能以及MSCs复合β-TCP用于骨组织缺损修复等几个方面。 1.人骨髓间充质干细胞体外培养的生物学特征 目的:了解体外培养的人骨髓MSCs一般细胞生物学特性。方法:抽取人骨髓标本5ml,采用比重为1.073g/ml的Percoll梯度离心制备单个有核细胞。按5.0×10~5/ml浓度接种于无菌的25cm~2塑料培养瓶中,培养体系为含10%FBS的低糖DMEM。利用多孔培养板采用MTT法分别对培养的MSCs进行细胞生长曲线测定。通过流式细胞仪技术测定MSCs的细胞周期,并选用抗CD29、CD44、CD45和HLA-DR单克隆抗体,对培养的MSCs进行表型鉴定。结果:培养的MSCs为纺锤状,呈克隆样生长。原代培养的MSCs克隆数目平均为43±11个。流式细胞仪检测结果显示,培养的各代细胞对CD44和CD29表面抗原有着较高水平的阳性表达率,而对于CD34和HLA-DR表面抗原的阳性表达率却很低。G_0/G_1、S和G_2/M期细胞的比例分别为88.17%、6.57%和5.27%。结论:培养的细胞不是骨髓造血干/祖细胞,而是一群均一的间充质干细胞,具有独特的增殖和表型特征。
【学位授予单位】:中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R329

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