收藏本站
《中国人民解放军军事医学科学院》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

共抑制分子BTLA在HIV慢性感染中的特点及与疾病进展的关系研究

徐向升  
【摘要】: T细胞过度活化是HIV-1(以下均简称HIV)慢性感染过程中的一个重要病理特征。近期发现T细胞过度活化与细胞表面共抑制分子如PD-1、CTLA-4和BTLA的表达有密切关系。这些共信号分子途径在T细胞分化的不同阶段、T细胞反应的不同阶段发挥着不同的调节功能,从而维持机体免疫反应处于稳态。近期在对HIV的感染研究中共抑制分子PD-1、CTLA-4和Tim-3受到高度关注。许多研究均发现在HIV、HBV及HCV等慢性病毒感染性疾病中CD4和/或CD8 T细胞功能耗竭与PD-1水平增高有关,体外阻断PD-1信号后可恢复T细胞的功能。近期研究发现CTLA-4也与HIV慢性感染中的CD4 T细胞功能耗竭有关,阻断CTLA-4信号通路后可部分恢复CD4 T细胞的功能。最近发现的共抑制分子BTLA已证实在T细胞免疫耐受中发挥重要作用,并且影响T细胞的活化和T细胞功能,与自身免疫性疾病的发生和疾病进程相关。但BTLA在慢性病毒感染性疾病,尤其是HIV慢性感染中的研究目前还未有报道。那么我们考虑BTLA是否和PD-1、CTLA-4一样参与了HIV慢性感染的发病过程?因此,我们对慢性HIV感染过程BTLA的表达特点、功能意义及与疾病进展的关系进行了研究,以进一步阐明HIV慢性感染的发病机制。 我们纳入了85例HIV慢性感染者,根据CD4细胞计数和HIV病毒载量分为三组:长期无进展者(LTNP)、典型进展者(TP)和AIDS患者,并纳入了26例健康人做为对照。通过BTLA在外周淋巴细胞上频率的流式细胞分析,我们发现BTLA主要表达在B细胞,其次在CD4 T细胞、CD8 T细胞、NKT细胞和单核细胞,而弱表达于NK细胞。通过比较HIV慢性感染者和健康者,发现在HIV慢性感染过程中CD4 T细胞和CD8 T细胞上的BTLA表达明显降低,并随着疾病进展呈进行性下降。为了进一步确证这种降低,我们用实时荧光定量PCR检测了BTLA在mRNA水平的表达,发现在慢性HIV感染者(包括TP和AIDS患者),BTLA mRNA的水平确实比健康对照低。由于PD-1主要调节的细胞是HIV特异性的CD8 T细胞,因此我们也研究了BTLA是否也主要作用于HIV特异性的CD8 T细胞,结果发现不仅HIV特异性的CD8 T细胞上BTLA表达降低,而且CMV-和Flu-特异性的CD8 T细胞上的BTLA也降低,说明BTLA的降低是非HIV特异性的。 我们对CD4 T细胞的BTLA表达水平与HIV疾病进展的相关性进行了研究,发现CD4 T细胞上BTLA的表达水平和平均荧光强度与CD4 T淋巴细胞计数呈正相关,而与HIV病毒载量呈负相关。另外,我们还分析了CD4 T细胞上BTLA表达水平与CD38、PD-1、CD127和Ki67等与疾病进程密切相关的免疫学标志的相关性,结果发现CD4 T细胞上BTLA的表达与CD38、PD-1和Ki67的表达呈负相关,而与CD127的表达呈正相关,这进一步显示HIV感染过程中BTLA的进行性下降与疾病进程密切相关。 根据CD27和CD45RO可将CD4 T细胞分为naive T细胞(Tnaive)、中央记忆性细胞(Tcm)和效应记忆性T细胞(Tem)等三个亚群,我们也检测了BTLA在这些CD4 T细胞亚群上的表达。发现LTNP患者Tnaive亚群和Tem亚群上BTLA仅有微弱下降,而Tcm亚群几乎无下降。在TP和AIDS患者,BTLA在Tnaive、Tcm和Tem三个亚群上的表达均明显降低,特别是在AIDS患者。另外,我们从mRNA水平也验证了BTLA在这些CD4细胞亚群上的降低。这些结果说明,持续的HIV感染导致了BTLA的持续下降,BTLA的持续下降又导致了na?ve CD4 T细胞比例降低和记忆性CD4 T细胞比例升高。 为了调查CD4 T细胞上BTLA的表达是否影响CD4 T细胞的活化状态,我们分析了健康个体中CD4+BTLA+和CD4+BTLA– T细胞的表型特征,发现BTLA+的CD4 T细胞总体表现出幼稚的表型,即Tniave细胞所占比例最高,而Tcm和Tem所占比例较低。BTLA–的CD4 T细胞总体表现出成熟的表型,主要表现在Tnaive细胞所占比例较低,Tcm和Tem占了大多数。在HIV感染者中虽然BTLA+和BTLA–的CD4 T细胞表现出和健康个体较相同的特征,但BTLA+的CD4 T细胞中Tnaive细胞比健康个体比例要低,尤其在AIDS患者,Tnaive细胞比例更低。这些结果提示持续的HIV感染可能改变了BTLA+ CD4 T细胞中初始T细胞和记忆T细胞的组成。进一步分析BTLA+和BTLA– CD4 T细胞上BTLA和细胞活化标志CD38、凋亡标志Fas(CD95)、细胞功能耗竭标志PD-1、功能效应分子穿孔素(perforin),以及细胞增殖标志Ki67的关系发现,HIV慢性感染者BTLA+ CD4 T细胞表达CD38、PD-1、CD95、perforin和Ki67均有明显升高,而表达CD127明显降低,尤其在TP和AIDS患者这种变化更为明显。但是在BTLA– CD4 T细胞上,除了CD38在HIV慢性感染者中表达升高外,其他上述免疫学标志几乎无变化,说明在慢性HIV感染过程中BTLA+ CD4 T细胞分化、成熟等方面比BTLA– CD4 T细胞受到的影响更为明显。 我们在研究中发现在体外加入HIV-1 NL4-3病毒颗粒能够使CD4 T细胞上的BTLA表达降低,而且这种降低与加入的病毒量有量效关系,加入逆转录酶抑制剂齐多夫定后不能逆转BTLA的降低,说明HIV诱导的BTLA表达下降并不是通过HIV基因去影响BTLA的表达,这种调节很可能发生在HIV进入或吸附细胞表面阶段,或HIV分泌的某种蛋白调节了BTLA的下降。 体外功能实验显示,用刺激性抗体交联BTLA后,与健康对照相比TP/AIDS患者BTLA对CD4 T细胞活化和分泌细胞因子的抑制功能均受到损伤,这种抑制功能的降低可能是TP/AIDS患者上BTLA表达下降引起的。因此BTLA对CD4 T细胞抑制功能的降低可能是AIDS患者体内免疫系统过度活化的原因之一。以往对人和小鼠的研究表明BTLA对TCR诱导的T细胞增殖有抑制作用,但我们的研究显示,用刺激性抗体交联BTLA后,BTLA对T细胞的增殖表现出较大的异质性,在不同个体可能表现出不同的作用,或者抑制或者促进增殖。在今后的实验中,将进一步明确BTLA对T细胞增殖的影响。 一些研究已经报道了PD-1+ T细胞更容易自发凋亡,我们考虑BTLA介导的信号途径是否对CD4 T细胞的凋亡也有作用。通过对HIV慢性感染者的研究发现,凋亡的CD4 T细胞(即annexin V+ CD4 T细胞)主要是BTLA–细胞,而BTLA+细胞很少有凋亡,且BTLA的表达水平与CD4 T细胞的自发性凋亡呈明显负相关,这些结果显示在HIV感染者中BTLA–CD4 T细胞比BTLA+CD4 T细胞更易发生凋亡。 总之,我们的研究结果显示随着HIV慢性感染疾病进展,CD4 T细胞上BTLA表达逐渐下降,而且BTLA介导的对CD4 T细胞的抑制功能受到损伤,BTLA的功能损伤可能导致了机体的免疫过度活化,免疫活化则有利于HIV的复制,最终促进了疾病的进展。这些结果对于阐明BTLA在HIV慢性感染中的致病机制具有重要意义,也为今后人类治疗HIV感染提供了新的靶点。
【学位授予单位】:中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R512.91

手机知网App
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 尚永军;王志强;郎卫红;;BTLA与类风湿性关节炎的研究进展[J];赤峰学院学报(自然科学版);2009年05期
2 郑淑华;徐军发;;BTLA与免疫性疾病关系的研究进展[J];广东医学院学报;2009年06期
3 徐军发;赵坤;;B/T细胞弱化分子—CD28超家族一个新的共抑制分子的研究进展[J];国际免疫学杂志;2007年06期
4 徐宁安;肖波;王玉忠;张惠芳;周文斌;;BTLA mRNA在实验变态反应性神经炎中的动态表达[J];现代免疫学;2010年06期
5 尚永军;崔其福;李金龙;郭国宁;朱文宴;;B和T淋巴细胞衰减因子(BTLA)在类风湿关节炎滑膜组织的表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2012年06期
6 徐宁安;周文斌;;B和T淋巴细胞弱化因子的研究进展[J];中国神经免疫学和神经病学杂志;2012年01期
7 李大林;傅振坤;章婕;庞达;;淋巴细胞弱化因子基因多态性与乳腺癌发病风险研究[J];中国肿瘤临床;2009年14期
8 王万党;曾今诚;徐军发;;B、T淋巴细胞弱化因子在人类免疫性疾病中的作用及机制研究进展[J];中华临床医师杂志(电子版);2013年24期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 韩凌斐;可溶性BTLA协同HSP70疫苗增强肿瘤免疫效应及其分子机制的研究[D];华中科技大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 杨敏;三水白虎汤的临床观察及药理药效学研究[D];第一军医大学;2007年
2 徐宁安;BTLA及Cbl-b mRNA在实验变态反应性神经炎中的动态表达[D];中南大学;2009年
3 齐亚军;基于NF-κB-iNOS-NO信号通路探讨中药新风胶囊改善AS患者心肺功能的机制[D];安徽中医药大学;2014年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡威;评价多发性硬化疾病进程的简单方法:疾病步骤法[J];国外医学.神经病学神经外科学分册;1996年05期
2 张苗苗;符林春;何金洋;;艾滋病疾病进程的影响因素研究综述[J];中国艾滋病性病;2009年03期
3 沈书旭;吴玉海;关琪;刘英;;CD4~+CD25~+调节性T细胞对HCV感染者疾病进程影响的研究[J];沈阳医学院学报;2010年02期
4 陈洁;血小板计数与晚期上皮性卵巢癌患者疾病进程和二次开腹探查结果的关系[J];国外医学.妇产科学分册;2005年02期
5 智春,徐述湘;妊娠与HIV病程进展[J];预防医学情报杂志;1999年03期
6 黄宝浩,蔡卫平,唐小平,陈谐捷;不同感染途径对艾滋病病人疾病进程的影响[J];中国艾滋病性病;2002年05期
7 ;干扰素治疗晚期多发性硬化症[J];药学进展;1999年05期
8 王正珍,田野;运动负荷试验和健身锻炼前的危险评价及防范措施——美国运动医学学会关于健身活动中的健康监测及危险分层的应用[J];中国运动医学杂志;2005年03期
9 唐福林;系统性红斑狼疮的治疗[J];北京医学;1991年03期
10 张波;浅谈处方时应注意的问题[J];中国乡村医药;2000年12期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 顾华泰;;中药联合疗法“珍田系列药”治疗HIV/AIDS的临床研究[A];第一届全国中西医结合防治艾滋病学术研讨会论文汇编[C];2003年
2 杨永公;孙雪梅;范洵楠;许景艳;周敏;邵晓雁;陈兵;欧阳建;;连续静脉血液过滤(CVVH)用于噬血细胞综合症患者的抢救[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
3 陈道纯;;中医药治病的作用环节[A];全国中药研究学术讨论会论文集[C];2003年
4 吴丽娟;卜石;杨志豪;;重症急性呼吸综合征死亡病例的外周血细胞、氧合指数、危重度评分的变化及对预后的影响[A];2003全国SARS防治学术交流会论文集[C];2003年
5 蒋为;马丽英;潘品良;赵全壁;吴昊;徐道振;邵一鸣;;中国哈萨克族人群HIV-1辅助受体CX3CR1等位基因的多态性分析[A];中华医学会第七次全国感染病学术会议论文汇编[C];2001年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李士懋 田淑霄;掌握脉理 动态辨脉[N];中国中医药报;2004年
2 记者 冯亦珍;对防治艾滋病意义重大[N];新华每日电讯;2003年
3 陆志城;抗氧化剂+锌离子有效延缓AMD进程[N];医药经济报;2001年
4 卢作勇;生物药VS帕金森[N];医药经济报;2002年
5 何志高;药物经济学与药学服务[N];健康报;2005年
6 ;家庭安全用药ABC[N];中国高新技术产业导报;2002年
7 徐铮奎;银杏制剂可防治老年痴呆[N];大众卫生报;2005年
8 何明伟;揪出制造头痛的元凶[N];健康报;2005年
9 新;线粒体损伤影响亨廷顿氏症[N];医药经济报;2002年
10 吴一福;二十一世纪医院药学发展的必然趋势[N];中国中医药报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 孙峥嵘;HIV-1生物学特性及宿主遗传背景与疾病进展关系的研究[D];中国医科大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 曾耀明;久泄中医脾胃湿热证与免疫组织化学关系的研究[D];福建中医学院;2001年
2 王玲姝;针药结合治疗急性特发性面神经麻痹的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026