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《中国人民解放军医学院》 2017年
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京尼平交联明胶凝胶的制备及其作为纳米抗菌药物载体的效用评价

邵杰  
【摘要】:目的:以明胶为原料,京尼平作为交联剂,混合包封磺胺嘧啶银纳米晶体制作载药敷料,并对其相关理化性质及体内外抗菌促愈合性能进行考察。方法:利用不同用量京尼平制作不同交联度明胶凝胶,加入L929细胞混悬液培养观察细胞铺展状况;MTT法考察各组凝胶浸提液生物相容性;考察24h内不同交联度凝胶在不同PH值PBS溶液中的吸水溶胀性;扫描电镜观察其微观结构。建立磺胺嘧啶银UPLC分析方法学;球磨法制作磺胺嘧啶银纳米晶体并利用透射电镜观察其微观形态;与原料粗粉对比考察其6h内的溶解度变化。制作不同交联度载磺胺嘧啶银纳米晶体明胶凝胶,对比载原料粗粉凝胶考察其溶出性,并探讨其溶出机制;扫描电镜观察其微观结构;考察6周内包封药物的稳定性。对比粗粉混悬液及市售乳膏考察磺胺嘧啶银纳米晶体混悬液抑菌圈直径、L929细胞相容性、常见感染菌种的MIC与MBC值;建立小鼠深Ⅱ度烫伤合并金黄色葡萄球菌感染模型,对比载粗粉凝胶及市售乳膏考察小鼠三周愈合指数;天狼星红染色考察小鼠创面胶原沉积;HE染色法观察创面切片病理学表现并评分。结果:L929细胞随凝胶交联度增大趋向于铺展良好;凝胶吸水溶胀性与其交联度大小、PBS溶液PH值均呈现负相关且全组凝胶普遍具有良好生物相容性。HPLC法可准确高效测定磺胺嘧啶银溶液含量;球磨法制作磺胺嘧啶银纳米晶体平均粒径267.8nm,微观结构呈现片晶状;相比原料粗粉的6h内19%的溶解度,纳米晶体可在1Omin时达到80%以上;稳定性试验显示6周之后纳米晶体的6h内溶解度由92%降低为56%。抑菌圈及MIC、MBC实验中磺胺嘧啶银纳米晶体混悬液组对比粗粉混悬液组抗菌性能明显提高;细胞毒性实验中纳米晶体混悬液比粗粉混悬液有更大的细胞毒性,但包封于凝胶后细胞毒性显著减小(P0.05),且显著低于市售乳膏组(P0.05)。小鼠愈合实验中纳米晶体凝胶组愈合指数自第二周开始相比涂菌组、粗粉凝胶组和市售乳膏组显著提高(P0.05),且相比其他对照组有更高的Ⅰ型胶原、总胶原含量及创面组织病理学评分。结论:载磺胺嘧啶银纳米晶体明胶凝胶有着优良的吸水性、溶出性与稳定性,生物相容性良好,在体外抗菌与体外愈合方面都展现了相比对照组的显著优势,是一款很有潜力的敷料,值得深入研究。
【学位授予单位】:中国人民解放军医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R943

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