收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

CCL_7与TGF-β1致心肌纤维化的交互机制研究

程庆强  
【摘要】:研究背景:随着人口老龄化的到来以及不良生活方式的流行,心血管疾病的发生率逐年增高,而慢性心力衰竭是多种心血管疾病共同终末期表现。其中心肌纤维化(Myocardial fibrosis,MF)是发展致慢性心力衰竭的重要病理基础。心肌纤维化病理机制是在高血压、心肌梗死等病理因素刺激下,心肌成纤维细胞(CardiacFibroblasts,CFs)大量激活并转化成肌成纤维细胞,分泌过量细胞外基质(extracellular matrix,ECM),导致胶原蛋白比例失调。TGF-β1是调控心肌纤维化的重要生长因子,通过细胞内蛋白Smad2/3、ERK1/2转导信号。在小鼠表皮纤维化的研究中,TGF-β1和CCL_7都有促纤维化作用并存在交互作用(cross-talking)。最新研究发现,在醛固酮致心肌纤维化过程中CCL,表达量增加。但CCL_7是否促心肌纤维化发展,及其与TGF-β1是否具有交互作用尚不清楚。研究目的:本研究旨在细胞水平上,探究CCL_7致心肌纤维化的信号通路,以及探究与TGF-β1交互机制。研究方法:取10只出生1-3天SD乳鼠,酶消化法和差速贴壁法获取心脏成纤维细胞(CFs)。免疫荧光鉴定CFs。Western Blot检测TGF-β 1和CCL_7最佳干预浓度。Elisa法筛选下调CCL_7或 TGF-β 1效率高的病毒。将CFs随机分成对照组(NC组);外源性TGF-β 1干预组(T组);空病毒转染对照+外源TGF-β 1干预组(T+V组);CCL_7 SiRNA+外源TGF-β 1干预组(T+C SiV组);外源CCL_7干预组(C组);空病毒转染对照+外源CCL_7干预组(C+V组);TGF-β1 SiRNA+外源CCL_7干预组(C+TSiV组)。根据分组给予相应病毒转染,后给予药物干预。RT-PCR检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量。WesternBlot检测细胞内信号蛋白Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达水平。CCK8检测各组细胞增殖水平。研究结果:免疫荧光鉴定显示CFs纯度高(Vimentin抗原和FSP-1抗原表达阳性率95%以上,TroponinT抗原表达阳性率3%以下)。WesternBlot检测显示TGF-β 1干预浓度4ng/ml最佳,CCL_7干预浓度200ng/ml时最佳。Elisa法检测显示TGF-β1-SiRNA3、CCL_7-SiRNA1下调效率最高。与对照组相比,TGF-β1干预组,Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量、蛋白表达水平均增高(P0.05),细胞增殖水平也增高(P0.05)。但与TGF-β1干预组相比,CCL_7 SiRNA+外源TGF-β1干预组中,Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量、蛋白表达水平均降低(P0.05),细胞增殖水平也降低(P0.05)。与对照组相比,CCL_7干预组Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量、蛋白表达水平均增高(P0.05),细胞增殖水平也增高(P0.05)。但与CCL_7干预组相比,TGF-β1SiRNA+外源CCL_7干预组中,Smad2/3、ERK1/2磷酸化水平,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量、蛋白表达水平无明显变化(P0.05),细胞增殖水平也无明显变化(P0.05)。研究结论:1.CCL_7在 TGF-β 1致心肌纤维化信号通路中起关键作用,下调CCL_7能够改善TGF-β 1致心肌纤维化。2.CCL_7能够独立致心肌纤维化,且通过细胞内信号蛋白Smad2/3、ERK1/2 起作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前16条
1 王世强;常芸;李丹;黄晓丽;何艳群;饶志坚;;运动性心肌纤维化的发生特征、可能机制和消退逆转[J];体育科学;2018年11期
2 吴限;黎明江;李莎;;心肌纤维化病理染色鉴定方法的综合评价[J];医学研究杂志;2017年09期
3 潘丽萍;心肌纤维化的机制及干预治疗[J];临床医学;2005年10期
4 王世强;李丹;刘奥峰;;运动改善疾病所致心肌纤维化研究进展[J];中国运动医学杂志;2019年03期
5 束长城;魏万林;;中医药逆转心肌纤维化的研究进展[J];中国循证心血管医学杂志;2011年01期
6 于茜;钟久昌;朱鼎良;;肾素-血管紧张素系统与心肌纤维化及重塑[J];心血管康复医学杂志;2009年06期
7 张海啸;史载祥;;转化生长因子-β信号传导通路与心肌纤维化[J];中日友好医院学报;2007年02期
8 Naβenstein K;Breuckmann F;Huger M;杨岷;;对比增强MRI诊断系统性硬化患者心肌纤维化[J];放射学实践;2009年05期
9 赵树梅;沈潞华;;过氧化物酶体增殖物激活受体通路与心肌纤维化[J];临床心血管病杂志;2007年09期
10 曾紫凡;王伟;;中医药治疗心肌纤维化的研究进展[J];中国中医急症;2018年03期
11 刘宇帆;梁金锐;张鹤萍;;锚蛋白-B与心肌纤维化的相关性研究进展[J];中国循证心血管医学杂志;2016年10期
12 殷子杰;窦丽萍;崔小强;;中医药抗心肌纤维化研究趋势的分析与探讨[J];心脑血管病防治;2009年02期
13 李刚,吴月平;高血压病左室肥厚患者心肌纤维化血清指标的初步观察[J];现代中西医结合杂志;2001年06期
14 韦红;阎国良;李越华;;从痰瘀论治心肌纤维化的机理初探[J];陕西中医药大学学报;2019年01期
15 徐为民;孙志;陈欢;时景伟;;两种心肌纤维化动物模型基本情况比较[J];中国实验诊断学;2018年04期
16 顾静;李海龙;刘凯;金戈;李应东;彭晓青;;放射性心肌纤维化及其发生机制[J];中国老年学杂志;2013年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 饶志坚;常芸;;炎症在运动性心肌纤维化中的作用[A];第四届(2016)全国运动生理与生物化学学术会议——运动·体质·健康论文摘要汇编[C];2016年
2 黄力;李琳;;中药降压脉净对心肌组织转化生长因子-β1的影响及干预心肌纤维化的作用[A];第十次中国中西医结合微循环学术会议论文集[C];2010年
3 刘付生;刘少宝;徐峰;卢天健;;心肌纤维化组织中细胞间力-电耦合特性研究[A];第十一届全国生物力学学术会议暨第十三届全国生物流变学学术会议会议论文摘要汇编[C];2015年
4 李楠;庞炜;李丽娟;朱毅;;可溶性表氧化物水解酶在心肌纤维化中的作用[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
5 谢烨卿;陈瑞珍;陈灏珠;;病毒诱导的内皮间质纤维化在心肌炎心肌纤维化中的作用及机制[A];中华医学会第十五次全国心血管病学大会论文汇编[C];2013年
6 刘诗英;王梦洪;;结缔组织生长因子与心肌纤维化[A];江西省第四次中西医结合心血管学术交流会论文集[C];2008年
7 李萌;吕仕超;吴美芳;张军平;;不同原因诱导的心肌纤维化动物模型的建立[A];中华医学会第十五次全国心血管病学大会论文汇编[C];2013年
8 谢烨卿;陈瑞珍;李明辉;汪云开;虞勇;郭棋;杨英珍;;Catestatins抑制心肌纤维化机制的探讨[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
9 程志清;忻尚平;;通心络对病毒性心肌炎慢性期心肌纤维化作用的实验研究[A];第六次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会论文汇编[C];2005年
10 刘诗英;王梦洪;左汉恒;付勇南;彭敏峰;;葛根素对慢性心肌纤维化大鼠心脏功能和结缔组织生长因子的影响[A];江西省第四次中西医结合心血管学术交流会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 石桂良;阿哌沙班保护小鼠缺血诱导性心肌纤维化的机制研究[D];苏州大学;2018年
2 张丽晖;胰高血糖素样肽-1抑制血管紧张素Ⅱ所致高血压大鼠心肌纤维化和炎症反应的机制研究[D];山西医科大学;2015年
3 邱智东;参草菌质对大鼠心肌纤维化的抑制作用及机制研究[D];长春中医药大学;2016年
4 张召才;病毒性心脏病心肌纤维化的发生机制及其药物干预研究[D];复旦大学;2004年
5 张海啸;大蒜素对左室重构和心肌纤维化的影响及机理研究[D];北京中医药大学;2007年
6 申锷;CVB_3致小鼠病毒性心脏病心肌纤维化的发生机制及其药物治疗研究[D];复旦大学;2007年
7 孙红霞;依那普利抗心肌纤维化作用及分子机制研究[D];吉林大学;2008年
8 王娟;c-SKI调控心肌纤维化的作用及机制研究[D];新疆医科大学;2017年
9 白枫;阻断1型血管紧张素Ⅱ受体通过改变ACE2/eNOS活性及CD44-透明质酸相互作用参与调定血压和心肌纤维化[D];山西医科大学;2016年
10 李湘海;复心抑纤汤对急性心肌梗死后左心室重构心肌纤维化疗效及其作用机理的研究[D];湖南中医药大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 钟德琳;T1-mapping和细胞外容积(ECV)定量铁过载所致心肌纤维化巴马猪模型的研究[D];广西医科大学;2019年
2 李梦佳;靶向干扰Kv1.3通道基因介导的Treg细胞活化与逆转心肌纤维化机制研究[D];新疆医科大学;2019年
3 程庆强;CCL_7与TGF-β1致心肌纤维化的交互机制研究[D];中国人民解放军医学院;2018年
4 付舒;淫羊藿次苷Ⅱ对自发性高血压大鼠心肌纤维化的作用及机制研究[D];遵义医学院;2018年
5 张建英;1.5T CMRI对扩张型心肌病左心室结构、功能及心肌纤维化的研究[D];遵义医学院;2018年
6 刘茂军;硫化氢通过调控Keap1-Nrf2改善阿霉素诱导的心肌纤维化[D];南华大学;2018年
7 魏峥;血清半乳凝集素-3与心房颤动患者心肌纤维化的相关性研究[D];中国医科大学;2018年
8 张灼;微小RNA miR-199a-5p和miR-199a-3p在心肌纤维化中的表达和作用机制研究[D];华南理工大学;2018年
9 李子宁;硫化氢通过抑制自噬改善腹主动脉缩窄大鼠心肌纤维化及其机制初步研究[D];南华大学;2018年
10 任学娇;扶正化瘀胶囊对心梗后心肌纤维化大鼠TGFβ1/Smads通路的影响[D];北京中医药大学;2018年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 记者 聂松义 通讯员 张勇;缺血性心肌纤维化研究有进展[N];健康报;2012年
2 徐亚静;川芎嗪抗心肌纤维化机理研究取得进展[N];中国医药报;2012年
3 记者 严少卫;补肾活血复方能抗心肌纤维化[N];健康报;2010年
4 福建省人民医院 福建医科大学附属第一医院高血压研究所 姚沽 谢筱露 谢良地 王华军 许昌声;脑心通对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响[N];医药经济报;2010年
5 冼绍祥 胡世云 刘小虹;天麻钩藤饮干预高血压病患者心肌纤维化的临床研究[N];中国中医药报;2004年
6 ;复方鳖甲软肝方可有效抑制高血压大鼠心肌纤维化[N];中国中医药报;2005年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978