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酶抑制法快速检测有机磷农药残留的方法研究

何颖  
【摘要】:有机磷农药目前广泛应用于农业、工业、医药等领域,并引起环境、食品污染等问题。绝大多数有机磷农药具有很强的毒性,经过皮肤、呼吸以及肠胃吸收等途径进入机体会引起严重的疾病。要预防和处理有机磷农药引起的环境、食品污染等问题,最有效的策略就是及时、准确检测有机磷。近年来,有许多关于有机磷农药残留的检测方法的文献报道。 本文利用酶抑制原理,采用生物传感器和分光光度法快速检测有机磷农药残留。主要包括以下四个方面的内容: 1.综述了有机磷农药残留的检测方法。其中主要的方法包括:光谱法、色谱法、酶抑制法、免疫法和生物芯片技术。光谱法和色谱法是监测检验部门分析有机磷农药的主要方法,而酶抑制法则更适合于基层单位的快速检测,免疫法和生物芯片技术代表未来的发展方向。 2.将乙酰胆碱酯酶交联于醋酸纤维膜上,制备成生物传感器。通过固定酶量、底物浓度、酸度等方面优化了该传感器的制备条件和工作条件,发现对硫磷农药在3.43×10-10~3.43×10-5 mol/L 的浓度范围内,抑制率与其浓度对数值呈线性关系,检测限为2.45×10-10 mol/L。当用于实际样品中对硫磷农药的测定时,取得了较为满意的效果。 3.采用一种简便有效的方法,从鸡脑中提取乙酰胆碱酯酶,通过国家标准方法对酶的活性进行检测,效果满意。利用酶抑制原理,采用分光光度法测定有机磷农药含量。对酸度、酶的用量、显色剂用量以及时间、温度等条件进行了优化,发现对硫磷、辛硫磷和氧化乐果在1.0×10-3~10 mg/L 的浓度范围内,抑制百分率与其浓度的对数值呈线性关系。检测限分别为5.7×10-5mg/L、3.3×10-4mg/L 、2.0×10-5mg/L。实验结果表明该方法用于实际样品测定时,效果满意。 4.分别从京2 号和9428 号小麦中提取小麦酯酶,利用酶抑制原理,采用分光光度法测定有机磷农药含量。对吸收曲线、酸度、酶的用量、显色剂用量以及时间、温度等条件进行了优化,发现使用京2 号小麦酯酶,对硫磷在1.0×10-6~10mg/L 的浓度范围内,抑制率与其浓度对数值呈线性关系。使用9428 号小麦


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