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微生物转化虎杖苷粗提物制备白藜芦醇的工艺研究

杨晓英  
【摘要】:白藜芦醇是一种二苯乙烯类化合物,普遍存在于葡萄科、百合科、豆科等70多种植物中。它不仅是植物遭受胁迫时产生的植物抗毒素,还具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、调节血脂、免疫调节、抗衰老等多方面有益人类健康的功效。 本文研究了虎杖中虎杖苷的提取工艺。在单因素实验(乙醇体积分数、温度、料液比、时间)的基础上,采用响应面分析法(RSA)优化了从虎杖中虎杖苷的提取工艺。响应面法得到虎杖苷的最优提取工艺条件为:乙醇浓度78%,提取温度51℃,料液比10.7 mL:g,提取2 h。虎杖苷提取率为18.29 mg/g,与文献报道的理论值20 mg/g接近。 本文将实验室保藏的4株菌株通过培养基筛选,并利用TLC检测鉴定转化产物,成功筛选出一株能将虎杖苷转化为白藜芦醇的黑曲霉,并将筛选出来的黑曲霉编号为AN-2436。 本文详细研究了微生物转化虎杖苷制备白藜芦醇的过程。根据单因素的实验,正交实验,建立了一个带有约束条件的非线性模型,并采用遗传算法进行函数优化,确定了最佳发酵条件为摇床转速147 rpm,发酵温度30.3℃,接种量20%(v/v),培养时间36 h,计算得到转化率达96.4%。通过与其它实验相比较,证明遗传算法的优势。 本文进一步研究了发酵液中白藜芦醇的分离纯化,将发酵液经硅胶柱层析分离纯化后得到白藜芦醇纯品,纯度达到99.23%,白藜芦醇的总得率为1.97%。发酵分离产物经高效液相、红外光谱、电喷雾质谱和核磁共振检测,确定其为白藜芦醇。


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