提高阿胶多肽抗氧化性能的研究

【摘要】：阿胶的疗效功能被广泛认可,并被誉为中国的非物质文化遗产。考虑到很多产物的疗效功能与其抗氧化性密切相关,因此本论文从提高阿胶多肽抗氧化性入手,力图通过系统的研究工作,开发提高阿胶肽抗氧化性能的新方法,为其应用提供领域的拓宽奠定基础。主要研究内容包括三个方面:1、通过对比研究,考察了不同蛋白酶对阿胶水解反应的影响,揭示了水解产物对DPPH、ABTS及OH自由基的清除能力的影响规律,筛选并开发了碱性蛋白酶催化阿胶水解提高阿胶多肽抗氧化的方法,通过单因素实验及Box-Behnken实验设计得到最佳制备条件为:酶解温度为40℃,体系pH为8.2,加酶量为5199 U/g。2、探究了超滤技术分离除去阿胶多肽(SACCH)中分子量大于3 kDa的组分SACCH-Ⅰ对产物抗氧化性的影响。结果表明,与分离前产物对比,SACCH-Ⅱ(分子量3 kDa)组分抗氧化性能得到明显的提高。通过氨基酸组成分析及圆二色谱测试发现,SACCH-Ⅱ中疏水性氨基酸含量及氨基酸二级结构,与其较高的抗氧化活性密切有关。3、设计制备了银杏叶提取物与阿胶多肽的复合物,有效地提高了阿胶多肽的抗氧化性能。研究了银杏叶提取物与阿胶多肽质量比对其抗氧化性的影响,并揭示了其影响规律,发现了两者之间存在协同抗氧化作用。细胞毒性测定发现,所制备的高抗氧化性银杏叶提取物与阿胶多肽的复合物对乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231存在协同抗癌作用,作用72 h时,对癌细胞的IC50值分别为4.32±0.12 mg/mL,0.39±0.01 mg/mL。但对正常小鼠纤维细胞L929细胞没有抑制毒性。这为阿胶多肽的应用开发了新方法。