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松口蘑T_2菌株培养条件优化及中草药对其生长的影响

周云  
【摘要】:松口蘑是一种与松属植物共生的外生菌根食用菌,迄今不能进行人工栽培,其菌丝在实验室条件下生长缓慢。为了提高菌丝的生长速度,本论文对松口蘑T_2菌株的营养生长条件和中草药对其生长的影响进行了研究。 T_2菌株的最佳培养基为添加0.5%酵母浸膏的PDA;固体平板和液体静置的培养方法优于液体振荡培养;最适初始pH值为5.5;最适培养温度为22℃;培养观察周期为30d。 T_2菌株利用碳氮源试验的结果表明:25种碳源中,淀粉、玉米粉和葡萄糖的利用效果较好,其中玉米粉的效果最好;26种氮源中,酵母浸膏和牛肉浸膏的利用效果较好。选取不同水平的玉米粉、葡萄糖和酵母浸膏分别作为碳源和氮源,采用三因素二次回归正交旋转设计试验建立了回归模型,确定最佳培养基成分配比为:玉米粉2.00%、葡萄糖2.00%、酵母浸膏0.55%。 研究了80种中草药浸提液对T_2菌株生长的影响,试验结果表明:其中50种中草约对T_2菌株生长抑制率高于10%;26种中草药对菌丝生长影响较小;4种中草药(天葵子、白豆蔻、鱼腥草和雷公藤)对菌丝生长有显著促进作用(α=0.05),增长率均高于10%,且前两种能极显著促进菌丝生长(α=0.01)。这4种中草药的有效成分中含有单萜烯类、多环二萜类物质,同时这些物质在松属植物中含量均十分丰富,很有可能是促进T_2菌株生长的物质。 另外,从松口蘑子实体的不同部位进行了菌种分离,得到了5株纯培养物,试验表明:菌褶是最适合其菌丝分离的材料。5株纯培养物与T_2菌株进行比较,形态特征基本相似,以T_3为代表对其非编码转录区进行DNA测序,结果鉴定为松口蘑菌。


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