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酶法水解马氏珠母贝肉制备血管紧张素转换酶抑制肽的研究

郝记明  
【摘要】:选用适合的蛋白酶对马氏珠母贝肉(Pinctadama martensii)进行水解,水解液经过分离提取后,得到血管紧张素转换酶抑制肽(ACEIP)。本课题主要包括了以下几个方面的工作。 1 分析马氏珠母贝肉营养成分。结果表明马氏珠母贝肉蛋白质含量高,氨基酸价为83,氨基酸组成合理,适合作为制备ACEIP的原料。 2 成功从猪肺提取得到ACE酶。以新鲜猪肺为原料,在低温条件下用Tris-HCl缓冲液浸提,粗酶溶液通过硫酸铵盐析沉淀和凝胶过滤等手段进一步纯化,得剑的ACE酶液比活力达到50.25u。 3 建立酶法水解条件。以6种蛋白酶为侯选酶种,分别在其最适条件下水解马氏珠母贝,以水解液ACE抑制率作为评价指标,结果表明水解效果较好的酶种为胃蛋白酶。正交试验确定的水解条件为:在pH2.2、温度39℃、酶浓度3%、水解时间6.0h、底物浓度12%。在该条件下水解,酶解液ACE抑制率可以达到81.70%,IC_(50)值为1.323 mg/ml。 4 制备得到2个较高ACE抑制活性的组分。超滤液经过凝胶层析分离得到的样品A和样品B,IC_(50)分别为0.033、0.041 mg/ml。样品A和样品B氨基酸中,含量最多的是苯丙氨酸(Phe),分别达到57.5%和53.2%。样品A和样品B相对分子量分别为1042和256。


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