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翅果油中植物甾醇的提取分离与结构分析

安媛  
【摘要】:本文以翅果油为原料,对植物甾醇的提取纯化工艺进行了研究,确定了适宜的工艺参数,得到了高植物甾醇含量的结晶产品。并以此产品为实验材料,综合采用传统的化学显色、薄层层析、柱层析方法,结合气相色谱、高分辨气相色谱-飞行时间质谱(GC-TOF-MS)联用等现代仪器分析手段对翅果油植物甾醇的组分进行了系统的分析研究,确认了翅果油植物甾醇中的十种成分。为进一步研究植物甾醇的结构和功能,从而为功能性食品的开发提供素材。实验结果如下: 1 改进了薄层色谱分离植物甾醇的方法:显色剂FeCl_3溶液;展开剂 Ⅰ正己烷:乙醚:冰乙酸=80:20:1,Ⅱ氯仿:乙醚=9:1;展开时间40~60min;110℃烘干2min。 2 建立了适合翅果油植物甾醇的气相色谱分离分析方法:DB-5柱(30m×250μm×0.25μm);初始炉温70℃,保持lmin,2℃/min升至295℃,保持10min;检测器温度270℃;进样口温度240℃;载气流速70.0mL/min;进样量0.6μL;分馏比50:1;检测器为氢火焰离子检测器(FID)。 3 通过正交试验,优化了湿法皂化提取植物甾醇的工艺组合:即在碱水解条件下在沸水浴中皂化1小时,然后按照萃取剂与皂化液比例3:1进行萃取。萃取后的粗甾醇(不皂化物)用乙醇做溶剂在加热状态下全部溶解并处于过饱和状态,在旋转蒸发器上减压蒸馏,进行结晶。甾醇得率19.5%。 4 翅果油中植物甾醇的组成如下:β-谷甾醇,82.34%;豆甾-5,24(28)-双烯-3 β-醇(有两种同分异构体),7.74%;麦角甾-5-烯-3 β-醇,3.05%;相对百分含量在1%以下的有麦角甾醇、豆甾醇、5-氯-豆甾烷-3-醇乙酸酯、豆甾烷醇、豆甾烷-7,24(28)-双烯-3 β-醇、豆甾烷-3,5-二烯。在翅果油植物甾醇中,豆甾-5,24(28)-双烯-3 β-醇、麦角甾-5-烯-3 β-醇、5-氯-豆甾烷-3-醇乙酸酯、豆甾烷-7,24(28)-双烯-3 β-醇均为首次发现。


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