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玉米黄色素的分离提取及四种类胡萝卜素测定方法研究

朱蕾  
【摘要】:类胡萝卜素作为天然色素和保健食品成分受到了关注,为了提高农产品附加值,为检测标准的制定提供理论依据,本文研究了以下内容。 优化了玉米蛋白粉中玉米黄色素的提取条件,分别对直接提取法和蛋白酶水解提取法进行了研究,确定了最佳提取条件。直接提取法确定的最佳提取溶剂为丙酮:石油醚=1:1(v/v),对蛋白酶水解法进行单因素及正交试验,得到最佳的水解条件为:使用中性蛋白酶在40℃、pH值为7、酶浓度1.4%、底物浓度5%的条件下水解6小时,蛋白酶水解法的玉米黄色素得率比直接提取法提高了126.8%。同时,对玉米黄色素的组分进行定性分析,确定了其中含有叶黄素、玉米黄素、番茄红素和β-胡萝卜素四个组分。 本研究建立了类胡萝卜素的分析方法,包括薄层层析法和高效液相色谱法。使用硅胶预制板(25mm×100mm)展开,展开剂条件为:分析烃基类胡萝卜素采用丙酮:石油醚=1:100(v/v);分析羟基类胡萝卜素采用丙酮:石油醚=3.5:6.5(v/v),对于混合物或是未知物可分别采用两个条件分析。高效液相色谱条件为:Diamonsil TM C18色谱柱(51m,250mm×4.6mm);流动相为乙腈与乙酸乙酯梯度洗脱,流速为1mL/min;二极管阵列检测器,检测波长:450nm。该方法可同时定性定量分析四种类胡萝卜素,未见报道。 确立了保健食品(膳食补充剂和番茄饮料)中类胡萝卜素的前处理方法。分别对不同剂型的膳食补充剂和番茄饮料采用了不同提取方法和溶剂。应用上述方法定性定量分析了七种膳食补充剂和五种番茄饮料中的类胡萝卜素成分,结果表明膳食补充剂存在类胡萝卜素成分与标志标签不符的问题,番茄饮料基本符合要求。同时对苏丹红染料与四种类胡萝卜素进行薄层分析,各组分完全分离,从而达到快速检测的目的。该研究为国家制定相应的标准提供了理论依据。


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