小尾寒羊多胎性状主要候选基因及繁殖相关基因表达量研究

【摘要】：为研究小尾寒羊多胎性的分子遗传机理,本研究分四个部分进行:(1)在小尾寒羊、无角陶赛特和无角陶赛特×小尾寒羊杂交一代三个母羊群体中,检测BMPRIB基因和BMP15基因的多态性,分析这两个基因作为绵羊多胎性状候选基因的可能性。试验表明:利用PCR-SSCP技术在三个群体(共261只母羊)的BMPRIB基因外显子6区均发现A→G突变(编码区746位处),该突变引起氨基酸序列由野生型的谷氨酸转变成精氨酸。而在三个群体中均未检测到BMP15基因上与FecX~1和FecX~H表型有关的两个位点的多态。通过对变异位点与绵羊产羔性状的关联分析,结果显示,BMPRIB基因型对产羔性状有明显效应(P0.05),纯合突变型BB和杂合突变型AB比野生型从母羊多产1.04和0.74羔。因此认为,该突变的发生有利于产羔数的增加,该突变位点可作为绵羊多胎性状的分子遗传标记。(2)选取不同BMPRIB基因型的小尾寒羊母羊共8只,利用半定量PCR和荧光定量PCR技术对其卵巢组织中BMPRIB基因的表达量进行研究。结果显示:BB型和AB型右侧及左侧卵巢的BMPRIB基因的表达量比从型都有上调,但并朱达到显著水平(P0.05),这表明小尾寒羊多胎性的出现与BMPRIB基因的表达量无直接相关。(3)利用半定量PCR技术研究发情期小尾寒羊BMPRIB基因型(BB、AB和AA)与FSHR和LHR的mRNA表达量的关系。结果显示:在发情期BB型右侧卵巢FSHR的mRNA水平(1.14±0.11)显著高于AA(0.44±0.11)和AB(0.36±0.08)型(P0.01),但左侧卵巢在基因型间无差异:BB型右侧卵巢LHR的mRNA水平(0.42±0.02)也显著高丁AA(0.23+0.02)和AB(0.25±0.04)型(P0.01),左侧卵巢各基因型间无差异。这表明FSHR和LHR的mRNA的高表达量可能是引起小尾寒羊较高的产羔数的原因之一。(4)利用半定量PCR技术研究发情期小尾寒羊BMPRIB基因型(BB、AB和AA)与ERα和PR的mRNA表达量的关系。结果显示:在发情期BB型右侧卵巢PR的mRNA水平(0.81±0.10)显著高于AA(0.43±0.10)型(P0.05),左侧卵巢各基因型间无差异。在发情期各基因型右侧卵巢和左侧卵巢ERa无显著差异(P0.05)。这表明小尾寒羊多胎性可能与PR mRNA表达量有关而与ERa表达量无直接关系。综合以上结果,BMPRIB基因编码区746位处的A→G突变可作为绵羊多胎性状的分子遗传标记,且小尾寒羊多胎性与BMPRIB基因和ERa的mRNA水平无直接关系,而与FSHR、LHR和PR的mRNA的表达量有关。