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土贝母化学成分及抗肿瘤活性研究

马挺军  
【摘要】:土贝母Bolbostemma paniculatum (Maxim.) Franquet为葫芦科假贝母属植物,系攀援性蔓生草本,生于山坡或平地,是一种传统中药。假贝母属有2种、1变种,为我国特有。主产于河南、河北、山西、内蒙古、山东、陕西、甘肃、云南、四川等地。野生分布广,人工种植已获成功,产量颇丰。块茎供药用,干燥块茎质地坚硬,可长期保存。《中华人民共和国药典》2000年版记载土贝母具有散结,消肿,解毒之功效。可用于乳痈,乳腺炎,颈淋巴结结核,慢性淋巴结炎,肥厚性鼻炎等。从中分离出来的土贝母皂苷经实验证明具有抗肿瘤、抗病毒、抗促瘤等药理作用,引起广泛的关注。为了阐明其活性成分,并为开发利用提供科学依据,我们对其进行了较系统的化学成分研究。 利用多种色谱分离手段,从土贝母根茎中分离得到了30个化合物,采用多种光谱技术鉴定了26个化合物,其中: 皂苷8个,分别为:土贝母苷Ⅰ(BB-1),土贝母苷Ⅵ(BB-2),土贝母苷Ⅱ(BB-3),土贝母苷Ⅲ(BB-4),土贝母苷Ⅳ(BB-5),7β,18,20,26-四羟基-20(S)-24 E-达玛甾烯-3-O-α-L-(3′-乙酰基)吡喃阿拉伯糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(BB-6),7β,18,20,26-四羟基-20(S)-24 E-达玛甾烯-3-O-α-L-(4′-乙酰基)吡喃阿拉伯糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(BB-7),7β,18,20,26-四羟基-20(S)-24 E-达玛甾烯-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-(1→2)-β-D-(6′-乙酰基)吡喃葡萄糖苷(BB-8); 杂环化合物4个:麦芽酚(BC-1),尿囊素(BC-2),腺甘(BC-3),胞嘧啶(BC-4);蒽醌1个:大黄素(BC-5); 三萜及甾醇5个:葫芦素B(BC-6),△~(7,22,25)-豆甾三烯-3β-醇(BC-7),△~(7,22,25)-豆甾三烯醇-3-O-β-D吡喃葡萄糖苷(BC-8),β-谷甾醇(BC-9),胡萝卜甘(BC-10); 糖类及苷类4个:B-D-葡萄糖2→1β-D-葡萄糖苷(BB-9),麦芽糖(BB-10),α-羟基丙酮葡萄糖苷(BC-11),蔗糖(BC-12); 脂肪酸及烷烃4个:棕榈酸(BP-4),三十一烷(BP-1),三十烷(BP-2),二十九烷(BP-3)。 其中新化合物1个:BB-2;9个化合物BP-1,BP-2,BP-3,BC-2,BC-4,BC-9,BC-10,BC-11,BB-9为首次从本属植物中分离得到。 对土贝母的5个粗提部位和分离得到的部分化合物进行了体外抗肿瘤活性筛选,初步确定了活性部位。体外实验结果表明,土贝母总提取物、氯仿部位和正丁醇部位对HL-60(急性早幼粒白血病)、HeLa(子宫颈癌细胞)、MDA231(乳腺癌)、KB(人鼻咽癌)、WM451(神经胶质瘤)都有很强的增殖抑制效应;石油醚、氯仿部位对KB细胞有细胞毒作用,其中氯仿部位的IC_(50)10μg/mL。 土贝母苷甲作用SH-SY5Y(人骨髓神经母细胞瘤)24h后细胞阻滞于S期,诱导SH-SY5Y细胞发生中期凋亡。免疫组化的结果显示苷甲作用48h后,hTERT蛋白和C-myc蛋白的表达均下降,土贝母甘甲作用SH-SY5Y细胞24h后,可下调其端粒酶活性。结果表明土贝母苷甲可抑制hTERT和C-myc蛋白的表达,进而下调SH-SY5Y细胞的端粒酶活性。 探讨了大孔吸附树脂法对土贝母总皂甘分离的影响。以土贝母总皂甘的吸附量和解吸率为指


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