气传霜霉和疫霉对恶霜灵、烯酰吗啉和霜脲氰抗性风险研究

【摘要】：杀菌剂抗性风险评估对于新药的研制、引进、应用和抗药性治理的决策至关重要,我国对此尚未系统研究,国外评估病菌抗药性风险实例极少,预测往往与实际不符。 本文通过葡萄霜霉和致病疫霉等获得抗药性,抗药菌株适合度与遗传稳定性,抗药菌株与敏感菌株的竞争,药剂之间交抗型,田间抗药性和药效反映等项研究,建立系统评估气传霜霉和疫霉对霜脲氰、烯酰吗啉和恶霜灵抗性风险的方法:探明其对恶霜灵、烯酰吗啉、霜脲氰分别有高、中、低度抗性风险:为我国开展杀菌剂抗性风险研究打下基础;根据霜脲氰为低风险药剂、与高风险的甲霜灵和恶霜灵之间无交抗关系,与代森锰锌混配增效并延缓致病疫霉对恶霜灵抗性发展,对抗性黄瓜霜霉病防效显著等,确立霜脲锰锌作为替代药剂使用,治理苯基酰胺类药剂抗性,降低靶标菌对该类药剂抗性风险的对策。 UV辐射孢子囊,致病疫霉对恶霜灵和烯酰吗啉抗性突变率4.2×10~(-7)和1.8×10~(-7),葡萄霜霉对两药抗性突变率1.4×10~(-7)和1.8×10~(-7),两菌未获抗霜脲氰菌株;UV辐射致病疫霉菌丝体,对霜脲氰、烯酰吗啉和恶霜灵抗性菌株出现频率依次为1.25%、8.75%和18.1%:MNNG诱导孢子囊,致病疫霉对三药抗性突变率依次5×10~(-7)、5×10~(-7)和3.3×10~(-7);葡萄霜霉对恶霜灵和烯酰吗啉抗性突变率5×10~(-7)和1.7×10~(-7),未获抗霜脲氰菌株。致病疫霉在含恶霜灵OA平板上继代培养3代产生抗药性,在含霜脲氰OA平板上继代培养5代并逐代提高浓度,产生低水平抗药性,对烯酰吗啉未驯化出抗性。葡萄霜霉分别在恶霜灵和烯酰吗啉处理的葡萄叶片上继代培养3代和7代均产生抗药性,对霜脲氰未驯化出抗性。 适合度测定表明,诱导致病疫霉和葡萄霜霉很易获得适合度不降低的抗恶霜灵突变菌株,大多数抗烯酰吗啉突变菌株致病力降低,抗霜脲氰菌株致病力降低或丧失。致病疫霉35个抗恶霜灵突变菌株中,5.7%的适合度指数显著高于原菌株,28.6%与其原菌株无显著差异,65.6%显著降低,葡萄霜霉7个抗恶霜灵突变菌株中,1株致病力适合度未下降,6株下降;致病疫霉14个和葡萄霜霉6个抗烯酰吗啉菌株适合度指数显著降低,致病疫霉2个抗烯酰吗啉菌株适合度未显著降低;致病疫霉9个抗霜脲氰突变菌株中,2株适合度指数显著低于原菌株,7株致病力丧失。经过无药继代培养测适合度指数,致病疫霉抗恶霜灵菌株OR1仍显著高于原菌株NS,葡萄霜霉3个抗恶霜灵菌株未显著变化,抗烯酰吗啉菌株DR2和PLDR1显著降低。 发现诱导的对恶霜灵抗性突变菌株很稳定:而对烯酰吗啉和霜脲氰抗性突变菌株不稳定,无药继代培养物或单孢系抗药性下降或丧失。活体上致病疫霉10个突变菌株对恶霜灵抗性水平28-3226倍,继代培养7代,1株抗性水平下降10倍;9株未明显降低;无药继代培养3代,致病疫霉2个抗性水平4倍的抗霜脲氰突变菌株丧失致病力,3个抗性水