收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

普氏野马粪便DNA方法优化及应用的可行性研究

刘刚  
【摘要】:动物血液和肌肉等组织业已广泛用于遗传学研究,然而,采集动物组织会伤及动物且难以获得充足的样本数量,目前研究者积极探索非损伤采样方法并运用遗传学研究。迄今非损伤取样方法在濒危物种保护遗传学研究中仍面临DNA量少、DNA降解、PCR抑制物、背景DNA干扰等诸多问题,制约了该方法及其相关研究深入开展。普氏野马重引入是我国一项濒危物保护生物学的重大实践,亟待开展非损伤途径的保护遗传学研究。 鉴于此,本研究以三种粪便保存方法和2种粪便DNA提取方法为自变量,以PCR成功率为因变量,比较每种处理组合的PCR成功率,建立了一种适合普氏野马粪便DNA的保存方法、提取方法以及PCR扩增方法,并探讨该方法运用于普氏野马遗传多样性研究的可行性。本研究将近缘种家马的4个微卫星位点用于50匹普氏野马粪便DNA的扩增,并扩增了线粒体DNA的12SrRNA。主要研究结果如下: (1)三种保存方法的PCR成功率存在显著性差异(P0.05),采用酒精保存效果较好。源自保存方法与提取方法的显著交互作用(P0.05)表明,酒精保存和手工提取方法这种处理组合的PCR成功率最高(66.1%)。 (2)粪便DNA保存时效性研究表明,采用酒精保存粪样的PCR在9个月时成功率(30%)显著降低(P=0.016),而采用干燥保存方法(P=0.031)和冷冻保存方法(P=0.001)的粪便DNA的PCR成功率,则在6个月的时候显著降低。 (3)本研究建立的提取方法表明CTAB、马铃薯淀粉以及BSA对于去除粪便中PCR的抑制物具有重要的作用。 (4)4个微卫星位点在50个普氏野马个体中共检测到16个等位基因,等位基因最低为3个,最高为5个,平均为4个。所有检测个体中,4个微卫星微点的平均期望杂合度(He)为0.703,平均观测杂合度(Ho)为0.575。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 张俊,马成德,颜辉;提高栏养条件下普氏野马繁殖率的一些认识[J];动物学杂志;1994年02期
2 陈金良;胡德夫;吕琪;孟玉萍;;普氏野马与家马的异同[J];大自然;2006年06期
3 马晨;;野马的明天[J];科学之友;2006年08期
4 李功发;;幸见普氏野马[J];科学之友(上旬);2010年10期
5 胡德夫 ,王镇山 ,陈金良;普氏野马的再引入及野化(普氏野马及其家族之四)[J];大自然;2005年05期
6 谢海云;;“国宝”安危牵动世人心——27匹普氏野马将放归大自然[J];科学之友;2001年12期
7 顾炳枢;;比大熊猫更珍贵的普氏野马[J];科学24小时;2003年03期
8 王墨清;普氏野马血像值测定[J];动物学杂志;1996年02期
9 谢海云;;“普氏野马”放归自然[J];科学与文化;2002年01期
10 赵肯堂;;野马纪事[J];大自然;2002年06期
11 曹杰;;保护取得进展的物种 普氏野马[J];科学世界;2007年06期
12 孙忻 ,王丽;普氏野马的现状[J];百科知识;2002年08期
13 顾炳枢;;狼群虎视普氏野马[J];大江周刊;2002年17期
14 李新禹,朱云清;关注珍稀动物普氏野马[J];生物学教学;2005年01期
15 胡德夫 ,李凯 ,陈金良;野马的兴衰(普氏野马及其家族之二)[J];大自然;2005年03期
16 张学荣;关于普氏野马(Equus przewalskii Poliakov)的第一次国际讨论会[J];动物学杂志;1960年06期
17 高行宜;谷景和;周嘉(衤啇);;普氏野马考察简报[J];干旱区研究;1984年01期
18 惠洁;;放回大自然的野马要回家[J];少年科技博览;2002年04期
19 杜海燕;;守望地球的人[J];科学生活;2005年02期
20 马成德;;野马工程,我们生存的希望——普氏野马的自述[J];大自然;1992年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘海英;陈刚;步宇翔;;碱基对的多铜修饰对DNA导电性的增强作用[A];中国化学会第28届学术年会第13分会场摘要集[C];2012年
2 赵宏远;李俊杰;桑润滋;;单细胞凝胶电泳技术检测不同处理山羊精子DNA损伤[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(下册)[C];2010年
3 刘玲;付强;朱化彬;彭秀丽;郝海生;杜卫华;赵学明;王栋;;牛毛囊基因组DNA制备方法的比较研究[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
4 梁春柳;;一个新的筛选化合物与DNA交互作用的简便方法[A];2010年全国药物毒理学学术会议论文集[C];2010年
5 张文众;李永宁;方瑾;梁春来;张倩男;;体外新评价方法——完整细胞核DNA检测板[A];全国生化/工业与卫生毒理学学术会议论文集[C];2010年
6 邹丹丹;汪海林;;基于DNA甲基化结合蛋白MBD的甲基化分析[A];中国化学会第28届学术年会第2分会场摘要集[C];2012年
7 张晔;杜智;杨斌;高英堂;;检测外周血中游离DNA的应用前景(综述)[A];天津市生物医学工程学会第29届学术年会暨首届生物医学工程前沿科学研讨会论文集[C];2009年
8 赵淑珍;刘光珍;;DNA免疫吸附治疗狼疮性肾炎的临床观察[A];第十一届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2010年
9 陈士林;;中药DNA条形码鉴定体系[A];第十届全国药用植物及植物药学术研讨会论文摘要集[C];2011年
10 陆佳飞;周克隆;王缦;;磁珠法快速提取乙型肝炎病毒DNA的研究及其在诊断试剂中的应用[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郭晓兰;端粒功能异常诱导的DNA损伤反应及其在肿瘤发生中的作用与分子机制[D];重庆医科大学;2010年
2 陈志健;1.8 GHz微波对X射线和阿霉素致淋巴细胞DNA损伤修复及对蛋白表达的影响[D];浙江大学;2010年
3 朱慧芳;Y家族DNA聚合酶对化学致癌物MNNG应答的转录调控研究[D];浙江大学;2009年
4 万超;抗猪瘟嵌合DNA疫苗及TRIF的DNA疫苗佐剂效应研究[D];武汉大学;2009年
5 赵丽霞;克隆绵羊印记相关基因的DNA甲基化研究[D];内蒙古农业大学;2010年
6 沈美龙;基于DNA免疫的乙型肝炎病毒表面抗原大中小蛋白的免疫原性研究[D];南京医科大学;2010年
7 徐铁刚;细菌DNA磷硫酰化修饰与限制[D];上海交通大学;2008年
8 高鹏;特异性介导DNA转导的多结构域嵌合蛋白的构建、表达及鉴定[D];吉林大学;2011年
9 康大伟;DNA分子器件场效应理论研究[D];山东大学;2010年
10 高天;基于寡核苷酸芯片的地中海贫血特异性DNA甲基化的研究[D];第三军医大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘刚;普氏野马粪便DNA方法优化及应用的可行性研究[D];北京林业大学;2011年
2 李芳;基于磁性微粒的法医样本DNA纯化[D];西北大学;2011年
3 芦丽淦;柚皮素及聚乙二醇增强乙肝DNA疫苗免疫效果的研究[D];河南大学;2010年
4 杨锦艳;六种香豆素有效成分与DNA相互作用的研究[D];山西医科大学;2010年
5 林启凰;用于乳腺蛋白标志基因检测的DNA电化学生物传感器的研究[D];福建医科大学;2010年
6 于文静;亚麻韧皮部特异启动子克隆与26份种质DNA指纹图谱构建[D];中国农业科学院;2010年
7 Rebecca Simisola Agboola;硼(B)和氯化钠胁迫处理诱导高粱(Sorghum bicolor)自交系发生形态和DNA甲基化的变异[D];东北师范大学;2010年
8 石微;溴氰菊酯致大鼠DNA损伤及损伤后修复功能的影响[D];青岛大学;2010年
9 张诺;DNA-纳米羟基磷灰石修饰电极的制备及在生物分析中的应用[D];济南大学;2010年
10 郭珈辰;基于图形表示的DNA相似性分析及进化树构建算法研究[D];湖南大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 陈杰;信息技术将重组汽车DNA[N];科技日报;2010年
2 刘霞;科学家研发出新型人工合成DNA载体[N];科技日报;2010年
3 南方;化危为机 企业需韧性生长的DNA[N];中国企业报;2009年
4 吴强;港大引新技术DNA辨食材[N];中国食品质量报;2010年
5 本报记者 施晓焰 通讯员 马丽娟;云南:DNA数据库成“打拐”得力帮手[N];人民公安报;2009年
6 张巍巍;垃圾DNA可促进癌症发展首获证实[N];科技日报;2010年
7 常丽君;虱子DNA表明人类17万年前首次穿衣[N];科技日报;2011年
8 记者 冯卫东;DNA碱基序列决定其光敏性假设获证实[N];科技日报;2008年
9 许文强;拆、装更便捷的DNA双螺栓结构模型[N];大众科技报;2008年
10 记者 常丽君;研究人员发现自组装DNA链的最佳长度[N];科技日报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978