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鼠李糖脂和脂多糖对铜绿假单胞菌在PEG-SAMs界面上粘附行为的影响

马万顺  
【摘要】:聚乙二醇(Poly (ethylene glycols), PEG)作为一种可以在液体环境中抗拒蛋白质吸附、微生物以及动物细胞粘附的表面涂层材料已经被广泛地研究和大量的应用,其优良的特性可以显著降低大多数微生物在界面上的粘附,但是该特性对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)粘附的影响并不显著,阐明P.aeruginosa细胞同PEG界面发生强相互作用的分子层面上的机制,即揭示P. aeruginosa细胞表面的何种分子发挥了粘附因子作用是一项很有价值的研究工作,有助于阐释PEG抗粘附机理并且改进表面修饰的策略和手段,提高表面PEG化等惰性手段对P.aeruginosa等之类细菌抗粘附功能有重要意义。本课题首先筛选了在EG3(Tri (ethylene glycols))自组装单层膜(Self-Assambled Monolayers, SAMs)界面不能粘附的P.aeruginosa菌株,作为实验分析中的对照菌株;制作了可以原位实时观察细菌的粘附数量的平行板流体腔装置,通过对不同表现型的脂多糖(Lipopolysacchrides, LPS)突变株和鼠李糖脂(Rhamnolipids)相关基因的突变株在EG3-SAMs上粘附速率的分析,从而分析LPS和鼠李糖脂在粘附行为中是否是发挥关键作用。在发现鼠李糖脂和脂多糖不起作用的情况下,又利用修饰了EG3-SAMs的金纳米颗粒从可粘附的P.aeruginosa外膜中进一步分离可以吸附在PEG-SAMs的分子,而后试图通过质谱等手段进行成分分析。目前实验结果表明,LPS和鼠李糖脂对P.aeruginosa菌在PEG-SAMs表面上的粘附行为没有显著的影响,而质谱分析则没有出现检测信号,需要进一步的优化条件。


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