京西葛组织培养及快速繁殖体系建立的研究
【摘要】:
本研究通过开展京西葛(Pueraria lobata)茎段的离体培养和快速繁殖实验,探讨了京西葛(Pueraria lobata)愈伤组织的诱导、分化,不定芽的诱导、分化、增殖及生根的最佳培养条件。
分别以京西葛的叶片及带芽的茎段为外植体,以酒精和不同浓度的NaCIO为消毒剂,用不同的处理时间对外植体进行消毒,探讨不同处理对外植体污染和生长的影响。结果表明,以京西葛的具腋芽茎段为外植体,经2.2% NaClO消毒25-30 min后成活率可达50%;以京西葛的叶片为外植体,经2.2% NaClO消毒15-18 min后成活率可达46%。
京西葛的叶片和茎段均能诱导出愈伤组织,适于叶片诱导愈伤组织的培养基是MS+NAA1.0 mg/L+6-BA1.5 mg/L,适于茎段诱导愈伤组织的培养基是MS+NAA0.02 mg/L+6-BA0.4mg/L+2,4-D0.4mg/L,在愈伤组织的继代培养中发现茎段诱导的愈伤组织更有利于继代培养。
在不定芽诱导的过程中发现,最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导分化率达到88.89%;而不定芽分化及继代培养的最适培养基为MS+ NAA0.15 mg/L+6-BA 0.3 mg/L+2,4-D 0.2mg/L,继代芽分化率为83.33%,继代倍数达6-7倍;适于生根的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L,生根率达100%。
组培苗移栽时,使用蛭石、珍珠岩和泥炭的比(体积比)为6:3:1的混合基质,成活率达到92%。本研究最终建立了京西葛的组织培养体系并初步建立起一套较为完善的快速繁殖技术体系。
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