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神经生长因子及受体在野生黄鼠卵巢中的表达

李犇  
【摘要】: 季节性繁殖是野生哺乳动物为了适应野外生存环境所进化出的一种特殊的繁殖方式,在温带野生哺乳动物中十分常见。研究野生哺乳动物季节性繁殖方式,对了解野生哺乳动物的繁殖习性和生活方式有着十分重要意义。野生达乌尔黄鼠(Citellus dauricus Brandt)是一种典型的季节性繁殖动物,在我国分布广泛,是研究野生哺乳动物季节性繁殖机制的良好模式动物。 神经生长因子(nerve growth factor, NGF)及其受体(trka和p75)是一族在动物体内广泛分布的蛋白质,对动物神经系统,内分泌系统,繁殖系统等的生长发育及细胞分化都起着重要调节作用。在雌性繁殖系统中,NGF及其受体通过旁分泌与自分泌的方式,对卵巢内卵泡的生长发育,排卵及激素合成都起到重要作用。 为了进一步研究NGF及其受体在季节性繁殖的条件下对雌性野生达乌尔黄鼠卵巢的作用,本研究采用形态学、组织学、免疫组织化学、免疫印迹与逆转录PCR (RT-PCR)等实验方法,对野生达乌尔黄鼠卵泡的生长发育进行了组织学观察,同时对NGF及其受体在繁殖期与非繁殖期卵巢中的蛋白质表达与mRNA水平进行了测定。研究结果表明,繁殖期黄鼠卵巢的大小、重量明显高于非繁殖期,且存在非繁殖期不具有的成熟卵泡与黄体;免疫组织化学结果表明,NGF及其受体大量存在于繁殖期卵巢的颗粒细胞、膜细胞、间质细胞与黄体细胞中,其中以在颗粒细胞表达最强;但在非繁殖期,NGF及其受体只表达在颗粒细胞、膜细胞与间质细胞中,且表达水平明显下降。免疫印迹结果表明,NGF及其受体的表达水平在繁殖期也明显高于非繁殖期;RT-PCR结果同样证明,NGF及其受体mRNA的表达水平,也是繁殖期高于非繁殖期且差异显著,这与免疫印迹等的结果也是一致的。结论:上述研究结果表明,NGF及其受体在繁殖期与非繁殖期都存在不同程度的表达,且繁殖期明显高于非繁殖期。推测在卵泡发育的过程中,NGF及其受体在卵泡发育、成熟及排卵的过程中起着重要生理学作用。


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