收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

血小板促进肿瘤细胞转移的相关机制研究

张娜  
【摘要】:肿瘤转移是恶性肿瘤导致患者死亡和难以治疗的主要原因。血小板可以增加肿瘤细胞在血管内皮细胞的粘附,并促进肿瘤细胞在转移器官的植入和生长,而抗血小板药物可以抑制肿瘤细胞的转移,但血小板促进肿瘤细胞转移的相关分子机制还不完全明了。因此,研究血小板促进肿瘤细胞转移的相关分子机制对肿瘤的治疗具有重要的意义。 目的:研究血小板在肿瘤细胞转移中的作用,分析血小板促进肿瘤细胞-内皮细胞粘附和肿瘤细胞转移的相关分子机制。 方法:采用人肝窦内皮细胞系(liver sinusoidal endothelial cell, LSEC)和五种易发生肝转移的肿瘤细胞系(结肠癌细胞系HCT116、乳腺癌细胞系MDA-MB-231、肺癌细胞系A549、骨肉瘤细胞系HOS和MG-63)作为研究的细胞模型。五种肿瘤细胞系分别经缺氧24小时复氧2小时培养活化后,与荧光染料BCECF标记的血小板共孵育,通过连续光谱荧光仪检测血小板与五种肿瘤细胞的粘附,并分别给予抗血小板粘附分子的抗体以分析血小板不同粘附分子在介导血小板与肿瘤细胞粘附中的作用。LSEC经缺氧24小时复氧2小时培养活化后,与荧光染料BCECF标记的血小板共孵育,通过连续光谱荧光仪检测血小板与LSEC的粘附,并给予抗血小板及内皮细胞粘附分子的抗体以分析不同粘附分子在介导血小板与LSEC粘附中的作用。比较存在或缺乏血小板的情况下,肿瘤细胞在LSEC的粘附,并通过不同抗粘附分子的抗体阻断作用以分析血小板促进肿瘤细胞-内皮细胞粘附的分子机制。通过染料转移、流式细胞术和免疫电子显微镜检测血小板与内皮细胞粘附后的细胞融合。通过激光共聚焦显微镜和胶体金免疫电子显微镜技术确定血小板促进肿瘤细胞-内皮细胞粘附的直接证据。为进一步验证体外实验的结果,我们从BALB/c裸鼠尾静脉分别注射肿瘤细胞或粘附有血小板的肿瘤细胞,两周后摘取动物肺组织比较肿瘤细胞在肺的转移灶,并通过病理切片检测肿瘤细胞的转移情况。另外,我们将肿瘤细胞单独或与血小板共同分别接种到BALB/c裸鼠皮下,两周后观察肿瘤细胞的成瘤情况和肿瘤大小,通过免疫组织化学染色比较两组肿瘤组织中的微血管密度。 结果:血小板与缺氧-复氧后的五种肿瘤细胞的粘附明显增加,与对照组的肿瘤细胞相比存在明显的统计学差异。不同的肿瘤细胞与血小板的粘附可以分别被不同的抗血小板粘附分子的抗体阻断,其中血小板与A549和HCT116两种肿瘤细胞的粘附被抗gpⅠb、gpⅡb和gpⅢa的抗体阻断,血小板与MG63细胞的粘附被抗gpIIb和CD36的抗体阻断,血小板与MDA-MB-231细胞的粘附被抗gpⅠb、gpⅡb、gpⅢa和CD31的抗体阻断,血小板与HOS细胞的粘附被抗gpⅠb和gpⅡb抗体阻断。血小板与缺氧-复氧后的LSEC粘附也明显升高,与对照组LSEC相比也存在明显的统计学差异,并且可以被抗粘附分子gpⅠb、gpⅡb、gpⅢa、P-selectin和CD31的抗体阻断。在存在血小板的情况下,肿瘤细胞与LSEC的粘附明显增加,并且肿瘤细胞的粘附数量与加入的血小板的数量呈正相关关系,不同抗血小板粘附分子的抗体可以选择性地阻断血小板介导的肿瘤细胞-LSEC粘附。染料转移实验发现,血小板与LSEC粘附后,血小板中的荧光染料可以转移到粘附的LSEC中;流式细胞术分析显示,血小板与LSEC粘附后,血小板表面的特有粘附分子gpⅡb转移到LSEC细胞表面;透射电子显微镜证实,血小板与缺氧-复氧的LSEC粘附并且部分胞膜发生融合。激光共聚焦显微镜观察到,肿瘤细胞粘附到有血小板粘附的LSEC表面。采用胶体金免疫电子显微镜技术,清楚地证明血小板位于肿瘤细胞和LSEC之间介导了肿瘤细胞与LSEC的粘附。动物实验显示,与血小板粘附的肿瘤细胞经尾静脉注射后,其肺表面肿瘤转移灶的数量明显高于无血小板的对照组,两组间存在明显的统计学差异;并且肺组织中肿瘤细胞克隆数也明显多于对照组。裸鼠皮下注射肿瘤细胞2周后,与血小板混合的肿瘤细胞生长明显加快,肿瘤体积明显大于无血小板的对照组。组织学检查显示,混合血小板的肿瘤组织中微血管密度显著高于无血小板的对照组。 结论:血小板表面存在与血管内皮细胞或肿瘤细胞粘附的分子,血小板粘附或融合到内皮细胞后可以通过这些粘附分子介导肿瘤细胞-内皮细胞的粘附和肿瘤细胞的转移,并通过诱导血管生成促进肿瘤细胞的生长。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 成宇;;肿瘤细胞的形成[J];百科知识;2006年15期
2 杨斌;辛华;韩春山;曲俊海;;肿瘤细胞血管外游走状况的初步探讨[J];中国实验诊断学;2010年07期
3 王媛;;低糖环境促进肿瘤细胞KRAS的突变[J];中国病理生理杂志;2009年11期
4 ;“饿死”肿瘤有新方法[J];祝您健康;2010年03期
5 ;“饿死”肿瘤新法[J];兵团建设;2010年04期
6 李喆;癌症手术自体输血的血液照射:有效去除污染的肿瘤细胞[J];国外医学.输血及血液学分册;2000年01期
7 邓杰;除肿瘤细胞滤器用于干细胞移植[J];国外医学.输血及血液学分册;1999年05期
8 李瑾,殷正丰;外周血循环中肿瘤细胞检测的临床意义与研究现状[J];肿瘤;2003年01期
9 顾毓华,许洪钧;6例脑脊液肿瘤细胞学检查报告[J];临床检验杂志;1986年03期
10 魏冬;;摧毁肿瘤细胞的纳米蠕虫[J];老同志之友;2008年08期
11 时德志,何滨,班翔;肿瘤细胞球体培养[J];哈尔滨医科大学学报;1986年03期
12 郑文;;现代抗癌中药,诱导肿瘤细胞“改邪归正”[J];抗癌之窗;2009年04期
13 ;美试验用肿瘤细胞治中风[J];中国肿瘤;2000年12期
14 戴静芝;单克隆抗体对聚丙烯酸己氰酯毫微粒的吸收作用及体外对肿瘤细胞的免疫特异结合[J];国外医学.药学分册;1984年04期
15 雷俊毅,赵庆夏;恶性肿瘤的转移[J];国际肿瘤学杂志;1984年02期
16 李潇;缺乏蛋白质Myc可使肿瘤细胞休眠[J];中国生物化学与分子生物学报;2005年02期
17 张明刚;韩岩梅;;致癌受体EGFRⅧ通过微囊泡在肿瘤细胞间传递[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2008年03期
18 王刚;;肿瘤细胞的去恶化[J];国际肿瘤学杂志;1986年01期
19 杨剑飞;;物质运动转化与肿瘤细胞逆转——兼与廖世栋同志商榷[J];医学与哲学(人文社会医学版);1990年08期
20 文井;;抵御肿瘤细胞的食谱蔬菜汤[J];健康之路;2006年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李长菲;张利宁;万兵;马春红;刘星霞;宋静;;人CD137L在肿瘤细胞的表达及意义[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
2 王洁;沈洪昇;王彬;;2-氧-2-苯氧基-4H-螺{萘[2,3-e][1,4,2]氧氮杂膦烷-5,10-二酮对体外培养的人肿瘤细胞的细胞毒实验研究[A];2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2009年
3 余海;廖小宜;周志俞;卢勇;;人颊癌细胞在胶原凝胶中生长和浸润特性初步研究[A];海南省口腔医学会第二次学术会议论文汇编[C];2000年
4 陈向荣;;粘附法筛选胃癌细胞亚株及鉴定[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
5 刘琦;吴波;姜少军;孟奎;石群立;施正良;;全反式维甲酸对卵巢上皮性癌荷瘤鼠干预后肿瘤细胞的超微结构变化[A];江苏省抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第四次肿瘤学术研讨会暨无锡市妇产科年会论文汇编[C];2005年
6 卜宁;孙秉中;;Exosomes对L1210肿瘤细胞攻击的免疫保护作用研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年
7 王卉;杨国仁;宋现让;赵书强;王兴武;赵伟;于金明;;[11C]PD153035表皮生长因子受体在不同表达水平肿瘤细胞的初步研究[A];首届全国分子核医学暨分子影像学学术交流会资料汇编[C];2006年
8 魏群;陈萍;王以;曹江;;eIF3s4 cDNA的克隆与表达载体的构建[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学学术大会论文集[C];2006年
9 高丰光;Germain J.P.Fernando;刘文军;;Th细胞在记忆性CTL介导的肿瘤保护中作用的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
10 龙塔;潘耀谦;佘锐萍;董发明;王天奇;杨玉荣;刘志军;;血管内皮生长因子在牛流行性白血病肿瘤组织的表达及其意义[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张娜;血小板促进肿瘤细胞转移的相关机制研究[D];北京协和医学院;2009年
2 焦阳;基质金属蛋白酶-2通过分解纤连蛋白促进整合素αvβ3-介导的肿瘤细胞的黏附与迁移[D];东北师范大学;2012年
3 吴昊;肿瘤微环境因子乳酸在肿瘤细胞适应葡萄糖缺乏中的作用及其机理[D];浙江大学;2012年
4 杨云山;IL-2基因修饰的肿瘤细胞来源的Exosomes的抗肿瘤作用及相关机制研究[D];浙江大学;2005年
5 韩春山;组织因子影响肿瘤细胞侵袭和血行转移的机制研究[D];吉林大学;2011年
6 丁宗辉;肿瘤微环境因子乳酸在肿瘤细胞适应葡萄糖缺乏机制的生物信息学研究[D];浙江大学;2011年
7 孙建国;新型NF-κB抑制剂Clitocine抑制耐药性肿瘤细胞的分子机制研究[D];浙江大学;2012年
8 辛华;肿瘤细胞向血管外游走过程中内皮细胞功能调控的研究[D];吉林大学;2004年
9 万海粟;LA795细胞不同转移率克隆株的建立及其转移相关特性的研究[D];中国协和医科大学;1992年
10 刘强;肿瘤细胞辐射敏感性评价及ANTP-Smac N7融合肽的肿瘤细胞辐射增敏作用研究[D];北京协和医学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韩晓燕;NOX家族蛋白在射线杀死肿瘤细胞中的作用[D];兰州大学;2012年
2 万剑;肿瘤细胞计算机辅助诊断系统的研究[D];华中科技大学;2004年
3 黄启超;IFN-α2a-NGR的肿瘤细胞敏感性研究[D];第四军医大学;2010年
4 杨丽娟;E-cadherin对肿瘤细胞转移进入血液循环后存活的影响及机理研究[D];北京协和医学院;2010年
5 刘爱华;缺氧上调肿瘤细胞PlexinB1基因表达的实验研究[D];华中科技大学;2010年
6 王元;原卟啉Ⅸ对S180和L1210肿瘤细胞DNA损伤及机制初探[D];陕西师范大学;2010年
7 程倩;pp32/PHAPI调控肿瘤细胞迁移的作用研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
8 马兆明;肿瘤细胞粘附诱导小鼠肺血管内皮释放一氧化氮[D];大连医科大学;2004年
9 付全威;香菇多糖对荷瘤小鼠T细胞亚群的影响[D];中国医科大学;2006年
10 杨婉薇;条索状透明质酸在肿瘤细胞表面的表达及其在肿瘤化疗耐药中的作用初探[D];苏州大学;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘向;德开发出预测癌症复发新方法[N];新华每日电讯;2005年
2 李凯;化疗也艺术[N];健康报;2006年
3 本报记者 马爱平;纳米药物会成为治癌“导弹”吗?[N];科技日报;2007年
4 本版编辑夏洪平 编译 复旦大学附属中山医院肺科 张新;肺癌细胞有“致命弱点”[N];健康报;2008年
5 王兵;硒为何被人们称为“抗癌之王”[N];保健时报;2006年
6 李斌吴晶晶 点评人 中科院生物物理研究所研究员 梁伟;“精确制导”打击癌细胞[N];人民日报;2007年
7 黑龙江省大庆市第一医院 张新平衣晓峰 整理;基底细胞癌为何转移少[N];健康报;2008年
8 记者 张冬素;“策反”肿瘤细胞“卫兵”[N];浙江日报;2005年
9 郑颖璠 方彤;CT抗原和肝癌[N];健康报;2007年
10 夏博 译;肿瘤转移前早有准备[N];健康报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978