收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

结节病患者Th17细胞和Treg细胞的表达水平及糖皮质激素治疗干预的影响

黄慧  
【摘要】:背景和目的: CD4+T辅助细胞是引起结节病免疫病理损伤的重要因素之一;近年来已把CD4+T辅助细胞从传统的Thl细胞、Th2细胞亚群拓展到Thl细胞、Th2细胞、Th17细胞和调节T细胞(Regulatory T cell,Treg细胞)亚群。Treg细胞和Th17细胞在自身免疫性疾病中的作用是近年来的研究热点,并提出自身免疫性疾病的Th17/Treg细胞失衡学说的免疫病理机制。IL-23在Th17细胞的诱导分化中起了很重要的强化和稳固作用,Th17细胞通过分泌包括IL-17A在内的多种细胞因子参与炎症反应,部分学者提出自身免疫性炎症的IL-23/IL-17A轴的重要作用理论。细胞因子IL-10、TGF-β既是Treg细胞的诱导分化因子,又是Treg细胞的重要效应因子,在Treg细胞介导的免疫抑制功能中发挥重要作用。视黄酸相关孤独受体?t(Retinoic acid-related orphan receptors?t, ROR?t)和叉头状蛋白—3 (Fork-head protein3, Foxp3)分别是Th17细胞和Treg细胞的特异性的核转录因子,在Th17细胞和Treg细胞的诱导分化、发挥效应中起很重要的作用。在结节病的免疫病理机制方面,近几年的研究关注Treg细胞的作用,仅有个别研究涉及结节病中的Th17细胞。本研究通过胞内细胞因子IL-17A、胞内转录因子Foxp3的染色进行Th17细胞和Treg细胞的流式细胞分析;并用ELISA法检测Th17细胞和Treg细胞的部分相关细胞因子,以及通过Real-Time PCR了解ROR?t和Foxp3的表达水平等方面探索Th17细胞、Treg细胞失衡是否参与结节病的发病以及上述细胞对糖皮质激素治疗干预的反应情况。 研究方法: 1.研究对象:①结节病组:10例病理确诊的初治、活动期肺结节病(Ⅰ-Ⅱ期)患者,且根据结节病治疗指南标准均需要接受治疗;糖皮质激素治疗4-6周后,根据临床表现的变化和复查的影像学资料分为激素治疗疗效好和疗效不理想两组; ②健康对照组:10例年龄、性别匹配的健康志愿者; 2.标本采集:①血标本:健康对照者、结节病患者治疗前及糖皮质激素治疗后4-6周,各抽取14mlEDTA抗凝静脉血,分离得单个核细(PBMC)和血浆; ②BALF:治疗前结节病患者,留取BALF分离得单个核细胞和上清; 3.实验方法:①流式细胞仪检测(健康对照者及结节病患者治疗前、后)PBMC和结节病治疗前BALF中单个核细胞中的CD4+IL-17A+的Th细胞(Th17细胞)比例及IL-17A的平均荧光密度值(Mean Fluorescence Index, MFI)、CD4+CD25bright+Foxp3+的T细胞(Treg细胞)的比例及Foxp3的MFI; ②ELISA法检测(健康对照者血浆、结节病患者治疗前后血浆及结节病治疗前BALF的上清中)细胞因子IL23、IL-17A、IL-10和TGF-β的水平; ③Real-time PCR检测结节病患者治疗前后外周血中ROR?t和Foxp3的表达水平的变化。 4.统计方法:采用SAS 9.0软件包,符合正态分布的计量资料采用t检验(成组资料采用成组t检验,配对资料采用配对t检验);非正态分布的计量资料采用秩和检验。P0.05为差异有统计学意义,其中P0.001为差异具有显著统计学意义,P0.05为差异无统计学意义。采用GraphPad Prism4绘图。 研究结果: 1.入组患者情况: ①平均年龄:51.9±7.6岁;女:男=9:1; ②乏力8例,体重下降7例(3-15kg不等),咳嗽5例,活动后气短6例,胸痛3例,皮疹2例,低热1例;中枢性面瘫1例,所有患者均无浅表淋巴结肿大、杵状指和肺内爆裂音; ③BALF的T4/T8:6.54+3.82; ④Ⅰ期:Ⅱ期=4:6;糖皮质激素疗效好组5例,疗效不理想组5例; 2.流式细胞检测分析Thl7细胞、Treg细胞比例及IL-17A、Foxp3的MFI: ①活动期结节病治疗前外周血中的Th17细胞的比例高于健康对照者的水平(P=0.0139);活动期结节病患者治疗前BALF中的Th17细胞的比例显著高于其外周血中的水平(P值分别为P=0.0016);但上述组间的IL-17A的MFI差异无统计学意义; ②活动期结节病治疗前外周血中Treg细胞的比例低于健康对照者的水平(P=0.0286),且结节病患者外周血中的Foxp3的MFI小于健康对照组的水平(P=0.0038);活动期结节病治疗前BALF中的Treg细胞的比例高于其外周血中的水平(P=0.0346),但两者Foxp3的MFI的差异无统计学意义(P0.05); ③与健康对照者外周血中的Th17细胞/Treg细胞比例的比值(Th17/Treg比值)相比,结节病患者外周血中Th17/Treg比值存在明显的失衡; ④结节病患者在糖皮质激素治疗前后Th17细胞和Treg细胞比例、IL-17A和Foxp3的MFI的差异无统计学意义(P0.05); ⑤不同疗效组的结节病患者,治疗前外周血和BALF中的Th17细胞、Treg细胞的比例及IL-17A、Foxp3的MFI等方面的差异均无统计学意义(P0.05)。 2.ELISA法检测Th17细胞和Treg细胞相关细胞因子水平: ①活动期结节病患者外周血中的IL-10水平高于健康对照(P=0.0406),但IL-17A、IL-10和TGF-β水平的差异无统计学意义(P0.05); ②活动期结节病患者治疗前BALF中IL-23、IL-17A水平高于外周血中的水平(P值分别为P=0.0347、P0.0001),BALF中IL-10水平低于外周血水平(P=0.0003),而BALF和外周血中TGF-β水平的差异无统计学意义(P0.05); ③糖皮质激素治疗前、后外周血中IL-17A、IL-23、IL-10和TGF-β等细胞因子水平的差异无统计学意义(P0.05); ④不同疗效组的结节病患者,治疗前外周血和BALF中的IL-17A、IL-23、IL-10和TGF-β3等细胞因子水平差异也均无统计学意义(P0.05)。 3. Real-time PCR检测Th17细胞、Treg细胞的特异性核转录因子的表达水平: ①糖皮质激素治疗前后外周血中ROR?t表达水平的差异无统计学意义(P=0.057);但从基因表达水平变化的趋势图看,治疗后ROR?t表达水平有明显的下降趋势; ②糖皮质激素治疗前后外周血中Foxp3表达水平的差异有统计学意义(P=0.0135)。 结论:Ⅰ-Ⅱ期初治的活动期肺结节病患者,在外周血和BALF中存在Th17/Treg细胞比值失衡及Th17细胞、Treg细胞相关细胞因子水平的紊乱,提示Th17细胞、Treg细胞可能参与肺结节病的发病。由于免疫细胞网络和细胞因子网络的复杂性,并且Th17和Treg细胞均无特异性的细胞因子,糖皮质激素治疗前后Th17、Treg细胞的比例和相关细胞因子水平无变化。但糖皮质激素治疗后能上调Foxp3的表达水平,治疗后ROR?t的表达水平差异虽无统计学意义,但也有明显的下调趋势,提示糖皮质激素可能试图通过影响Th17/Treg细胞的比值来发挥治疗作用。不过,糖皮质激素的临床疗效可能与Th17细胞、Treg细胞的表达特征及其相关细胞因子水平的差异无直接关联。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 贾文源,杨华;结节病四例[J];吉林大学学报(医学版);1985年04期
2 韩淑珍;老年人结节病6例报告[J];吉林大学学报(医学版);1991年06期
3 王廷基,杜毅,化冰;结节病累及附睾一例报告[J];中华泌尿外科杂志;1994年06期
4 李树花,刘昌起;胸内结节病患者的结核菌素试验[J];中华结核和呼吸杂志;1998年02期
5 阙绪光,胡瑞德,陆堃,庞家传,林红,吴妙玲;心脏结节病(附1例报告)[J];现代临床医学生物工程学杂志;2000年01期
6 董学惠,王海英;Ⅲ期结节病1例报告[J];中国煤炭工业医学杂志;2001年03期
7 刘维萍;结节病性肾损害[J];国外医学.泌尿系统分册;2004年01期
8 金鹤;董玉梅;;结节病一例[J];临床内科杂志;2006年06期
9 斯可哉;结节病患者泪液中血管紧张素转化酶测定[J];国际眼科学纵览;1983年05期
10 陶剑英;腮腺结节病3例报告[J];中国实用内科杂志;1989年11期
11 高耀先;血管紧张素转换酶与临床疾病[J];中国医师进修杂志;1989年01期
12 刘瑞平,王永生;胸内结节病的X线诊断(附6例报告)[J];实用放射学杂志;1990年01期
13 徐作军,朱席琳,赵岩,邱长春,罗慰慈,朱元珏;人类白细胞抗原与结节病易感性及其不同临床表现的关系[J];中华内科杂志;1996年11期
14 刘缵仁,刘娟,马瑞梅;结节病误诊肺癌1例[J];重庆医学;1996年03期
15 杨克虎,郭胤仕;结节病研究文献计量学分析[J];兰州医学院学报;1998年02期
16 塔娜,王睿智;结节病2例[J];包头医学院学报;2000年01期
17 吴健 ,陈文;结节病的临床及CT扫描研究[J];现代医用影像学;2001年05期
18 仇立斌,李维红;口腔颌面部结节病1例[J];河北医药;2004年06期
19 归冰,孙新芬,王侠生;皮肤结节病20例临床分析[J];临床皮肤科杂志;2005年03期
20 徐国梁;;腹部结节病[J];陕西医学杂志;1977年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黄慧;;结节病患者中Th17细胞和Treg细胞表达水平的初探[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
2 李惠萍;;结节病与不典型结核病的鉴别诊断新方法[A];呼吸与危重症医学(2010-2011)[C];2011年
3 许小毛;孙铁英;杨菁菁;;结节病肾损害1例并文献复习[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
4 毛伟;崔恩海;王斌;;结节病并胸腔积液3例报告(附一例病例)[A];2011年第三十三届浙江省呼吸系病学术年会暨呼吸疾病诊治新进展学习班论文汇编[C];2011年
5 贾清;张永学;魏昊;吴志坚;孙逊;谭旭波;;17例结节病~(18)F-FDG PET/CT显像分析(摘要)[A];湖北省抗癌协会肿瘤影像专业委员会成立暨第一届学术大会论文汇编[C];2009年
6 金建敏;孙永昌;李然;田澄;燕飞;;上呼吸道累及为首发表现的结节病-病例报道与文献复习[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
7 李小美;李振华;康健;于润江;;200例结节病患者临床资料统计分析[A];中华医学会第三届全国间质性肺病暨弥漫性泛细支气管炎学术会议论文汇编[C];2010年
8 刘毅;;左氧氟沙星、雷公藤、利福平联合治疗结节病1例[A];2011全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2011年
9 韩骏锋;;结节病误诊为肺结核2例分析并文献复习[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
10 梁英魁;赵文锐;川玲;;~(18)FDG PET/CT显像在结节病临床诊断中的价值[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黄慧;结节病患者Th17细胞和Treg细胞的表达水平及糖皮质激素治疗干预的影响[D];北京协和医学院;2011年
2 莫律;自血穴注疗法调节哮喘炎症相关Th2、Th1、Th17和Treg表达的实验研究[D];广州中医药大学;2012年
3 谢三祥;Th1和Th17细胞在口腔扁平苔藓中的致病机制的初步研究[D];华中科技大学;2012年
4 王华英;Th17和Treg细胞在急性肝损伤模型及肠道菌群失调中的作用研究[D];浙江大学;2011年
5 王京岚;外周血血管紧张素转换酶(ACE),P物质(SP)与结节病发病机理的关系[D];中国协和医科大学;1995年
6 李丹;Th17细胞和Treg细胞在HIV感染中的免疫平衡研究[D];中国疾病预防控制中心;2011年
7 郑翠玲;低血清浓度培养的间充质干细胞特性及其对人Th细胞的免疫调节作用[D];中国协和医科大学;2009年
8 田易;组蛋白的甲基化修饰在人Treg细胞基因表达调节中作用机制研究[D];第三军医大学;2011年
9 葛剑;Th17、Th1和Tc1细胞亚群在慢性乙型肝炎及慢加急性重型乙型病毒性肝炎患者中的变化及意义[D];山东大学;2010年
10 徐作军;结节病的病因学研究[D];中国协和医科大学;1995年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵雨来;难治性丙型肝炎的临床病理特点及肝内Th1、Th2、Th17和Treg细胞的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
2 范恒健;肺腺癌患者外周血Treg细胞、Th17细胞的变化及其意义探讨[D];山东大学;2012年
3 王维维;Th17细胞和Treg细胞在原发性肝癌中的表达及与肿瘤进展的关系[D];第二军医大学;2010年
4 盛佳佳;调控Th17细胞和Treg细胞通路对子痫前期的影响[D];安徽医科大学;2012年
5 毛燕青;老年非小细胞肺癌外周血Th17和Treg细胞的表达及与免疫衰老的相关性研究[D];苏州大学;2011年
6 高琦;新的细胞亚群Th17在动脉粥样硬化形成中的作用[D];山东大学;2009年
7 刘长明;CD4+T辅助细胞中Treg及Th17在原因不明性复发性流产发病中作用的探讨[D];安徽医科大学;2012年
8 张艳华;长春新碱联合环磷酰胺治疗系统性红斑狼疮的临床研究及对Th17、Treg细胞影响的研究[D];山西医科大学;2011年
9 杨双文;辅助T细胞17(Th17)与调节T细胞(Treg)在局灶性脑缺血损伤中作用及机制研究[D];第四军医大学;2011年
10 李娜;慢性心力衰竭患者外周血中Th17细胞及Treg细胞变化情况研究[D];山东大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李霞 刘锦铭;如何提高结节病的确诊率[N];中国中医药报;2004年
2 徐天景;痰是怎样产生的[N];上海中医药报;2004年
3 泽文;秋冬易发家兔地方流行肺炎[N];中国畜牧兽医报;2005年
4 南京军区总医院医学影像中心 王骏;医生看病为何要“指东打西”[N];大众卫生报;2002年
5 赵红梅;测量血钙有何意义[N];农村医药报(汉);2007年
6 赵红露;“外阴瘙痒”也是病 切勿讳疾忌医[N];中国人口报;2006年
7 刘宁春;弥漫性间质性肺病10%易误诊[N];江苏科技报;2006年
8 严玉兰;老人肺结核如何诊疗[N];医药养生保健报;2008年
9 苏晓;风湿病不仅仅是关节痛[N];家庭医生报;2006年
10 健康时报记者 赵绍华;肿瘤晚期试试氩氦刀[N];健康时报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978