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经典Wnt信号传导通路在盆腔器官脱垂发病机制中的作用

王真  
【摘要】:背景 盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse, POP)在中老年妇女中发病率较高,严重影响妇女的健康和生活质量,是绝经后患者进行手术的常见指征。 POP的病理生理过程复杂,涉及多种功能蛋白及代谢通路,其中Wnt信号传导通路的变化与POP的发病相关。本实验研究经典Wnt信号通路相关蛋白Wnt16、FZD5(Wnt蛋白受体)和β-连环蛋白(β-catenin),及其对宫骶韧带成纤维细胞增殖和分泌的影响,初步探讨此通路在盆腔器官脱垂发病机制中的作用。 目的 研究经典Wnt信号传导通路对宫骶韧带成纤维细胞增殖和分泌的影响,从分子水平解释盆腔器官脱垂的发病机制。方法 选择北京协和医院盆腔器官脱垂(POP)患者5例,按盆腔器官脱垂定量(POP-Q)分度法分度,5例均≥Ⅲ度。选择无POP的妇科良性疾病患者5例作为对照组。标本取自宫骶韧带,以1%Ⅰ型胶原酶消化法进行宫骶韧带成纤维细胞的原代培养。采用差时贴壁法纯化成纤维细胞;利用细胞免疫组织化学染色法鉴定培养的成纤维细胞;以四唑盐比色实验(MTT)检测宫骶韧带成纤维细胞的生长增殖活性、蛋白质印迹(Western Blot)检测成纤维细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、 Wnt16、FZD5和β-catenin的表达 结果 1.免疫组化鉴定:90%的细胞,波形蛋白(+),角蛋白(-)。 2.MTT实验证实:POP组成纤维细胞的生长增殖活性明显小于对照组(P0.01)。 3. Western Blot证实:POP组宫骶韧带成纤维细胞中的MMP-2明显高于对照组(P0.05), Wnt16、β-catenin明显低于对照组(P0.05), FZD5显著高于对照组(P0.01)。 结论 1、POP宫骶韧带成纤维细胞的生长增殖活性降低。 2、POP宫骶韧带成纤维细胞中MMP-2蛋白含量升高,说明MMP-2可能是导致胶原分解增加,POP发生的重要原因。 3、POP组宫骶韧带成纤维细胞中经典Wnt信号传导通路可能受到抑制,导致成纤维细胞的生长增殖活性受到抑制,分泌各种胶原蛋白的能力下降,可能致使盆底韧带的支持张力下降,诱导POP的发生。


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