收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

远程缺血预处理提高梗死后心肌募集移植干细胞能力的实验研究

蒋钦  
【摘要】:背景:细胞移植已成为一种治疗缺血性心脏病的方法。静脉途径输注干细胞是一种无创、可重复、有前途的移植途径,并在临床中初步得到应用。由于肺循环的截留,心脏内细胞存留比例低严重影响治疗效果。急性心梗后,梗死心肌的基质细胞衍化因子-1表达匕调诱导干细胞定向迁移到损伤区。但其诱导合成在一周内将回到原来的状态。远程缺血预处理是一种在远端器官实行间断缺血而抗缺血-再灌注损伤的内源性保护策略。有观点认为远程缺血预处理晚期是通过募集动员骨髓干细胞而起保护作用。因此,我们设想远程缺血预处理可以激活亚急性梗死心肌的基质细胞衍化因子-1的合成表达,同时可以提高细胞移植后的心肌存留率。 方法:通过结扎雌性重约250-300克Sprague-Dawley大鼠的左前降支冠状动脉诱导心肌梗死。一周后,超声心动图筛查心功能合格的动物进入实验。远程缺血预处理的建立是通过开腹手术在腹主动脉上实行4个周期5分钟交替的阻断和开放完成。其对应的假手术包括开腹和暴露腹主动脉,而不实行阻断。通过酶联免疫吸附实验、逆转录聚合酶联反应和蛋白印迹分别检测血清、心肌中基质细胞衍化因子-1的表达。根据其时间变化趋势,确立心肌和血清间最大浓度梯度的时间点,并以此作为细胞移植的时间。移植细胞取源于重约60克的雄性大鼠,分离骨髓间充质细胞培养至第三代,以5-溴-2‘-脱氧尿苷标记。心梗后一周的雌性大鼠分两组,分别移植细胞和对照介质。每组再分远程缺血预处理组、假手术组和空白手术组。细胞移植组大鼠从股静脉注射4×106间充质细胞。对照介质组接受等体积的磷酸盐缓冲液注射。一个月以后,进行心功能评价、免疫组化寻找标记的细胞、聚合酶联反应检测Y染色体计算心肌中细胞存留率。为了明确基质细胞衍化因子-1是否在远程缺血预处理作用中发挥关键作用,腹腔注射特异性CXCR4的免疫球蛋白抗体以阻断基质细胞衍化因子-1/CXCR4轴,同样方法进行细胞移植,同期比较细胞心脏内存留比例。 结果:总共135只心功能合格的心肌梗死大鼠进入实验。在亚急性梗死大鼠中,远程缺血预处理在术后1小时诱导血清中基质细胞衍化因子-1显著升高(n=4,P0.01);术后12-48小时心肌内基质细胞衍化因子-1基因转录显著升高(n=4,P0.05);术后24小时上调最明显(n=4,P0.01),同时蛋白表达显著性提高(n=4,P0.01)。因此,远程缺血预处理后24小时是心肌与血清间梯度最大的时间点,从而作为细胞移植的时间。细胞移植一个月后,免疫组织化学和聚合酶联反检测均发现远程缺血预处理组的心内细胞滞留率更高(PCR检测Y染色体数的细胞滞留比例:0.45±0.12%:0.27±0.09%:0.25±0.07%,n=10,P0.01);远程缺血预处理后细胞移植显著改善梗死后心脏的左室短轴缩短分数(24.14±4.59%:16.79±4.34%,n=10,P0.05)和左室收缩末期内径(5.59±1.11mm:6.99±1.07mm,n=10,P0.05)。而特异的CXCR4抗体阻断能够降低远程缺血预处理诱导的心内高细胞滞留率(0.45±0.12%:0.29±0.09%,n=10,P0.05)。 结论:远程缺血预处理晚期24小时激活亚急性梗死心肌内基质细胞衍化因子-1的转录蛋白合成。远程缺血预处理后24小时心肌与血清间基质细胞衍化因子-1的浓度梯度最大。远程缺血预处理后1天经静脉途径细胞移植能够提高细胞在心脏中存留比例。基质细胞衍化因子-1在远程缺血预处理诱导的高移植效率中发挥重要作用。使用远程缺血预处理修饰心脏是提高经静脉途径细胞移植后心内细胞滞留率的一种新方法。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 薛群,张学光,苗宗宁,华军,曲静,王明元,施勤,陈永井,方振羊;胎盘间充质干细胞样细胞的培养及生物学特性的实验研究[J];苏州大学学报(医学版);2005年02期
2 张培训,姜保国;骨髓间充质干细胞的研究进展与周围神经修复[J];中国临床康复;2004年02期
3 杨清成,张向东,梁长春,杜英,李红伟;脑卒中患者鞘内神经干细胞注射半年后功能状态评估(英文)[J];中国临床康复;2005年09期
4 洪德恩;;史上第一例干细胞气管移植成功[J];心血管病防治知识;2009年04期
5 潘志强,张文华,孙葆忱;角膜干细胞增殖与分化表达实验研究[J];中华眼科杂志;1999年01期
6 张建新;经络是干细胞系——兼论物种的起源与干细胞系的进化[J];中国中医基础医学杂志;2001年04期
7 朱薇;骨髓干细胞在肝病中的研究进展[J];国外医学.消化系疾病分册;2001年04期
8 徐红新;干细胞移植治疗心肌梗死的最新进展[J];医学新知杂志;2002年04期
9 仇逸;;人类真能“长命百岁”吗[J];华夏星火;2002年06期
10 盛璞义,廖威明,李晓艳,李佛保,何智勇,黄纲,谭美珍;Tet-on基因表达系统转染骨髓基质干细胞和诱导调控效应检测[J];中华骨科杂志;2003年03期
11 黄定强;间充质干细胞的研究进展[J];国外医学.耳鼻咽喉科学分册;2003年03期
12 郑汉巧,欧阳静萍,余峰,黄卫华,李银萍,吴珂,庞代文;脂肪组织干细胞分化为神经元样细胞研究[J];武汉大学学报(医学版);2003年04期
13 张树庸;国内外生物技术研究概况(续)[J];实验动物科学与管理;2005年01期
14 马爱群,蒋文慧;成体干细胞治疗缺血性心血管疾病的现状及存在的问题[J];武警医学;2005年01期
15 李冬梅,金连弘,张宇,李呼伦,刘慧雯,张宝东;骨髓间充质干细胞定向诱导成类软骨细胞的实验研究(英文)[J];中国临床康复;2005年02期
16 李艳萍;一例经皮外周干细胞心肌移植病人的护理[J];中国血液流变学杂志;2005年01期
17 李启明,李宁,程天民,粟永萍;干细胞、肿瘤干细胞与高压氧微环境[J];重庆医学;2005年05期
18 程林;张文同;庄岩;;脂肪母细胞瘤2例报告并文献复习[J];临床小儿外科杂志;2006年02期
19 朱培成;禤国维;范瑞强;;毛囊干细胞研究进展[J];岭南皮肤性病科杂志;2006年04期
20 于恒超;窦科峰;;肝干细胞与肝癌干细胞[J];国际肿瘤学杂志;2007年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 毛峰;;脂肪干细胞向神经元的诱导分化[A];湖北省暨武汉市病理生理学会第十四届学术年会论文汇编[C];2008年
2 王尊彦;;生长因子——划时代食用干细胞产品[A];美丽人生 和谐世界——中华医学会第七次全国医学美学与美容学术年会、中华医学会医学美学与美容学分会20周年庆典暨第三届两岸四地美容医学学术论坛论文汇编[C];2010年
3 吴齐全;周君梅;张胜利;马晓荣;高同斌;谢华;陈方;;人羊水来源干细胞向血管内皮细胞分化的实验研究[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年
4 陈志胜;陈胜锋;王丙云;刘林;;小鼠孤雌胚胎干细胞建系方法与效率[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
5 刘祖梅;韩毅;杜心灵;胡燕;金满文;;成年小鼠心脏干细胞的分离、培养鉴定和离子通道特性[A];2008心血管药理学术研讨会论文汇编[C];2008年
6 余细勇;;干细胞向心肌细胞分化的表观调控研究[A];第七届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2009年
7 王国平;段亚琦;;干细胞与心肌梗死后的修复——机遇和挑战[A];中华医学会病理学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
8 郭坤元;佘妙荣;牛新清;胡亮杉;贺艳杰;曲佳;邓兰;涂三芳;;白血病干细胞的同种异体免疫抵抗和调节[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
9 李蓝;;皮肤恶性肿瘤中潜在的肿瘤干细胞[A];中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2008年
10 胡菲菲;徐静;陈娟;廖联明;崔毓桂;刘嘉茵;;产后小鼠子宫内膜边缘群干/祖细胞的分离纯化[A];江苏省遗传学会第七届二次代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 蒋钦;远程缺血预处理提高梗死后心肌募集移植干细胞能力的实验研究[D];北京协和医学院;2012年
2 谢华桃;角膜上皮干细胞与基质微环境细胞的紧密连接及其机制的研究[D];华中科技大学;2012年
3 邹西峰;骨髓源干细胞在损伤脑组织中迁移和分化的研究[D];第一军医大学;2004年
4 邓蔓菁;面突外胚间充质干细胞的多向分化及永生化[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
5 江小霞;人骨髓间充质干细胞对树突状细胞免疫功能的影响[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
6 孔祥永;人胎儿肺上皮细胞的发育分化及其干细胞的初步鉴定[D];第一军医大学;2004年
7 庞希宁;干细胞诱导分化为神经细胞的研究[D];中国医科大学;2005年
8 方利君;骨髓间充质干细胞转化为皮肤组织的实验研究[D];中国医科大学;2004年
9 高文根;自体骨髓CD34~+干细胞移植治疗冠心病心肌梗死的实验研究[D];第四军医大学;2005年
10 刘宏伟;骨髓干细胞动员与移植治疗心肌梗死比较[D];中国人民解放军军医进修学院;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周德存;人骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌细胞的实验研究[D];安徽医科大学;2003年
2 陈伟;人骨髓间充质干细胞集落培养及其生物学特性的研究[D];第一军医大学;2004年
3 徐洪璋;骨髓间充质干细胞的相关研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
4 刘丹丹;人骨髓间充质干细胞向内皮细胞体外诱导分化的实验研究[D];吉林大学;2004年
5 傅斌;人前列腺干细胞分离培养及其生物学特性研究[D];江西医学院;2004年
6 黄宇婷;骨髓来源干细胞异位向子宫内膜方向分化的研究[D];复旦大学;2009年
7 汪萍;间充质干细胞在造血干细胞移植后支持造血重建的实验研究[D];郑州大学;2002年
8 李勇;大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性及BMP2在诱导其向神经元样细胞分化中的作用[D];第三军医大学;2004年
9 才晓君;大鼠骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化为心肌样细胞的实验研究[D];山东大学;2005年
10 李银华;脂肪干细胞作为血友病A基因治疗靶细胞可能性的研究[D];武汉大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 吴洁;思考干细胞——研究、临床应用与产业化[N];科技日报;2001年
2 本报记者 聂翠蓉;抓住致癌的真正元凶[N];科技日报;2006年
3 记者 毛黎;美找到获取干细胞的又一新来源[N];科技日报;2006年
4 本报记者 天明;Geron公司永失所“爱”[N];中国高新技术产业导报;2001年
5 北京和讯 张明星;干细胞——最大的生命科学概念[N];中国有色金属报;2001年
6 周向东;可以让你有一个备用的脏器[N];中国医药报;2001年
7 记者王俊鸣;科学家说用干细胞可修补脑部损伤[N];科技日报;2002年
8 杨昆;干细胞启动4000亿美元市场[N];医药经济报;2002年
9 章静波;干细胞——生命科学的一个主攻热点[N];光明日报;2000年
10 通讯员 王其玲 记者 罗坚梅;干细胞,燃起人类绝处逢生新希望[N];杭州日报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978