收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

ACE2激活对大鼠重度肺动脉高压的影响及机制研究

李刚  
【摘要】:背景和目的 致病因素的作用下,肺循环调节功能的失衡启动一系列病理生理改变,包括内皮功能障碍、炎症激活等,引起肺血管异常收缩,进而平滑肌细胞增殖、血管重构,最终导致肺动脉高压。肾素血管紧张素系统是心血管系统的重要调节系统,它在肺动脉高压发病过程中发挥重要作用,但是干预经典的肾素血管紧张素系统(ACE-Ang Ⅱ-AT1R轴)治疗肺动脉高压的效果欠佳。血管紧张素转化酶2(ACE2)及其参与的ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴是肾素血管紧张素系统的新成员,起着拮抗经典肾素血管紧张素轴的作用,而且在呼吸系统疾病中发挥着广泛的作用。本研究应用ACE2激动剂Resorcinolnaphthalein(Rec)干预野百合碱联合肺叶切除构建重度肺动脉高压模型,探讨ACE2激活在预防和逆转重度肺动脉高压中的作用及其机制。 方法 1.实验动物和分组:SD大鼠,随机分为6组:空白对照组,ACE2对照组,肺动脉高压组,ACE2预防组,ACE2治疗组,Mas受体拮抗组(Rec+A-779)。左肺切除后1周,皮下注射野百合碱诱导重度肺动脉高压。ACE2对照和ACE2预防组在野百合碱注射后第1天开始持续注射Rec, ACE2治疗组第14天开始注射Rec, Mas受体拮抗组第1天开始同时注射Rec和Mas受体拮抗剂A-779。 2.干预2周后,除ACE2治疗组外(干预42天),其余各组取8只,心导管测定平均肺动脉压和动脉收缩压,分离右心室测定右心室肥厚指数,弹力纤维染色(Verhoeff-铁苏木素染色)后分析肺动脉(100-200gm)中膜厚度和肺小动脉(50-100gm)内膜梗阻性增生程度。 3.内皮功能检测:肺动脉内注射不同浓度的乙酰胆碱和硝普钠,检测内皮依赖的血管舒张反应的变化。 4.活性荧光共振能量转移法检测肺组织ACE2酶活性。 5.生存分析:采用Kaplan-Meier生存分析图分析。 6. ELISA检测肺组织Ang Ⅱ和Ang-(1-7)浓度,Western blot检测肺组织ACE, ACE2, AT1R, Mas表达水平。 7.免疫组化检测直径50-100μm肺动脉管壁平滑肌抗体(a-SMA)和增殖细胞核抗原表达,分析肺动脉平滑肌细胞增殖情况。 8. RT-PCR检测肺组织炎症因子IL-6, MCP-1, TNF-α, IL-10。 结果 1.Rec对大鼠肺组织ACE2酶活性的影响ACE2对照组ACE2酶活性是正常的1.74倍;肺动脉高压组ACE2酶活性下降38.2%,ACE2预防和治疗组ACE2酶活性则分别比肺动脉高压组升高1.87和1.78倍,提示Rec可以激活大鼠肺组织ACE2。 2.ACE2激活对PAH大鼠生存率的影响 实验终点时,肺动脉高压大鼠和Mas受体拮抗组大鼠全部死亡,ACE2预防组未出现死亡,ACE2治疗组生存率为80%。统计学分析,ACE2治疗组和预防组与肺动脉高压组差异显著。 3.ACE2激活对血液动力学和右心室的影响 大鼠左肺切除联合野百合碱注射2周后,肺动脉压力升高,右心室肥大;ACE2对照组肺动脉压力没有明显变化。ACE2激活可以防止肺动脉高压和右心室肥厚,同样ACE2治疗4周也可以降低肺动脉压力,但是无法逆转肥厚的右心室。各处理组大鼠动脉收缩压没有变化。 4.ACE2激活对肺动脉内皮细胞功能的影响 在相同的基础肺动脉压力下,肺动脉高压大鼠乙酰胆碱诱导的内皮依赖的舒张反应减弱,ACE2不但可以抑制它的减弱,而且可以修复受损的舒张反应。硝普钠诱导的肺内皮依赖的舒张反应各组之间没有明显差异。 5.ACE2激活对肺动脉中膜肥厚和内膜增生的影响 肺动脉高压大鼠的直径为100-200gm的肺小动脉主要表现为中膜肥厚,ACE2激活可以抑制和逆转中膜肥厚。直径为50-100μm的肺小动脉主要表现为内膜增生,梗阻明显,ACE2预防组大鼠则主要表现为中膜肥厚,ACE2治疗组大鼠小动脉梗阻程度也显著下降。 6.Mas受体对ACE2效果的影响 同时应用ACE2激活剂Rec和Mas受体阻断剂A-779,肺动脉高压预防作用消失,包括改善生存率,降低肺动脉压力,抑制右心室肥厚,肺小动脉中膜肥厚和内膜增生。 7.ACE2激活对肾素血管紧张素系统各主要成份的影响 肺动脉高压形成以后,ACE和AT1R上升为正常的2.49和2.75倍,Ang IⅡ则由25.06±3.81pg/mg上升到91.00±6.70pg/mg,ACE2激活可抑制ACE(78.5%), AT1R(78.9%)和Ang Ⅱ(46.60±10.00pg/mg)的上升,但是肺动脉形成以后再激活ACE2,ACE和AT1R下降不明显,仅能降低Ang Ⅱ(52.01±7.61pg/mg,). 肺动脉高压大鼠肺组织ACE2降低为正常的41.67%,而预防和治疗组ACE2则达到肺动脉高压大鼠的2.52和2.35倍。肺动脉高压对Mas和Ang-(1-7)的影响不大,ACE2激活后,Mas则分别升高了的2.43和2.51倍,Ang-(1-7)也相应升高。 肺动脉高压大鼠肺组织ACE/ACE2和AT1R/Mas比值明显升高,而预防组和治疗组这两个比值则降低。 8.ACE2激活对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 各组直径为50-100gm肺小动脉壁均广泛表达平滑肌细胞抗体,提示平滑肌细胞在其病变中占重要地位。肺动脉高压大鼠肺动脉增殖细胞核抗原阳性率显著升高,ACE2激活后可以降低平滑肌细胞的增殖细胞核抗原阳性率,抑制增殖。 9.ACE2激活对肺组织炎症因子的影响 大鼠肺动脉高压形成后,IL-6上升47倍,MCP-1上升31倍,TNF-a上升16倍,IL-10下降79%;而预防组IL-6降低85%,MCP-1降低86%, TNF-α降低82%,IL-10上升11倍,治疗组则IL-6降低82%,MCP-1降低80%, TNF-α降低78%,IL-10升高9倍。 结论 1.Rec持续注射可以在大鼠体内有效的激活肺组织ACE2 2.ACE2激活可预防左肺切除联合野百合碱注射诱导的大鼠重度肺动脉高压形成 3.ACE2激活一定程度上逆转大鼠重度肺动脉高压的血液动力学和病理学改变 4.ACE2激活通过调控肾素血管紧张素系统内缩血管/促增殖轴(ACE-AngⅡ-AT1R轴)和血管保护轴(ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴)之间的平衡起作用。 5.在大鼠肺动脉高压的形成和进展过程中激活ACE2,可修复内皮依赖的血管舒张反应,改善内皮功能;可减少新生内膜中平滑肌细胞PCNA的表达,抑制平滑肌细胞增生;可降低肺组织促炎因子IL-6, MCP-1, TNF-α,升高抗炎因子IL-10,从而减轻炎症反应。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 俞秋棠;王宝林;茅幼霞;;肺动脉高压与肺心病[J];浙江大学学报(医学版);1982年S1期
2 陈朋;;右心室双出口(综述)[J];江西医学院学报;1983年01期
3 徐素梅,汪正芳,宁寿葆;不典型动脉导管未闭的鉴别诊断[J];临床儿科杂志;1986年02期
4 蒋仲荪,蔡孔长,喻华芝,韩阳,蒋庆;肺动脉高压患者的肺阻抗血流图波形的频谱分析[J];温州医学院学报;1987年01期
5 张遵哲;张鸿兰;;先天性心脏病肺动脉高压治疗的体会[J];宁夏医学杂志;1987年01期
6 Weitzenblum E;曾广斌;;COPD患者肺动脉高压的进程和预后[J];国际呼吸杂志;1987年04期
7 沈世竑;萨藤三;;肺心病肺动脉高压形成机理及血流动力学改变[J];浙江医学;1988年04期
8 缪澄宇;厉芝瑞;李国彤;;中度高原人心血心钠素测定[J];青海医药杂志;1988年02期
9 翁维礼,胡旭东;先天性心脏病并发肺动脉高压患者血浆血栓素B_2、6-酮-前列腺素F_(1α)和肾素、血管紧张素Ⅱ的变化[J];中国循环杂志;1989年03期
10 曾广斌;;前列腺素E_1对慢性阻塞性肺疾病伴肺动脉高压的作用[J];国外医学.内科学分册;1989年06期
11 曾广斌;;脉冲多普勒超声心动图对成人囊性纤维化患者肺动脉高压无创性检测的评价[J];国外医学.内科学分册;1989年06期
12 阮英茆,朱晓东,程显声,沈宗林,张连庄,陈白平,胡盛寿,司文学,赵永平,梁风玲;100例先天性心脏病肺动脉高压肺活检病理分级的初步探讨[J];中国循环杂志;1992年01期
13 张宇,蔡孔长,蒋仲荪,徐正惠;川芎嗪和青霉胺对大鼠慢性实验性肺动脉高压的影响[J];中国循环杂志;1992年06期
14 田小园,赵一举,程显声;闭塞性肺血管病的心电图变化[J];心电学杂志;1993年02期
15 李军;陈夏丰;陈启福;;婴幼儿室间隔缺损并肺动脉高压行直视修补术后肾素-血管紧张素-醛固酮系统的变化[J];中华实验外科杂志;1996年05期
16 苗雅,张薇,葛志明,张运;上腔静脉和三尖瓣血流评价肺动脉高压时右心室舒张功能的研究[J];中国超声医学杂志;2004年06期
17 周华富,何巍,陈铭伍,覃家锦,李世康,冯旭;大型室间隔缺损伴肺动脉高压的外科治疗[J];中国胸心血管外科临床杂志;2004年02期
18 杨秀春,崔炜;西地那非在肺动脉高压中的应用[J];心血管病学进展;2005年04期
19 刘云英;20例新生儿肺动脉高压的临床分析[J];滨州医学院学报;2005年04期
20 王玉华,王艳红,刘志勇;小儿先天性心脏病合并肺动脉高压的体外循环管理[J];现代医学;2005年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 解卫平;崔文玉;龙超良;胡刚;汪海;;埃他卡林对肺动脉高压的影响及其作用机制研究[A];第九届全国心血管药理学术会议论文集[C];2007年
2 刘荣清;;系统性红斑狼疮肺动脉高压50例临床分析[A];2009中国中西医结合系统性红斑狼疮研究学术会议资料汇编[C];2009年
3 刘坤申;刘超;籍振国;刘刚;;肺动脉高压治疗的循证医学证据[A];中华医学会心血管病学分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2006年
4 于慧敏;初洁秋;;雷诺现象在肺动脉高压中的临床意义[A];全国第七届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2008年
5 王良兴;杨中卫;;PPAR-γ在COPD所致肺动脉高压患者中的表达变化[A];2008年浙江省内科学学术会议论文汇编[C];2008年
6 何志旭;汪浩文;严虎;尚峰;;VEGF基因转染骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠实验性肺动脉高压的研究[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编(上册)[C];2010年
7 李慕洁;;先天性心脏病并肺动脉高压术后护理[A];2008年中国岭南护理学术讲坛论文集[C];2008年
8 吴卫华;胡长平;李元建;;MicroRNA-130a在肺动脉高压血管重构中的作用[A];传承与发展,创湖南省生理科学事业的新高——湖南省生理科学会2011年度学术年会论文摘要汇编[C];2011年
9 姚允泰;李立环;;肺动脉高压患者行心脏手术的围术期处理[A];2008年中华医学会全国麻醉学术年会论文汇编[C];2008年
10 刘斌;张洪峰;张一帅;张洁洁;李廷波;彭军;;BTM-0512抗肺动脉高压心血管重构的作用及机制[A];中南地区第八届生理学学术大会论文摘要汇编[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 胡蕙蕙;过表达血管紧张素转化酶2基因预防低氧性肺动脉高压的研究[D];浙江大学;2012年
2 李刚;ACE2激活对大鼠重度肺动脉高压的影响及机制研究[D];北京协和医学院;2012年
3 张洪亮;肺动脉高压的实验与临床研究[D];中国协和医科大学;2010年
4 张艳萍;贻贝蛋白中ACE抑制肽的制备及其构效关系研究[D];浙江工商大学;2011年
5 曾伟杰;肺动脉高压临床治疗与预后的研究[D];北京协和医学院;2011年
6 王骁智;先天性室间隔缺损伴肺动脉高压新致病机制的初步研究[D];南京医科大学;2012年
7 倪贺;酵母来源血管紧张素转移酶抑制多肽的制备及其抑制机理的研究[D];华南理工大学;2012年
8 卢献灵;西地那非治疗肺动脉高压前瞻性多中心临床研究[D];中国协和医科大学;2010年
9 田清青;壳聚糖固定化血管紧张素转化酶的制备及其应用[D];湖南师范大学;2012年
10 郭强;上调和激活肺动脉平滑肌细胞上的钙敏感受体参与肺动脉高压发病机制的研究[D];苏州大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 蒋予川;酶解军曹鱼头制备ACE抑制肽的研究[D];广东海洋大学;2010年
2 范茜君;ACE基因多态性与纳西族脑血管病患者的相关性研究[D];昆明医学院;2010年
3 宋晶;人参ACE抑制蛋白提取工艺的优化及生物活性研究[D];吉林农业大学;2011年
4 王玉霞;鸡骨肽制备及其ACE抑制活性研究[D];中国农业科学院;2011年
5 于志鹏;蛋清源ACE抑制肽的结构鉴定及稳定性研究[D];吉林大学;2011年
6 王硕;甘薯ACE抑制肽的制备及其降血压活性研究[D];中国农业科学院;2011年
7 张子健;干酪乳杆菌D400产ACE抑制肽的研究[D];河北农业大学;2010年
8 王前胜;ACE2基因表达增加对血管紧张素Ⅱ作用下人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡的影响[D];福建医科大学;2010年
9 郑三福;ACE2基因过度表达抑制大鼠平滑肌细胞AT1受体表达[D];福建医科大学;2011年
10 卢辉耀;ACE2基因转染对VSMC血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响[D];福建医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 曹丽;西地那非可治疗肺动脉高压[N];中国医药报;2004年
2 ;万艾可有望治疗肺动脉高压[N];医药经济报;2004年
3 许延庆 记者 韩雪;北方肺动脉高压峰会论坛举行[N];黑龙江日报;2010年
4 北京协和医院呼吸内科教授 陆慰萱 秦岭整理;肺动脉高压诊治五误区[N];健康报;2010年
5 本报记者 慕欣;《2010年中国肺动脉高压专家共识》将发布[N];医药经济报;2010年
6 麦容;安立生坦为肺动脉高压治疗提供新选择[N];中国医药报;2011年
7 伊遥 编译;肺动脉高压药物研发竞争激烈[N];中国医药报;2011年
8 伊遥;肺动脉高压药全球临床试验布局[N];医药经济报;2011年
9 记者 高新军;ACE研究开拓心血管病二级预防新领域[N];中国中医药报;2009年
10 高国起;提升ACE2活性可消退动脉硬化斑块[N];中国医药报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978