收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

抗gremlin 1单克隆抗体的制备和初步鉴定

张雪芳  
【摘要】:目的:制备抗gremlin1单克隆抗体并对其进行亲和力和特异性的初步鉴定。方法:采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,以紫外吸光光度法测定腹水单抗浓度,间接ELISA法测定腹水单抗效价,细胞免疫荧光法及Western blotting法鉴定单抗的亲和力和特异性。结果:本实验制备出7个单抗。腹水单抗浓度为13.7~37.7mg/ml。其中,1D4、1H5、1C9、1A4和1C4腹水的单抗效价均为1:3.2×104以上。经HEECs免疫荧光鉴定,七个单抗的荧光染色均分布于细胞胞质内,其中,1A4抗体的稀释倍数最高。Western blotting显示7个单抗均有位于47KDa左右的特异性条带出现,1A4条带最明显,但也有明显的非特异吸附条带。结论:本实验成功制备7株单抗,其中5株的腹水单抗效价可以满足亲和层析、ELISA等实验要求。7株抗体均与HEECs有较强的亲和力,具有特异性,且其中1A4株特异性最强,但7株抗体都存在非特异性吸附。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 钟述猷;由单克隆抗体确定的人类T淋巴细胞—新亚类的分离及其部分特征[J];国际免疫学杂志;1983年05期
2 陈善华;;用于诊断试验和亲和层析的单克隆抗体;抗体工程的初步阶段[J];国际生物制品学杂志;1983年03期
3 闫燕华;;分泌抗HTG(人甲状腺球蛋白)单克隆抗体的杂交瘤细胞系[J];现代免疫学;1985年03期
4 蒋性凡;周继文;黄翠英;任继明;杨守纯;;鼠单克隆抗HBc检测病人血清抗HBc应用的研究[J];现代免疫学;1985年03期
5 林漓;;用单克隆抗体成像法检测血管栓塞[J];国外医学情报;1985年02期
6 韩荣兴;人肝细胞癌单克隆抗体的制备及其应用[J];细胞与分子免疫学杂志;1986年04期
7 白炎;用单克隆抗体来研究T细胞受体结构及激活途径(文献综述)[J];军事医学科学院院刊;1986年01期
8 Berndt MC;杜晓平;Berndt C;阮长耿;;免疫沉淀法鉴定抗人血小板单克隆抗体识别的抗原[J];苏州大学学报(医学版);1986年03期
9 江庆平;;抗体结合氨甲喋呤试治肿瘤[J];国外医学情报;1986年14期
10 刘尔翔;李文渌;刘宝丰;樊汝恭;毛映红;;三株抗恶性疟单克隆抗体(M26-32,F5-3F9,F5-4E9)的鉴定[J];生物工程学报;1986年01期
11 樊代明,张学庸,陈希陶,牟震先,胡家露,乔太东,陈宝军;抗胃癌人、鼠单克隆抗体系列的研制及其临床应用的综合研究[J];细胞与分子免疫学杂志;1987年03期
12 吴勤学;;用单克隆抗体免疫试验对麻风病人及对照者进行血清学检测[J];国际皮肤性病学杂志;1987年01期
13 张礼璧,安洪秋,曹桂如,江永珍,周桂珍;巨细胞病毒单克隆抗体的建立和应用[J];病毒学报;1988年01期
14 李正东;;抗寄生虫抗原的单克隆抗体:一种只需少量虫体的快捷免疫途径[J];国际医学寄生虫病杂志;1988年06期
15 韩瑛;;简便、快速的羟基磷灰石层析法从细胞上清液和腹水中提纯单克隆抗体[J];国际生物制品学杂志;1988年03期
16 ;抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39特异性及其识别抗原的初步鉴定[J];苏州大学学报(医学版);1988年04期
17 张晓宇;心钠素单克隆抗体的制备及鉴定(摘要)[J];解放军医学杂志;1989年02期
18 邱钢,方明玉,邹明发,吴安然;高度敏感与特异的微量固相放射免疫分析法检测人IgE[J];中国免疫学杂志;1989年06期
19 魏燕玲;张意仲;黄上媛;;应用单克隆抗体平板免疫溶血法检测大肠杆菌不耐热肠毒素[J];检验医学;1989年02期
20 余帼华;;抗T细胞单克隆抗体可阻止肿瘤生长[J];国际生物制品学杂志;1989年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 魏莹;盖新娜;贾红;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
2 徐爽;徐焱;;单克隆抗体在输血领域的应用探讨[A];中国输血1999年年会暨纪念ABO血型发现100周年学术交流论文专辑[C];1999年
3 李安民;;单克隆抗体标载的~(131)I治疗恶性脑胶质瘤Ⅱ期临床试验的三种给药途径的研究[A];第一届中国肿瘤靶向治疗技术大会论文集[C];2003年
4 于翠;施曼铃;王桂珍;吴建祥;周雪平;;几种重要植物病毒单克隆抗体的制备和快速检测方法的建立[A];第三次全国植物病毒和病毒防治学术研讨会论文集[C];2003年
5 刘振勇;邓国华;李呈军;张立春;田国彬;何后军;于康震;陈化兰;;抗禽流感H9N2亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备与分析[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
6 李振宇;赵益明;董宁征;沈飞;阮长耿;;抗FⅧ-C2区单克隆抗体的制备及鉴定[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
7 张改连;黄烽;;抗CD20人鼠嵌合单克隆抗体rituximab治疗类风湿关节炎的临床研究[A];第十二届全国风湿病学学术会议论文集[C];2007年
8 郝波;张国新;林艳;杨杨;王宏娣;;抗HCCR单克隆抗体的制备及其在肝癌检测中的初步应用[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
9 陶薇;杨连华;何卓晶;洪艳;陈勇;;抗戊型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和鉴定[A];浙江省医学会医学微生物与免疫学及医学病毒学学术年会论文汇编[C];2009年
10 马翠卿;郭奕阳;顾海燕;曾瑞红;杨丽娟;魏林;;一株抗A族链球菌表面蛋白Fba的单克隆抗体对应的表位与Fba结合调节蛋白FH的位点重叠[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张雪芳;抗gremlin 1单克隆抗体的制备和初步鉴定[D];北京协和医学院;2010年
2 唐琳;肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究[D];重庆医科大学;2005年
3 侯桂华;巨噬细胞移动抑制因子在同种移植排斥中作用及其机理的研究[D];山东大学;2004年
4 高勇;新型单克隆抗体荧光探针染料的合成及免疫荧光组织化学应用[D];西北大学;2006年
5 江敏;大鼠单克隆抗体的制备、鉴定、基因克隆、抗原分析以及药物偶联物的抗肿瘤作用研究[D];中国协和医科大学;1996年
6 秦迎松;人促血液血管细胞生成素(Haemangiopoietin, HAPO)单克隆抗体的制备、鉴定及应用[D];中国协和医科大学;2004年
7 万忠海;抗PEA单抗和单链抗体制备及在绿脓感染中的应用[D];吉林大学;2008年
8 吕大伟;抗RANKL单克隆抗体在大鼠类风湿性关节炎模型中的应用及RANKL转录调控的探索性研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
9 庄国洪;抗DR4、DR5单克隆抗体诱导胶质瘤细胞株凋亡的研究[D];吉林大学;2004年
10 付建芳;溶藻弧菌抗独特型抗体基因工程疫苗的研究[D];第四军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄子逸;LIGHT基因转染细胞株和单克隆抗体的研制及其对T细胞的共刺激效应[D];苏州大学;2010年
2 李铁民;抗P-选择素单克隆抗体对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的作用实验研究[D];中国医科大学;2003年
3 李晓龙;肝癌相关抗原SMP30 mRNA在癌细胞中的表达及其单克隆抗体的制备[D];广西医科大学;2010年
4 郑杰;分泌抗猪流感病毒(河南株)单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备、鉴定和初步应用[D];河南农业大学;2004年
5 邵炜慧;盐酸克伦特罗单克隆抗体的研制及初步应用[D];扬州大学;2005年
6 杨宁;纳豆激酶的纯化及其单克隆抗体的制备鉴定[D];山西农业大学;2005年
7 唐琦;抗麻痹性贝毒素GTX2,3单克隆抗体的制备及特性分析[D];暨南大学;2005年
8 贾娟娟;抗胰岛素单克隆抗体的研制及酶联免疫分析方法的建立[D];中国原子能科学研究院;2005年
9 李彬;TLR4单克隆抗体诱导同种心脏移植免疫耐受的研究[D];苏州大学;2010年
10 王雨晨;伏马毒素B_1单克隆抗体的制备及多种免疫学检测方法的建立[D];上海交通大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 贾超时李德成;单克隆抗体产业研发项目将落户大庆[N];大庆日报;2008年
2 小许;市领导会见美国生物医药巨头[N];无锡日报;2010年
3 姜海;英科学家发现单克隆抗体[N];科技日报;2007年
4 本报特约撰稿人 李朝;单抗:生物医药发展的主旋律[N];医药经济报;2006年
5 记者 项铮;赛诺菲巴斯德研制抗狂犬病单克隆抗体[N];科技日报;2008年
6 记者 杨俊坚;单抗药物:站在同一起跑线[N];医药经济报;2011年
7 张蕾;治疗用单克隆抗体[N];光明日报;2002年
8 李晓;“苏州系列”单克隆抗体走向世界[N];苏州日报;2008年
9 张骁束;梅英;单克隆抗体的研究进展[N];中国医药报;2003年
10 邹平;单克隆抗体研究取得突破[N];医药经济报;2001年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978