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改性PBT平板膜对血浆蛋白吸附及血小板、白细胞黏附的初步研究

黄晓倩  
【摘要】:背景蛋白与材料表面的相互作用一直是生物相容性领域研究的重点之一。当材料表面与含有可溶性蛋白的液体(血液,组织液等)接触时,首先是蛋白质迅速的吸附在材料表面,其次才是细胞。细胞与吸附在材料表面的蛋白分子层相互作用,而不是与材料直接接触。因而,在一定程度上调整蛋白质层在生物材料表面的吸附状态,可以调控细胞与吸附蛋白质层的特异性相互作用等一系列信号转导,来决定细胞的生物应答。因此,控制材料表面吸附蛋白的数量,类型,以及蛋白质的方向,构象和排布方式从而控制细胞应答成为重要研究方向。 目的制备具有不同官能团(-CH3、-COOH、-OH、两性基团)的聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)平板膜,并初步研究其对血浆蛋白吸附情况,及其对白细胞(WBC)、血小板(PLT)的黏附效果。 方法(1)利用紫外改性的方法,将不同单体接枝到PBT表面得到PBT-AA(-COOH)、 PBT-HEMA (-OH)、PBT-SMDB (两性基团)并进行表征。(2)采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定四种材料吸附的HSA、Fgn含量的差异,且不同接枝率是否对蛋白含量有影响。(3)利用SEM观察四种材料在分别吸附HSA和Fgn前后,黏附白细胞、血小板的数量变化。(4)利用AFM力曲线测量蛋白材料间相互作用。结果(1)四种材料的亲水性排名顺序为:PBT-HEMAPBT-SMDBPBT-AAPBT。 (2)PBT-AA的人血清白蛋白(HSA)吸附量远高于其余三者(p0.05);PBT和PBT-AA的纤维蛋白原(Fgn)吸附量高于PBT-HEMA和PBT-SMDB(P0.05)。(3)四种材料在吸附蛋白前后,白细胞和血小板的黏附量发生显著变化,其中吸附Fgn后,两种细胞量均明显增加,而吸附HSA后白细胞量明显减少。(4)Fgn只对PBT有特异性吸附;HSA对四种材料没有特异性吸附。 结论HSA对四种材料没有特异性吸附;Fgn则倾向于吸附疏水性表面。Fgn对两种细胞的黏附均有促进作用,而HSA对白细胞的黏附有一定抑制性。HSA对血细胞的影响可能主要由其吸附在材料表面的构象决定,而不是其吸附数量。


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