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康复新液治疗溃疡性结肠炎小鼠模型的疗效观察及机制初探

张春林  
【摘要】:研究背景:溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)是一种病因不明的慢性非特异性结肠炎,大部分学者认为,其发病是由多因素相互作用所致,遗传、免疫、环境、感染、肠道微生物等参与了溃疡性结肠炎的发病。目前临床治疗以激素、水杨酸制剂和免疫抑制剂为主,但疗效不够满意,且长期应用有较多的不良反应。我国的中医认为溃疡性结肠炎是因脾虚湿盛引起,治疗以健脾祛湿为主,实践中的一些中药在治疗溃疡性结肠炎方面取得了一定的疗效。例如近年来中药康复新液在临床上治疗溃疡性结肠炎取得了比较满意的疗效,但其作用机制尚不清楚。本研究通过观察康复新液对葡聚糖硫酸钠(dextransulfat-sodium, DSS)诱导构建的小鼠溃疡性结肠炎模型炎症损伤的治疗疗效,并分析小鼠模型的疾病活动指数(disease activity index, DAI)、结肠组织大体评分及病理评分,并通过ELISA检测结肠组织中的IL-1β、IL-4, TNF-α, INF-Τ NF-k B等重要炎性因子的表达。目的:探讨康复新液对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型的治疗疗效及可能机制。方法:选用SPF级雄性C57小鼠70只,鼠龄7周龄,体重18-23g。采用随机数字表法将70只小鼠随机分成6组。正常对照组不予处理,其余的先自由饮用3.5%葡聚糖硫酸钠(dextransulfatsodium, DSS)5天诱导构建小鼠溃疡性结肠炎模型后,分别分成模型对照组、康复新液治疗组、高浓度康复新液治疗组、复方黄柏液治疗组、5-ASA治疗组.模型对照组自由饮用蒸馏水;康复新液组与高浓度康复新液组再各分成3小组,分别给予灌胃、灌胃+灌肠、灌肠处理;复方黄柏液组与5-ASA组分别灌肠处理,均连续治疗8天,8天后处死。每天记录小鼠疾病活动指数(DAI),处死后评估结肠大体评分,并取结肠组织进行病理评分;并采用ELISA检测结肠组织中的IL-1β、 IL-4、 TNF-α、 INFy、 NF-K B等重要炎性因子的表达。实验结果:1、DSS结肠炎小鼠模型DAI评分、结肠大体评分、结肠组织学评分均较空白组明显升高(P0.05);炎性因子IL-1β、 TNF-α、 INFΥ-NF-K B表达均较较空白组明显升高(P0.05);炎性因子IL-4较空白组明显下降(P0.05)。2、DAI评分:康复新灌胃+灌肠组、康复新灌肠组、高浓度康复新灌胃+灌肠组、高浓度康复新灌肠组、复方黄柏液组、5-ASA组均较模型组显著下降(P0.01);康复新灌胃+灌肠组、康复新灌肠组较康复新灌胃组明显下降(P0.05);高浓度康复新灌胃+灌肠组、高浓度康复新灌肠组较灌胃组明显下降(P0.05);康复新液灌肠组与复方黄柏液组、5-ASA组比较无明显统计学差异;结肠大体评分:康复新灌肠组较模型组显著下降(P0.01),康复新灌肠+灌胃组、5-ASA组较模型组明显下降(P0.05);康复新液灌肠组较灌胃组明显下降(P0.05);康复新灌肠组优于高浓度康复新灌肠组及复方黄柏液组(P0.05),与5-ASA组无统计学差异;结肠组织学评分:康复新灌肠组、高浓度康复新灌肠组、复方黄柏液组、5-ASA组较模型组显著下降(P0.05);康复新灌肠组较灌胃组显著下降(P0.05);高浓度康复新灌肠组较高浓度灌胃组显著下降(P0.05);康复新灌肠组与复方黄柏液组、5-ASA组比较无统计学差异;3、IFN-Y:康复新灌胃+灌肠组、康复新灌肠组、高浓度康复新灌胃+灌肠组、高浓度灌肠组、复方黄柏液组及5-ASA组与对照组比较显著下降(P0.01);康复新灌肠组较灌胃组明显下降(P0.05);高浓度康复新灌肠组较灌胃组明显下降(P0.05);康复新液灌肠组与复方黄柏液、5-ASA组无统计学差异;IL-Ip:结果同IFN-Υ;TNF-α:康复新灌胃+灌肠组、康复新灌肠组、高浓度康复新灌胃+灌肠组、高浓度康复新灌肠组、黄柏液组及5-ASA组与对照组比较显著下降(P0.05),康复新灌胃+灌肠组、康复新灌肠组较灌胃组明显下降(P0.05),高浓度康复新灌胃+灌肠组、高浓度康复新灌肠组较灌胃组明显下降(P0.05);康复新灌肠优于复方黄柏液组、与5-ASA组无统计学差异。NF-K B:康复新灌胃+灌肠组、康复新灌肠组、黄柏液组及5-ASA组与对照组比较显著下降(P0.05),康复新灌肠优于灌胃(P0.05),与复方黄柏液组及5-ASA组比较无统计学差异;IL-4-康复新灌肠、高浓度康复新液灌肠与对照组、康复新灌胃组、高浓度康复新灌胃组、复方黄柏液组、5-ASA组比较明显升高(P0.05)。结论:1、从DAI评分、大体评分、组织病理学评分等各方面评价,康复新液灌肠及高浓度康复新灌肠液均可以使结肠炎明显减轻,与5-ASA效果相近,且灌肠治疗优于灌胃治疗。康复新液灌肠优于高浓度康复新液灌肠。大体评分康复新液灌肠组优于复方黄柏液组。2、康复新对结肠炎的作用机制与抑制肠道异常炎症反应、下调NF-K B.IL-1β TNF-α. INF-Υ水平,上调IL-4水平,从而抑制Thl介导的炎症反应,对Th2介导的炎症反应作用不明显。


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