收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

DNA调节片段及其结合蛋白的筛选与鉴定

张伸  
【摘要】:一切生命现象,实际上都是机体产生的一系列复杂的信息传递和调控的过程。细胞水平的信息传递和调控是细胞各种行为的基础。从第一信使细胞外信号、第二信使、第三信使转录调节因子到靶基因,蛋白质之间的相互作用,蛋白质与基因调控序列之间的相互作用,通过编码DNA结合蛋白质的基因的表达,形成的基因调控信息传递网络,是细胞立体网络的一个核心部分。细胞的整体功能即是在基因调控信息传递网络的调控下,维持细胞内整个立体网络的稳定状态,并按照既定的内在程序分化、发育,或改进自身的结构以适应于环境。 疾病的形成与整个基因调控信息传递网络有关,要对基因调控信息传递网络和细胞行为有深入透彻的认识,首先要明确细胞内所有的基因,即基因组。基因组的研究对细胞内所有基因的克隆、鉴定起到巨大的推动作用。功能基因组研究主要包括以下各个部分:基因组、转录组、蛋白质组和代谢组等。功能基因组对细胞内的所有分子及它们之间的相互作用进行解析:确定出每一个功能单元的反应模式,浓度变化规律;确定出它们之间所有的相互作用和反应。即确定细胞立体网络中所有的结点和网络联系,得到网络的基本结构,作为理解和重建细胞功能的基础。 DNA与蛋白质之间的相互作用是构成基因调控信息传递网络的基础之一。通过DNA与蛋白质的相互作用,细胞基因组上的基因实现有序、协调表达,使细胞表现出有秩序和自组织的行为,如细胞的分裂与增殖,细胞的分化与凋亡,和个体有序的发育过程。已有的研究表明,反式作用因子与相应的DNA顺式作用元件的结合是染色质重塑和基因转录调节的基础。所以,筛选、鉴定DNA调节元件和DNA结合蛋白质,对研究基因调控信息传递网络和揭示基因表达调节和基因组自身组织规律是很有必要的。 现有的研究方法难以大量筛选、鉴定DNA调节元件,它们在筛选DNA调节片段时,或者效率不高,不能快速、大量筛选基因组中的DNA调节片段,或者需要纯化的转录因子和抗体,只能分离与已知蛋白质结合的DNA片段。另外,由于转录调节因子在细胞中的表达水平很低,利用常规的纯化方法很难获得足以进行氨基酸序列分析或抗体制备的纯化蛋白质,目前已克隆的转录因子不多,对这些因子的表达模式和DNA-蛋白质相互作用规律尚缺乏足够的研究。因此,当前转录


知网文化
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978