收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

户尘螨过敏原实验研究

孙劲旅  
【摘要】:尘螨是最重要吸入物过敏原之一,尘螨过敏反应的发病率不断增加,日益受到人们重视。尘螨过敏可表现为过敏性鼻炎、过敏性哮喘和过敏性皮肤疾患。尘螨的过敏反应可发生在各个年龄阶段,并且在婴幼儿过敏性哮喘中尘螨是最主要的过敏原。因此,有关尘螨的研究一直是变态反应学科的研究热点。 目前,国内培养的螨多为混合螨,为保证本研究的可靠性和重复性必须应用高纯度的户尘螨螨体原料。本研究纯种户尘螨螨体购自于Allergon公司,采用Coca’s液、裂解液及Trizol法提取纯种户尘螨螨体蛋白后,在蛋白质的回收率方面进行比较,结果为:C_0:C_1:L:T=5.7:6.3:9:8;即回收率:裂解液>Trizol法>Coc a’s液。在蛋白质浓度检测方法中,本研究率先使用了二喹啉甲酸(BCA)法检测蛋白浓度取得了较好结果。 应用Coc a’s液、裂解液及Trizol法提取纯种户尘螨螨体蛋白后,经过双向电泳,实验结果为:Coca’s液提取的蛋白仅仅有少量低分子量的蛋白点:用裂解液提取的蛋白可见明显增多低分子量的蛋白点,但无中分子量的蛋白点;Trizol法提取的蛋白可见中分子量的蛋白点如174-178Kd和133.0Kd的蛋白质。结合蛋白质浓度测定我们发现:使用Coca’s液提取的尘螨蛋白质浓度低,蛋白点少。使用裂解液提取的尘螨蛋白质浓度虽然较高,但是没有中分子量的蛋白点,不能全面反映尘螨的过敏原。使用Trizol法提取的蛋白质浓度中等,有中分子量蛋白点,反映的蛋白点更加全面。 纯种户尘螨螨体经Trizol液提取后进行双向电泳,在考染和银染时出现6个特征性的蛋白点,二个为位置彼此孤立的酸性蛋白,其中一个酸性蛋白(2D31点)的等电点(pI)和分子量(MW)(以下pI和MW表示方法相同)分别为4.4和133.0Kd;另一个为(2D161点)4.81和35.4Kd。另有4个位置彼此非常接近的中性蛋白,分别为(2D107点)7.2和49.5Kd、(2D 116点)7.2和46.4Kd、(2D105点)6.9和50.2Kd、(2D 114点)6.9和47.0Kd。并且,在十二次的双向电泳中均发现这6个位置和形态独特的蛋白点,这些特征性的蛋白点可能为此种纯种户尘螨螨体在双向电泳时比较特征性的图谱,作为一种双向电泳的指纹图谱,在鉴定


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前17条
1 孙劲旅,张宏誉,应万涛,王京兰,钱小红;利用双向电泳比较3种提取户尘螨蛋白的方法[J];基础医学与临床;2004年03期
2 熊邦书;陈乐平;欧巧凤;张超;;基于分层策略的凝胶图像间蛋白点匹配算法[J];中国生物医学工程学报;2012年03期
3 夏晓斌;熊邦书;孙成立;贺锋;;基于特征点的凝胶图像蛋白点匹配算法[J];南昌航空大学学报(自然科学版);2011年01期
4 李慧玉,董京祥,姜静;樟子松突变丛生枝蛋白质的双向电泳分析[J];生物技术;2004年01期
5 李圣青;赵峰;戚好文;张晓君;赵馨;潘刚;吴哲;王宇;阙海萍;刘少君;;肺组织灌注前后双向电泳的比较[J];西安交通大学学报(医学版);2006年02期
6 刘小青;朱力;胡威;商娜;冯尔玲;魏华;王恒樑;;蛋白负染方法在蛋白质组学中的应用评价[J];微生物学通报;2010年07期
7 段瑞军;符少萍;王静;郭建春;胡新文;张鹏;李瑞梅;;木薯非胚性与胚性组织蛋白质双向电泳差异初步分析[J];热带作物学报;2011年04期
8 吴双;开妍;王晓泉;胡顺林;刘秀梵;;新城疫病毒感染细胞的双向凝胶电泳方法建立及其初步分析[J];中国家禽;2010年10期
9 杨传平,姜静,梁艳,刘桂丰,王大海,李慧玉;白桦雄花序发育初期蛋白质的双向电泳图谱分析[J];东北林业大学学报;2004年01期
10 高峰;程豪为;崔新征;郭亮;杜英;张清勇;;增生型胸腺组织重症肌无力相关蛋白的鉴定研究[J];中国实用神经疾病杂志;2006年06期
11 王洁,童建;双向电泳法测定辐照前后大鼠淋巴细胞蛋白质组的改变[J];苏州大学学报(医学版);2004年03期
12 蒋宁;周文霞;张永祥;张学敏;王杰;刘炳玉;;快速老化模型小鼠血清蛋白质组学分析比较[J];高等学校化学学报;2006年08期
13 王晓楠;付连双;李卓夫;李文滨;孙艳丽;刘灿;王金伟;陈禹兴;;低温下东农冬麦1号地下茎处差异蛋白的分析[J];麦类作物学报;2009年03期
14 董雷;蒋宁;周文霞;张永祥;耿淼;张学敏;刘炳玉;王杰;;快速老化模型小鼠海马蛋白质组学初步研究[J];高等学校化学学报;2007年02期
15 何冰;刘广伟;曹蕾;余源;陈阳;田喜凤;杨志宏;卢思奇;赵永强;;质谱技术鉴定体外蓝氏贾第鞭毛虫的细胞骨架蛋白[J];中国病原生物学杂志;2010年12期
16 冯昕;孙浩;王吉中;何培新;;盐胁迫条件下蒲公英叶片蛋白的双向电泳及其图谱分析[J];食品科技;2013年05期
17 侯勇;赵萍;邹勇;钟晓武;夏庆友;;家蚕5龄第3天血液蛋白的双向电泳及质谱分析[J];蚕业科学;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前15条
1 李建科;冯毛;张兰;张朝晖;潘映红;;蜂王浆中蜂王浆蛋白随储存条件变化的蛋白质组研究(英文)[A];2000—2018中国蜂业科技前沿[C];2019年
2 姜静;李慧玉;董京祥;;樟子松突变丛生枝蛋白质的双向电泳分析[A];2004中国科协学术年会第十一分会场论文集[C];2004年
3 姜静;李慧玉;董京祥;;樟子松突变丛生枝蛋白质的双向电泳分析[A];中国林学会2004年年会论文集[C];2004年
4 孙劲旅;张宏誉;应万涛;王京兰;钱小红;;利用双向电泳比较不同方法提取户尘螨蛋白的效果[A];中华医学会第二次全国变态反应学术会议论文汇编[C];2004年
5 王慧娜;张卫东;高庆荣;高建华;李骞骞;姜晓丽;;小麦籽粒代谢蛋白不同提取方法在双向电泳中的分离效果比较研究[A];中国作物学会2013年学术年会论文摘要集[C];2013年
6 赵芹;谢大森;何晓明;罗少波;彭庆务;;节瓜与枯萎病菌互作的差异蛋白组学分析[A];中国园艺学会2014年学术年会论文摘要集[C];2014年
7 侯晓军;郑惠民;丁素菊;吴涛;邓本强;;肌萎缩侧索硬化症患者骨骼肌蛋白质组学初步研究[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
8 冯德芹;杨礼富;卢伟东;张博;杨苏声;;达坂喜盐芽孢杆菌(Halobacillus dabanensis)D-8~T在不同盐浓度下生长的蛋白质组学比较分析[A];中国蛋白质组学第三届学术大会论文摘要[C];2005年
9 钟杨生;徐秋云;林健荣;王叶元;范兰芬;;高温干燥对家蚕胚胎发育影响的蛋白质表达谱分析[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)[C];2009年
10 汪金平;杨天府;;成人骨折合并重症脑外伤的血清比较蛋白质组学研究[A];第20届中国康协肢残康复学术年会论文选集[C];2011年
11 程露阳;杨松鹤;冯佩明;乔跃兵;;脑室内注射瘦素对OEP大鼠子宫腔液的蛋白质组研究[A];第九届全国免疫学学术大会论文集[C];2014年
12 孙立伟;雷秀娟;麻锐;陈佳庆;姜锐;赵大庆;;梯度胶对人参蛋白双向电泳分离效果的影响[A];中国光学学会2010年光学大会论文集[C];2010年
13 沈凡瑞;张文蔚;简桂良;;棉花叶片双向电泳体系的建立[A];“创新驱动与现代植保”——中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会论文集[C];2013年
14 练惠辉;李文岗;韩鹏;邱乒乒;戴燕燕;陈清西;;比较蛋白组学在胆管癌血清中的应用[A];中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第八次学术研讨会论文集[C];2008年
15 张宁;霍望;陈锋;崔党群;;小麦种子发育中后期蛋白组学研究[A];第六届全国小麦基因组学及分子育种大会论文集[C];2015年
中国博士学位论文全文数据库 前20条
1 孙劲旅;户尘螨过敏原实验研究[D];中国协和医科大学;2002年
2 陈爱军;皮肤老化过程中角质形成细胞比较蛋白质组分析与鉴定[D];重庆医科大学;2009年
3 易发平;小鼠骨髓DC 2-DE技术体系建立及其蛋白质表达分析[D];重庆医科大学;2006年
4 冯德芹;革兰氏阳性中度嗜盐菌响应渗透胁迫的差异蛋白质组学研究[D];中国农业大学;2005年
5 盖英萍;棉花、烟草响应低温胁迫的差异蛋白质组学研究[D];山东农业大学;2008年
6 袁拥华;抗肿瘤新药德氮吡格的蛋白质组学研究[D];重庆医科大学;2007年
7 侯勇;家蚕丝腺、血液、脂肪体蛋白质双向电泳及质谱分析[D];西南大学;2007年
8 李杰;小麦白粉病引致的叶片与籽粒差异表达蛋白分析[D];河南农业大学;2017年
9 李治国;糖尿病肾病肾小球硬化机制的比较蛋白质组学研究[D];中国协和医科大学;2009年
10 姜寿峰;蛋白质组学在多发性硬化与视神经脊髓炎血清和脑脊液中的研究[D];浙江大学;2011年
11 张宁;小麦种子不同发育阶段和逆境胁迫相关蛋白的挖掘[D];河南农业大学;2016年
12 康俊梅;低温胁迫下野牛草生理生化响应及蛋白质组学研究[D];中国农业科学院;2008年
13 吴永平;传染性法氏囊病毒感染鸡靶器官的比较蛋白质组研究[D];浙江大学;2009年
14 赛里默;水稻幼苗响应高浓度二氧化碳的差异蛋白质组学研究[D];清华大学;2008年
15 孟秀梅;正常增龄与AD患者额叶脑组织的比较蛋白质组学研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
16 孙嘉曼;人参锈腐病化学诱导抗性机制及其病原菌分子检测技术研究[D];沈阳农业大学;2013年
17 李开拓;荔枝果实成熟过程中的差异蛋白质组学研究[D];福建农林大学;2011年
18 王艳;苹果实生树不同个体发育阶段蛋白质磷酸化差异修饰的研究[D];中国农业大学;2014年
19 席景会;低温胁迫下拟南芥差异蛋白质组学研究[D];吉林大学;2007年
20 麦永湛;基于转录组学和蛋白组学技术对刺激隐核虫抗原的分析[D];中山大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前20条
1 张明;凝胶图像蛋白点分割算法研究[D];山东师范大学;2017年
2 张郝东;凝胶图像的蛋白点特征分析及多特征协同匹配[D];南昌航空大学;2015年
3 陈乐平;二维凝胶电泳图像蛋白点匹配方法研究[D];南昌航空大学;2012年
4 陈洋;氨甲喋呤对映体对急性淋巴细胞白血病细胞株的体外诱导蛋白表达差异的研究[D];安徽医科大学;2015年
5 刘琳琳;小菜蛾取食诱导拟南芥的差异蛋白分析[D];吉林大学;2009年
6 韩伟东;奶牛X、Y精子比较蛋白质组学的条件优化及初步研究[D];甘肃农业大学;2009年
7 高峰;重症肌无力胸腺组织相关蛋白鉴定研究[D];郑州大学;2005年
8 郭丽茹;致肾盂肾炎大肠杆菌132的比较蛋白质组学研究[D];天津医科大学;2009年
9 黄继昆;基于区域SIFT特征的蛋白点匹配方法研究[D];南昌航空大学;2014年
10 葛君;有机磷农药诱导后家蚕脂肪体特征蛋白及其基因的表达分析[D];苏州大学;2010年
11 王滔;亚洲玉米螟越冬幼虫滞育相关蛋白分析[D];吉林大学;2013年
12 惠菲;盐胁迫下甜菜蛋白质含量测定及特异蛋白的分离与鉴定[D];黑龙江大学;2012年
13 梁书剑;空间飞行诱导水稻种子产生蛋白质差异表达的特点和规律[D];哈尔滨工业大学;2008年
14 谢红丽;毛白杨剥皮再生过程中蛋白质的表达分析及差异蛋白的肽质量指纹鉴定[D];中国农业大学;2003年
15 沈静;野牛草响应低温胁迫的生理机制和蛋白质组学初步研究[D];甘肃农业大学;2010年
16 李成斌;桃‘豫矮砧1号’矮化机理的差异蛋白质组学研究[D];河南农业大学;2009年
17 张佳慧;长江三角洲白山羊优质笔料毛性状差异蛋白质组学研究[D];扬州大学;2014年
18 丁鹏;不同盐度胁迫下绿竹差异蛋白质组学研究[D];福建农林大学;2015年
19 周雪梅;橡胶树死皮相关蛋白的鉴定与分析[D];海南大学;2013年
20 蔡金挺;玉米幼苗根系在碳酸钠胁迫下的差异蛋白质组学分析[D];东北师范大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978