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Ⅰ. 毛细管电色谱新技术的研究及应用 Ⅱ. 一些常用中草药中主要有效成分在大鼠体内的代谢研究

张金兰  
【摘要】:毛细管电色谱(Capillary Electrochromatography,CEC)是一种兴起于90年代的新型分离分析技术,其将液相色谱(HPLC)的多选择性与毛细管电泳(CE)的高效相结合。有关毛细管电色谱柱的制备及不同类型毛细管电色谱柱对中性及极性化合物保留机制的研究,以及柱效理论研究一直是该领域的研究热点,在分析测试协会基金的资助下,我们进行了以下几方面的研究工作。 1、采用抽真空与加压相结合的方法,不需特殊设备成功地制备了100μm内径的反相电色谱柱,柱效高达10万/米,以硫脲及三种芳香中性化合物考察了柱效及保留时间的重现性,保留时间RSD小于2.2%,柱效RSD小于7.5%。结果表明我们实验室自制的毛细管电色谱柱可以满足我们的实验要求。 2、在毛细管电色谱中,EOF是分离驱动力,我们在自制的反相C_8及C_(18)电色谱柱上采用磷酸盐体系及Tris-HCl缓冲体系研究了缓冲液浓度、乙腈比例及柱温对电渗流的影响。研究表明在一定电压范围内,随着电压的升高,EOF呈线性增加,缓冲液浓度越低,线性范围越宽。乙腈比例对EOF影响非常大,随乙腈比例增加,EOF增加,表明洗脱能力增加,其他条件对EOF影响不是很明显,所有上述实验条件对C_8及C_(18)反相电色谱柱EOF的影响趋势基本一致。Tris体系中由于其离子强度低,电压及浓度对EOF的影响与磷酸盐体系相比不明显。 3、尽管毛细管电色谱已用于中性化合物的分离分析,但分离机制并未完全阐明。我们采用磷酸盐缓冲体系及Tris-HCl缓冲体系研究了缓冲液浓度,乙腈比例及柱温对四种芳香中性化合物在C_8及C_(18)反相电色谱柱上的保留行为,研究表明乙腈比例对中性化合物的容量因子影响最为明显,乙腈比例增加,提高洗脱能力,其它实验条件对中性化合物容量因子的影响并不十分明显。在Tris体系中,由于离子强度低,电压及浓度对中性化合物的容量因子的影响程度弱于磷酸盐体系,在毛细管电色谱中Tris体系为比较理想的体系,中性化合物在C_8及C_(18)反相电色谱柱上的保留机制同反相HPLC柱对中性化合物的保留机制基本一致。这些研究结果为今后实验条件的优化提供了依据。 4、在自制反相电色谱柱上,对4种苯二氮(艹卓)类药物的保留行为进行了研究。采用Tris体系在自制反相C_(18)柱及电动填充C_8柱上,考察了电压、缓冲液浓度、乙腈比例、柱温、pH对4种苯二氮(艹卓)类药物保留行为的影响。采用乙腈-水体系研究了HPLC-C_(18)柱对4种苯二氮(艹卓)类药物的保留行为,并与C_(18)电色谱柱结果进行比较,结果表明不论在C_(18)还是C_8柱上,乙腈比例对4种药物的保留行为


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