1. 扩张皮肤生物学转归的实验研究及临床观察 2. 三维表面取模后转换成二维平面测量扩张皮肤面积

【摘要】：皮肤软组织扩张术在整形外科的应用越来越广泛，已成为整形外科的重要治疗手段，有关的基础理论研究也日益完善。但目前的研究主要集中在扩张后的变化上，对于有关手术效果的远期变化则研究较少。本课题的目的在于通过动物实验和临床观察，研究扩张皮肤移植后的转归变化，对其变化规律及机制进行探讨，为进一步提高临床疗效提供理论依据。 一．实验研究 〔方法〕、选用8只普通成年狗(雌雄不限)，平均体重14.5kg。在每只狗背部设计四个解剖部位相对应的皮瓣(7cm×10cm大小)，于每个皮瓣下都置入150ml矩形扩张器一个，并在头、尾侧各选取一个皮瓣作为对照，不予扩张。注水8周后行扩张器取出术，扩张组：在皮瓣远端切取标本后形成和基底大小一致的皮瓣原位移植；对照组：一侧切取标本后直接缝合，另一侧同样形成蒂位于腹侧的皮瓣原位缝合，以作远期观察。沿各组皮瓣边缘文身并取样。以后随机将8只狗分为四组，每组两只，分别在皮瓣移植后3周、6周、3个月、6个月将狗处死，描记皮瓣大小并取样，以测算皮瓣面积变化。然后在实验部位取材，进行以下检查：(1)组织学检查：H．E染色，光镜下观察表皮、真皮、包膜变化，并测量表皮、真皮厚度；(2)电镜检查：观察皮肤各层的超微结构变化及细胞生物学变化；(3)免疫组化检查：通过标定细胞骨架蛋白(α-SM actin)，观察其不同阶段的表达，了解皮肤内肌成纤维细胞的分化、凋亡情况；(4)生物力学检查：取1cm×4cm大小的皮肤四块，修剪去包膜及肉膜，在Instron材料实验机上分别进行应力-应变、应力松弛、极限抗拉强度测定；(5)胶原含量测定：测定100mg干组织中羟脯氨酸含量，反映皮肤胶原含量的变化。 〔结果〕(1)扩张皮肤于移植后有一定程度的回缩(约10％)，3个月后基本稳定；(2)表皮层于扩张后明显增厚(P＜0.05)，移植后6个月恢复正常；真皮层于扩张后明显变薄(P＜0.05)，移植半年后基本恢复；扩张包膜于6个月后吸收。(3)电镜下可见扩张后表皮细胞排列紧密，基底细胞及棘细胞胞浆中含有大量的张力丝，移植后3个月恢复。真皮层于扩张后可见大量的胶原纤维束，粗细不等，排列紊乱，密度无变化。成纤维细胞数量较多，功能活跃，真皮深层有肌成纤维细胞存在，其胞浆内微丝明显。移植后3个月成纤维细胞功能恢复正常，胶原排列趋于整齐，肌成纤维细胞消失。扩张后包膜内含有大量的胶原纤维和功能活跃的成纤维细胞，肌成纤维细胞常见，移植后3周肌成纤维细胞数量更多，3个月后消失。(4)免疫组化染色发现：扩张皮肤内除了血管外，一些成纤维细胞也被染成棕色，说明已分化为肌成纤维细胞，包膜中成纤维细胞染色明显。移植后3个月，皮肤和基底组织内除了血管外，未再发现有成纤维细胞染色现象。(5)生物力学检查显示，扩张后皮肤的粘弹性及强度均下降，前者于移植后半年恢复，后者恢复较慢，移植后6个月仍未完全恢复。(6)皮肤胶原含量于扩张后略低于对照组及正常皮肤(P＞0.05)，移植后恢复过程中也无明显变化。