Evi-1和MDS1-Evi-1基因在骨髓增生异常综合征发病机制中作用的研究

【摘要】：Evi-1(ecotropic virus integration site-1)基因定位于染色体3q26，在逆转录病毒诱发的小鼠急性髓系白血病(AML)中，是病毒常见的插入位点。MDS1基因最初在骨髓增生异常综合征(MDS)中发现，又称MDS相关基因(MDS-associated gene)，位于Evi-1基因上游170～400kb处。通过可变性剪接，可形成MDS1-Evi-1融合转录本。本文研究Evi-1和MDS1-Evi-1基因在MDS和post-MDS AML中的表达情况，分析其在发病机制中可能的作用。探讨这两个基因与MDS无效造血，血细胞发育异常的形态学改变(病态造血)和恶性克隆增殖之间的关系。 结果： 1．8例正常人Evi-1基因表达阴性，3／8例MDS1-Evi-1基因表达阳性，MDS1-Evi-1／GAPDH(M-E／G)＜0.1。5例贫血对照Evi-1和MDS1-Evi-1表达阴性。 2．33例MDS中，16例(1／8例RA，9／14例RAEB，6／10例RAEB-T，0／1例CMML)Evi-1表达阳性，RA患者Evi-1表达率明显低于RAEB(T)(p＜0.05)。20例(5／8例RA，10／14例RAEB，5／10例RAEB-T，0／1例CMML)MDS1-Evi-1表达阳性，M-E／G＞0.1，各亚型之间表达率无明显差异。 3．9例post-MDS AML中6例(66.7％)Evi-1表达阳性，34例denovo AML中5例(14.7％)Evi-1表达阳性(p＜0.01)。6／9(66.7％)例post-MDS AML和8／34(23.5％)例de novo AML患者有MDS1-Evi-1表达，前者表达率较高(p＜0.05)。 4．Evi-1和MDS1-Evi-1表达阳性的MDS病例没有发现3号染色体异常，但8例7号染色体异常(-7)的患者中，7例Evi-1表达阳性。 5．Evi-1或MDS1-Evi-1表达阳性和阴性MDS病例之间骨髓细胞凋亡相关参数没有明显差异。这两个基因表达阳性患者的CFU-GM，CFU-E和BFU-E平均产率较各自表达阴性者有不同程度的减少。 6．Evi-1或MDS1-Evi-1表达阳性和阴性MDS病例之间红系和粒系造血细胞形态异常患者的比例接近。但Evi-1表达阳性病例的小巨核细胞比例较高，且与Evi-1表达水平呈正相关(p＜0.05)。 7．将Evi-1表达阳性的人红白血病细胞系HEL与5，10，和20uM Evi-1反义寡核昔酸(AS)或其有义链(S)一起培养。①在10和20μM浓度时，AS组活细胞数显著少于S组(p＜0.001)；②AS组随AS浓度的加大(5→10→20μM)，活细胞数减少的程度加重(p＜0.001)；③AS组和S组活细胞数均少于对照组(未加AS或S)；④与20uM AS一起培养后，在HEL细胞仍可测到Evi-1mRNA，但表达水平降低，AS组与S组之