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人心肌细胞离子通道及葛根素对豚鼠心肌细胞离子通道影响的研究

岳红文  
【摘要】:心肌细胞膜离子通道在膜电位的形成与维持,心脏功能调节以及药物作用方面都有十分重要的生理意义。本研究应用先进的电生理技术-膜片钳全细胞记录法,研究人心房肌细胞膜离子通道的特性和葛根素对心肌保护作用的机理,为临床心肌保护工作提供理论依据。 一、人心房肌细胞膜离子通道的电生理研究 由于物种间的差异,直接研究人心肌细胞离子通道的电生理特性及其药理学作用特点,就具有非常重要的临床意义。由于得到阜外医院心脏外科医师的大力协助,从心脏CPB手术中获得病人心房组织,用酶解的方法得到单个、具有呼吸活性的心肌细胞,并应用膜片钳全细胞记录法,研究人(中国人)心房肌细胞膜离子通道的电生理特性,具体分析了Na~+、K~+、Ca~(2+)通道及其亚型的特性以及药理学作用特点。 1、Na~+电流:将细胞钳制在-100mV去极化50ms至0mV可记录到一快速激活和灭活的很大的内向电流,用同浓度的TEA(四甲基铵)替代灌流液中的Na~+后,该内向电流消失,可证明此电流为Na~+电流。作电流-电压曲线时,钳制电压在-100mV,以10mV的阶跃刺激去极化至+40mV,结果发现,Na~+电流在-70mV~-60mV时被激活,大约-40mV左右达到峰值(6.0±2.6nA),翻转电位为+40mV。 2、Ca~(2+)电流:细胞钳制在-40mV(以便灭活Na~+电流),去极化至0mV,测定Ca~(2+)电流。细胞外[Ca~(2+)]为1.2mM时,测试的11个细胞中只有两个记录到Ca~(2+)电流。当细胞外[Ca~(2+)]增加到2.4mM时,测试的6个细胞均记录到Ca~(2+)电流,平均值为31.5±9.6pA。加入3μM的去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)后,Ca~(2+)


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