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急性呼吸窘迫综合征的基础和临床研究

邱海波  
【摘要】:目的 探讨内源性一氧化氮(NO)和白介素(IL)-10对肺泡吞噬细胞(AM)致炎效应的影响;了解雷公藤单体T4(T4)、地塞米松和诱导型一氧化氮合酶抑制剂—硫酸甲基异硫脲(SMT)对AM致炎和抗炎反应的影响,并观察上述药物对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤的治疗作用;了解急性呼吸窘迫综合征(ARDS)病人的病死率及死亡危险因素。 方法 通过肺泡灌洗,分离AM;酶联免疫吸附法检测炎症介质水平;LPS腹腔注射(ip)复制小鼠急性肺损伤模型,肺湿重/干重比估计肺损伤程度;利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),观察基因mRNA的表达及稳定性;回顾性调查1991~96年的ARDS患者,应用队列研究,采用逐步Logistic回归,分析ARDS死亡危险因素。 结果 (1)10μg/ml LPS刺激AM,细胞培养上清液中NO产物浓度显著增加。以SMT抑制内源性NO释放,LPS刺激24小时后,上清液中IL-1β、IL-6浓度显著增高,但肿瘤坏死因子(TNF)α浓度无明显改变。以亚硝基乙酰青霉胺(SNAP)外源性补充NO,能够逆转SMT对IL-1β、IL-6的刺激作用。50ng/ml的重组IL-10,明显抑制LPS诱导的TNFα、IL-1β和IL-6释放,而150ng/ml的IL-10单克隆抗体,则增加上述细胞因子释放。 (2)T4(500ng/ml)和地塞米松(10~(-4)M)对LPS(10μg/ml)诱导的TNFα、IL-1β、IL-6和IL-10及NO释放具有明显抑制作用。SMT(500μM)刺激AM释放TNFα、IL-1β、IL-6增加,而IL-10和NO产物明显减少。LPS刺激AM后5小时,TNFα、IL-6、IL-10和iNOS基因的mRNA表达量均明显增加。T4或地塞米松明显降低上述因子和iNOS基因的mRNA表达量。SMT组TNFα、IL-6 mRNA表达量明显增加,但IL-10和iNOS mRNA表达减少。另外,T4对TNFα、IL-6和IL-10 mRNA稳定性无明显影响。 (3)昆明小鼠LPS(20mg/kg)ip,12小时后血浆和肺泡灌洗液(BALF)中TNFα、IL-1β、IL-6、IL-10和NO产物水平均明显增高。LPS注射前30分钟注射T4(85ug/kg)或地塞米松(70mg/kg),动物血浆中TNFα、IL-1β、IL-6、IL-10和NO产物的浓度均明显降低。地塞米松组BALF中IL-1β、IL-6、IL-10明显降低。T4组BALF中TNFα和NO产物水平显著降


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